DNA rec

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DNA RECOMBINANTE
As moléculas de DNA que contêm segmentos ligados covalentemente, derivados de 2 ou mais fontes de DNA (CAMPBELL, 2006).
 Também denominado DNA quimérico, referente a Quimera, monstro oriundo a mitologia grega, com cabeça de leão, corpo de bode e cauda de serpente.
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A produção do DNA recombinante requer corte e emenda de 2 fitas de DNA realizados com endonucleases de restrição, conseguindo sequências finais complementares em moléculas de DNA de diferentes (CAMPBELL, 2006).
A emenda é feita com DNA-ligases.
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O uso do DNA de fonte viral ou bacteriana, como um dos componentes do DNA recombinante, permite que os cientistas tenham a vantagem do rápido crescimento dos mesmos obtendo maiores quantidades de DNA recombinante.
Os plasmídeos são os mais utilizados para a clonagem de pequenos fragmentos de DNA; são geralmente obtidos a partir de células bacterianas, facilmente reintroduzidos nestas células e possuem capacidade autônoma de replicação. 
Bibliotecas de DNA: Uma biblioteca de DNA é uma coleção de fragmentos de DNA obtidos a partir da ação das endonucleases de restrição, ligados aos vetores apropriados e clonados.
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DNA recombinante em estado puro e quantidades suficientes: clonagem
O termo clone refere-se a uma população geneticamente idêntica
Quando o plasmídeo é recebido por uma bactéria, o DNA inserido carregado por ele vai junto, a bactéria que contém o DNA inserido pode então ser multiplicada em tanques de fermentação em condições apropriadas, permitindo a expressão do novo gene.
Ex. hormônio de crescimento, insulina, etc.
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BACTÉRIAS COMO FÁBRICAS DE PROTEÍNAS
Produção de insulina humana em E. coli.
Gene da insulina não é contínuo, apresenta um íntron
Bactérias não fazem splicing
Uso de 2 DNAs sintéticos, um para codificar a cadeia A da insulina e outro para a cadeia B
Os DNAs sintéticos são colocados em um plasmídio vetor separado
Cada grupo de bactérias produz uma cadeia polipetídica da insulina que posteriormente são misturadas, produzindo a insulina humana final.
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ORGANISMOS TRANSGÊNICOS
Os organismos que carregam genes herdáveis introduzidos por engenharia genética são designados transgênicos. O gene introduzido é denominado trangene.
Camundongos: o método envolve microinjeção do DNA contendo o gene desejado no núcleo de um ovo fertilizado que integra-se ao genoma.
Os ovos são implantados em uma mãe de aluguel para desenvolverem-se
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ORGANISMOS TRANSGÊNICOS
Já Vítor, produzido pela Universidade Federal de São Paulo (Unifesp), nasceu no dia 24 de dezembro de 2001
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ORGANISMOS TRANSGÊNICOS
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Tomates com vida longa
Gene desativado: produz etileno, composto chave no amadurecimento
Gene para proteína tóxica isolada da bactéria Bacillus thuringensis para lagartas
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ORGANISMOS TRANSGÊNICOS
A engenharia genética de plantas de interesse agrícola é uma área de intensas pesquisas
Genes para maior produtividade, resistência ao congelamento (antifreeze), encontrados em peixes da Antártida e a pestes foram introduzidos em plantas comercialmente importantes, como morangos, tomates e milho
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Animais de importância econômica mamíferos e peixes foram geneticamente alterados
Foco: terapia gênica, por meio das quais células de tecidos específicos de uma pessoa viva sejam alterados de modo a aliviar os sintomas da doença
Ex. síndrome do menino da bolha – evitar infecções
Causa da doença é falta da enzima adenosina desaminase. Proposta retirar a célula doente, modificá-las em laboratório e recolocá-las
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A eritropoetina é um hormônio que estimula a produção de eritrócitos na medula óssea.
É perdida durante a hemodiálise e falência renal crônica – anemia
Necessitam de transfusões regulares com risco de contaminações e reações alérgicas
Eritropoetina produzida por engenharia genética Epogen
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RECEPTORES: canais iônicos controlados por ligantes /
 receptores ionotrópicos