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Hematologia • Constituição: ↪Elementos figurados (parte "sólida“) 45% de volume total. ↳São divididos em: →Leucócitos ou Glóbulos Brancos (células de defesa) →Glóbulos vermelhos, eritrócitos ou Hemácias (transporte de oxigênio) →Plaquetas (coagulação sanguínea). →Plasma ou soro (55%). Soro=plasma sem fibrinogênio (sem fatores de coagulação). ● Produção: órgãos hematopoiéticos (medula óssea, baço e linfonodos). *Hematopoiese ou hemopoiese. • Hematopoese ↪Formação e desenvolvimento das células sanguíneas. ↳Através da medula óssea e dos órgãos linfóides produz e repõe as células do sangue. ↳Neutrófilos, leucócitos, plaquetas, hemácias/eritrócitos → A produção destas células depende de uma célula tronco denominada STEM-CELL (SC) com potencial de PROLIFERAÇÃO, AUTO-RENOVAÇÃO e DIFERENCIAÇÃO. ●A linhagem mielóide é constituída pelos neutrófilos, eosinófilos, basófilos e monócitos, além de hemácias e dos megacariócitos. ●Na linhagem linfóide três subpopulações celulares principais são observadas: linfócitos T, B e células NK. ●A hematopoese compreende três setores: →Progenitores celulares precoces (STEM CELLS), que suportam a hematopoiese. →Precursores comprometidos (stem cell committed ou células PROGENITORAS COMPROMETIDAS). São unidades formadoras de colônias (CFU-GEMM, CFU-L, BFU-E - unidade formadora de blastos) que expandem a população de células diferenciadas (leucócitos, eritrócitos, etc). →Fatores reguladores do crescimento hematopoiético que agem sobre o sistema. IL, CSF (colony stimulating factors). ●A formação das células sanguíneas começa desde a fase intrauterina. →VIDA INTRAUTERINA (LINHAGEM PRIMITIVA) Surgimento do tecido sanguíneo – Formação do terceiro folheto embrionário - Mesoderma →APÓS O NASCIMENTO (LINHAGEM DEFINITIVA) ↪Produção de células x Idade humana ↳A hematopoiese altera os seus sítios de produção durante a gestação e de acordo com a ontogênese. →Mesoblástico: aparecimento de células sanguíneas no saco vitelino ocorre desde o 19º dia até o 2º mês de gestação. →Hepático: inicia após a regressão do saco vitelino, por volta da 6ª semana. →Medular: a partir do 6º mês da vida intrauterina. Até os cinco anos de idade a medula de todos os ossos do corpo participam do processo. *Há uma pequena produção esplênica (início - 3º mês) e linfática (início – 5º mês) durante a gestação, que perdura pouco tempo após o nascimento. ↳Logo após o nascimento a medula óssea passa a ser o único local de produção de eritrócitos, granulócitos e plaquetas. (o espaço medular total é ocupado pela MEDULA VERMELHA ↳Na infância, após aos 4 anos, aparecem depósitos de células gordurosas nos ossos longos (MEDULA AMARELA) e a medula vermelha fica restrita aos ossos do tronco, processo denominado: “Convergência Troncular da Hematopoiese” ↳Na fase adulta a medula é ativa no vertebras, esterno, costelas, pelvis e e crânio. ↳ Na fase senil a MEDULA CINZENTA corresponde à substituição do tecido medular por fibroblastos (ossos longos). ●A medula óssea com atividade hematopoiética é conhecida como medula vermelha, enquanto o restante dos ossos possui medula óssea amarela (preenchida com tecido gorduroso). ↳Em condições patológicas como anemia grave ou comprometimento medular severo, o BAÇO e o FÍGADO podem voltar à sua atividade produtiva de células, processo denominado METAPLASIA MIELÓIDE (hematopoiese extramedular). ●COMPONENTES DA MEDULA ÓSSEA ↳ 1. Estroma: Meio adequado: proliferação/diferenciação dos precursores hematopoiéticos 2. Células hematopoéticas →Dividido em 2 componentes: celular e não-celular →Hematopoiese depende: • microambiente adequado (células do estroma) • FATORES DE CRESCIMENTO (ou fatores estimuladores de colônias = CSF) ●Fatores reguladores da hematopoiese →Eritropoetina (EPO): Produzida pelo parênquima renal -Atua na proliferação e diferenciação das CFU-E principalmente no estágio de transformação do proeritroblasto em eritroblastos -Aumenta a síntese de hemoglobina - Estimula a saída de reticulócitos do compartimento