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UNINGÁ - Centro Universitário Parasitologia Técnica de Willis Mollay Professora: Carla Resende Alunas: Kauana de Souza Santos R.A: 18596.19 Rayanne Eloise Vieira da Silva R.A: 11264.13 Maringá 2019 TÉCNICA DE WILLIS-MOLLAY Princípios: Baseado na diferença de densidade especifica entre ovos de helmintos, oocistos e cistos de protozoários, que usa o princípio da flutuação em solução saturada. Indicação: Diagnóstico de ovos, oocistos e cistos em fezes. Material: Fezes frescas refrigeradas. Método: Willis-Molay Conservação para envio: Até 48 horas refrigerado entre 2º a 8ºC. Prazo para entrega do resultado: 48 horas Materiais utilizados: → 2 a 5g de fezes → Solução saturada → Peneira → Gaze → Dois copos comuns ou Beckers → Palito de sorvete ou bastão de vidro → Lamina de microscópio → Lamínula A solução saturada de cloreto de sódio (NaCl) com densidade específica de 1,20g/ml é preparada pela adição do NaCl em água destilada-deionizada ou corrente quente ou em ebulição, até que o excesso acrescentado não mais se dissolva na solução (aproximadamente 40g de NaCl em 100ml de água). A densidade específica é crítica, devendo-se usar um densitômetro para controlar e ajustar a solução. Filtrar em papel- filtro. SOLUÇÃO SATURADA DE AÇÚCAR Açúcar cristal 500g Agua 360ml Fenol 6,5ml Preparo: Dissolver o açúcar na água e levar ao fogo deixando levantar fervura por alguns minutos. Após fervura deixe descasar por 1 a 2 min. Procedimento: 1. Misturar em um Becker um grama de fezes em 10ml de solução saturada; 2. Filtrar em gaze, com auxílio de um peneira, para outro Becker; 3. Colocar em um pequeno tubo (10ml) de bordo perfeito, o filtrado, até que o líquido forme um menisco no bordo do tubo; 4. Colocar sobre o tubo uma lamina, de modo que entre em contato com o líquido; Tempo varia muito de acordo com a densidade da solução saturada. Se a solução possui uma densidade alta o tempo que vai levar para flutuar é menor e precipita num menor tempo também. Se possui uma menor densidade deve deixar mais tempo para ocorrer a flutuação 5. Deixar repousar durante 1 a 2 minutos; 6. Retirar a lamínula com movimento uniforme, colocando-a sobre uma lâmina; 7. Examinar ao microscópio, iniciando com objetiva de pequeno aumento. Funcionalidade da técnica: Esta técnica indicada para diagnóstico de nematóides cujos ovos são leves, tais como: Ancylostoma spp, Spirocerca lupi, Ancylostoma braziliense, Ancylostoma caninum, Ancylostoma duodenale, Necator americanos.; e também pode ser usada para oocisto de coccídios (Cystoisopora, Sarcocystis, Toxoplasma). Imagens de algumas visualizações no microscópio. Vantagens: Formação na superfície do tubo de uma membrana clara com poucos detritos fecais e a remoção seletiva de ovos e cistos, mesmo quando em pequeno numero de bolo fecal. Desvantagens: Com a alta densidade dos reagentes, pode causar alterações na parede dos ovos e dos cistos, dificultando a identificação. Quando indicado esse método? O objetivo principal deste método é evidenciar ovos leves, como os de Ancilostomideos por exemplo. Assim como facutativantes larvas desses helmintos. Método Qualitativo: Os métodos é qualitativos pois é utilizados para a demonstração da presença das formas de ovos de helmintos, oocistos e cistos de protozoários. Referencias: TÉCNICA DE WILLIS-MOLLAY publicado em 20 de agosto de 2018, disponível em: https://prezi.com/vzqb2volcoso/tecnica-de-willis-mollay/ TÉCNICA DE WILLIS-MOLLAY. Disponível em: <http://r1.ufrrj.br/wp/iv/771/tecnica- de-willis-mollay/>. Acesso em: 10 mar. 2018. TÉCNICA DE FLUTUAÇÃO. Disponível em: <https://pt.scribd.com/doc/67550658/Tecnica-de-Willis-1921>. Acesso em: 10 mar. 2018. MÉTODO de Willis. Disponível em: <https://pt.slideshare.net/damoPortoGama/mtodo- de-willis>. Acesso em: 10 mar. 2018