Aula 7-TECNICAS DE INOCULACaO DE MICRO-ORGANISMOS

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TÉCNICAS DE INOCULAÇÃO 
DE MICRO-ORGANISMOS
Em microbiologia, há várias técnicas de 
inoculação de micro-organismos; algumas 
são utilizadas para exames qualitativos e 
outras para estudos quantitativos 
(contagem de bactérias), as quais serão 
descritas adiante. O inóculo é definido 
como o material utilizado para iniciar uma 
cultura microbiana.
 
 
Normas utilizadas
- O fio e a alça de platina devem ser sempre flambados antes 
e depois de qualquer inoculação, ou seja, devem ser 
aquecidos ao rubro no cone interno do bico de Bunsen. 
Para a coleta do material, devem ser esfriados na parte 
interna do recipiente com meio de cultura;
- Os recipientes (tubos de ensaio, placas de Petri etc) com 
meio de cultura devem sempre ser abertos próximo ao bico 
de Bunsen;
- A boca dos tubos de ensaio deve ser aquecida após a 
retirada e antes da colocação da tampa (boneca). A tampa 
nunca deve ser colocada sobre a bancada, sendo retirada e 
mantida segura pelo dedo mínimo da mão direita durante a 
inoculação.
Técnica de semeadura em meio líquido
A cultura de micro-organismo é inoculada 
em um tubo de ensaio contendo meio 
líquido estéril utilizando-se uma alça de 
platina ou níquel cromo.
 
 
Figura 1. Transferência asséptica. (a) A alça é aquecida até a incandescência, sendo rapidamente 
resfriada no ar. (b) O tubo é destampado. (c) A ponta do tubo é passada pela chama. (d) A amostra é 
coletada com a alça estéril. (e) Após a remoção da amostra, o tubo é novamente passado na chama, e a 
amostra, transferida para um meio estéril. (f) O tubo é fechado e a alça é novamente aquecida, antes de 
ser dispensada.
Técnica de semeadura em meio sólido 
inclinado
A cultura de micro-organismo é inoculada 
em um tubo de ensaio contendo meio 
sólido inclinado estéril por meio de estrias 
na superfície do Agar, utilizando a alça de 
platina.
 
 
Figura 2. Técnica de semeadura em meio sólido inclinado
Técnica de semeadura em meio 
sólido por picagem profunda
A cultura de micro-organismo é inoculada 
em um tubo de ensaio contendo meio 
sólido estéril utilizando a agulha de 
platina: a inoculação deverá ter a 
profundidade de 2/3 do meio e não deverá 
ser mais do que uma única picada.
 
 
Figura 3. Técnica de semeadura em meio sólido por picagem profunda
Diluição da amostra para 
inoculação
 
 
Procedimento de contagem 
de viáveis por meio de 
diluições em série da 
amostra e o método de 
semeadura em 
profundidade. O fator de 
diluição corresponde à 
recíproca de diluição. 
Técnicas de semeadura em 
meio sólido em placa
 
 
 
 
Técnica de semeadura por 
esgotamento
A técnica do esgotamento em placa 
consiste em depositar sobre um ponto da 
superfície do meio uma alíquota do 
material e depois espalhá-lo em dois ou 
três setores, por meio de alça de platina, 
sem recarregá-la, de maneira a obter 
quantidades progressivamente menores 
do material
a)
Técnica de semeadura por esgotamento, para obtenção de culturas puras. A alça é utilizada para 
coletar uma alíquota de inóculo a partir do meio de cultura. (b) A semeadura é realizada sobre um 
meio sólido estéril, em placa, pelo espalhamento dos micro-organismos. Após a semeadura no 
setor inicial, semeaduras subseqüentes são realizadas, formando ângulos em relação à primeira. (c) 
Aspecto de uma placa semeada após a incubação. Colônias da bactéria Micrococcus luteus 
desenvolvendo-se em placas de ágar sangue. A partir das colônias isoladas, culturas puras podem 
ser obtidas.