medular →GM-CSF: é uma glicoproteína produzidas pelas células perivasculares. -Fator estimulador de colônias de granulócitos e macrófagos →IL-3: proteína conhecida pela sua ação estimuladora de múltiplas linhagens celulares, atua sobre as células imaturas na medula óssea. →Trombopoetina (TPO): Hormônio produzido pelo fígado, rins e músculo esquelético - Estimula a proliferação e a diferenciação de progenitores de megacarióticos. ●NO MICROAMBIENTE DA MEDULA ÓSSEA →A interação destes fatores com as células imaturas leva a proliferação, diferenciação e maturação de COLÔNIAS DE CÉLULAS PROGENITORAS de duas linhagens principais: 1. Linhagem mielóide → Células progenitoras - CFU-GEMM: unidade formadora de colônias para: -GRANULOPOESE - Formação de granulócitos (neutrófilo, eosinófilos e basófilos). -ERITROPOIESE - Formação de eritrócitos (hemácias). -MONOCITOPOESE - Formação de monócitos. -TROMBOCITOPOESE - Formação de megacariócitos (plaquetas). 2. Linhagem linfóide → Células progenitoras - CFU-L: unidade formadora de colônias para: -LINFOPOESE - Formação de Linfócitos (T e B). ●Eritropoese ↪Eritrócitos: Bicôncavos, sem núcleo, vida média de 120 dias. →Vantagens da perda do núcleo para a hemácia: -Maior espaço para carrear a hemoglobina. -Menor consumo de O2. -Maior maleabilidade e deformabilidade. -Menor chance de ruptura. →Principal estímulo (produção) → hipoxia → ↑eritropoetina: -Hemorragias. -Hemólise. 1 ●Leucopoese ↪Leucócitos: sistema de defesa do organismo contra doenças e infecções. →Por meio de fagocitose, eles defendem os tecidos contra invasão de organismos ou substâncias estranhas, removendo também os restos resultantes da morte ou de ferimentos celulares. →Presentes no sangue em muito menor número que os eritrócitos, com cerca de 4.000 a 10.000 leucócitos. →Alguns leucócitos são capazes de passar através da parede intacta dos vasos chamada de diapedese. ●Granulopoese ↪Formação Neutrófilo, Eosinófilo e Basófilo, dura cerca de 11 dias e pode ser dividida em compartimentos: →Compartimento de reprodução: Responsável pelas divisões celulares (mieloblasto e promielócito) – as células apresentam granulações primárias (azurófilas) ricas em mieloperoxidase. →Compartimento de maturação: Responsável pela lobulação do núcleo e aparecimento de granulações específicas (mielócito, metamielócito, bastonete e segmentado). Granulócitos constituem 50 a 60% de todos os leucócitos. (Neutrófilos, eosinófilos e basófilos) ●Linfopoese ↪Formação de LINFÓCITOS a partir de células-tronco comprometidas com a linhagem linfóide que se desenvolvem a partir das CÉLULAS-TRONCO HEMATOPOÉTICAS PLURIPOTENTES na MEDULA ÓSSEA. →Constituem 30 a 40% de todos os leucócitos no sangue periférico. →Células B (amadurecem na medula óssea) e células T (amadurecem no timo) →Na técnica hematológica convencional, não é possível a diferenciação entre linfócito T ou B, sendo observado uma única forma. A diferenciação só pode ser realizada através de técnicas especializadas: imunofluorescência ou citometria de fluxo. →As células pré- T, quando entram no timo, não expressam oscoreceptores CD4 e CD8. Com o avanço do processo de maturação passam a expressar baixos níveis das moléculas CD4 e CD8 e do receptor de células T, responsável pelo reconhecimento de antígenos. →Células-tronco linfoides se diferenciam em - LINFÓCITOS-T - LINFÓCITOS-B - Natural Killers - NK (CÉLULAS MATADORAS NATURAIS) →Os linfócitos T deixam o timo ainda “virgens”, pois essas células não foram estimuladas. →Os linfócitos B também deixam a medula óssea não estimulados. ● Monopoiese ↪Os monócitos são células grandes; são capazes de entrarem no tecido conjuntivo frouxo, onde se desenvolvem em grandes células fagocíticas denominadas macrófagos, que podem fagocitar bactérias, micobactérias, fungos, protozoários ou vírus. ●Trombocitopoese ↪Plaquetas são restos celulares, originados dos megacariócitos. -Valores de referência: 150.000 e 400.000/ mm³ -Sobrevivem por 8 a 11 dias na circulação -Função: hemostasia sanguínea. 1. Manutenção da integridade (estado de vedação) dos vasos sanguíneos. 