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GD - Cinética Enzimática 01 - Embora existam métodos gráficos para a determinação acurada dos valores de Vmáx e de Km de uma reação catalisada enzimaticamente, esses valores podem ser determinados rapidamente a partir das velocidades iniciais obtidas em concentrações crescentes do substrato. Usando as definições de Km e Vmáx estime, utilizando a equação de Michaellis-Menten, os valores aproximados destas constantes para a reação enzimática que fornece os seguintes resultados: 02 - Os dados experimentais abaixo foram coletados durante um estudo da atividade catalítica de uma peptidase intestinal capaz de hidrolisar o peptídio glicilglicina: Glicilglicina + H2O 2 glicina A partir destes dados determine, por análise gráfica, os valores de Km e de Vmáx para esta preparação de enzima e seu substrato. 03- As fosfatases ácidas são produzidas pelos eritrócitos, pelo fígado, rim, baço e glândula prostática. Do ponto de vista clínico, a enzima prostática é a mais importante, pois sua concentração aumentada no sangue é, freqüentemente, indicação de câncer da próstata. A fosfatase da próstata é fortemente inibida pelo íon tartarato, enquanto as fosfatases de outros tecidos não são inibidas. Como esta informação pode ser usada no estabelecimento de um método para dosagem da atividade da fosfatase ácida da próstata no soro sangüíneo humano? 04 - Baseado na tabela abaixo responder: a) KM e Vmax na presença e ausência de inibidor b) Que tipo de inibidor é este? Justifique. 5 - As prostaglandinas pertencem a uma classe de eicosanoides (derivados de ácidos graxos com uma diversidade de ações extremamente potentes sobre os tecidos de vertebrados). São responsáveis pela produção de febre, inflamação e dores associadas. As prostaglandinas são derivadas do ácido araquidônico, um ácido graxo de 20 carbonos, por uma reação catalisada pela enzima prostaglandina-endoperóxido- sintase. Essa enzima, uma ciclo-oxigenase, utiliza oxigênio para converter ácido araquidônico em PGG2, o precursor direto de muitas prostaglandinas diferentes. Os dados cinéticos abaixo são de uma reação catalisada pela prostaglandina- endoperóxido-sintase. Focando nas primeiras duas colunas, determine Vmáx e Km da enzima. Ibuprofeno é um inibidor da prostaglandina-endoperóxido- sintase. Ao inibir a síntese das prostaglandinas, o ibuprofeno reduz a inflamação e a dor. Utilizando os dados da primeira e da terceira coluna da tabela acima, determine o tipo de inibição que o ibuprofeno provoca na endoperóxido-sintase. 6 – Descreva os modelos de reação enzimática envolvendo mais de um substrato. Através da analise do gráfico destas reações enzimáticas, como podemos diferenciar o mecanismo de reação? 7 – O que são inibidores competitivos, incompetitivos e mistos?
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