2. Formam rolhas homeostáticas para interrupção da perda de sangue por vasos lesionados e, no processo, promovem a coagulação dos fatores plasmáticos →Trombopoetina (TPO): Síntese: Hormônio produzido pelo fígado, rins e músculo esquelético; Função: Estimula a proliferação e a diferenciação de progenitores de megacarióticos. ●Índices Hematimétricos ↪Hemograma: Analisa morfológica e quantitativamente os elementos figurados do sangue. →Amostra: Sangue total (não é centrifugado), EDTA (tubo roxo) possui anticoagulante que preserva a morfologia das células. ➢Eritrograma (análise da série vermelha) ➢Leucograma (análise da série branca) ➢Plaquetograma (análise das plaquetas) ↪Eritrograma: É a parte do hemograma que avalia a massa eritróide circulante. • A análise da série vermelha é realizada pelas determinações dos índices hematimétricos: ✓Contagem de hemácias (Hm) ✓Dosagem da hemoglobina (Hb) ✓Hematócrito (Ht) ✓Volume Corpuscular Médio (VCM) ✓Hemoglobina Corpuscular Média (HCM) ✓Concentração da Hemoglobina Corpuscular Média (CHCM) ✓Amplitude de Distribuição dos Eritrócitos (RDW) • A análise morfológica da série vermelha é realizada pela observação do esfregaço sanguíneo. →Hemoglobina: é um hetero-tetrâmero formada: -Globina – 2 pares de cadeias polipepitídicas (estrut. globular 4 nária) -Heme – estrutura porfirínica que contêm o íon ferro (Fe2+ “ferroso”), que se combina reversivelmente com uma molécula de oxigênio. →Dosagem de hemoglobina: -Método não automatizado: - Utiliza-se líquido de Drabkin, para lisar as hemácias As diferentes células sanguíneas são contadas e medidas a partir dos impulsos elétricos que geram quando imersas em um meio condutor (solução eletrolítica) - A concentração da hemoglobina liberada na amostra é determinada pela absorbância ótica (cor) da solução, através da leitura em espectrofotômetro (540 nm). →Hematócrito: É a porcentagem de eritrócitos em relação ao volume total de sangue. - O resultado em % exprime a concentração de eritrócitos obtidos por centrifugação do sangue não coagulado. -Valor normal: 40 a 50% (adulto) →Métodos automatizados e não automatizados: →Centrifugação - (microhematócrito) → Calculado (Contagem de hemácias/VCM) →Medido pela soma de pulsos elétricos (impedância) →Impedância elétrica: = Concentração de Hb abaixo dos valores normais = Queda do HEMATÓCRITO = Contagem de ERITRÓCITOS no sangue INDICAÇÃO DE TRANSFUSÃO – CUIDADO!!! ↪Contagem de Hemácias: Determina o número de células eritrócitos por mm3 (ou µL) →Contagem na câmara de Neubauer: Colocar na câmara de Neubauer e contar 5 quadrantes centrais → (5 campos) x 5 x10 x 200 ou Resultado = n° contagem x 10.000 →Método automatizado: Sensores no aparelho: impedância. O aparelho diferencia as células sanguíneas pelo tamanho. A contagem fornece o número de hemácias por microlitro (milímetro cúbico) de sangue total. →Valores de referência: Mulheres: 4.500.000 - 5.000.000/mm3 Homens: 5.000.000 - 5.500.000/mm3 ❖Contagem de eritrócitos baixa = anemia ❖Contagem de eritrócitos alta = policitemia ↪Anemia: O volume médio gira em torno de 80 a 100 fl (l x 10 -15 ) ¤ Expresso em fentolitros (fL). Determina a morfologia das hemácias e leva ao diagnóstico do tipo de anemia, classificando-as em: Anemia microcitica - VCM menor que 80 fl Anemia normocítica - VCM entre 80 e 100 fl Anemia macrocítica - VCM maior que 100 fl Métodos de determinação: cálculo: Hct x 10 RBC Automação (citômetro de fluxo) ou impedância ↪VCM: Volume Corpuscular Médio ❖ Indica o volume médio dos eritrócitos. (Referente a tamanho) ↪HCM: Hemoglobina Corpuscular Média ↪CHCM: Concentração de Hemoglobina Corpuscular Média ●A interpretação dos valores do CHCM leva ao diagnóstico do tipo de anemia, classificando-as em: ✓Anemia Hipocrômica - CHCM menor que 32 pg ✓Anemia Normocrômica - CHCM entre 32 e 37 pg ✓Anemia Hipercrômica - CHCM maior que 37 pg (comum na esferocitose) ↪RDW - Red blood cells Distribution Width (Amplitude de Distribuição dos Eritrócitos)
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