resumo imunologia prova 1 / imunologia UnB

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Aula1 
 
Resposta imune inata
Antígeno inespecífica, reconhece padrões moleculares PAMPS
inflamação aguda
dois mecanismos para impedir patógenos:
· barreiras- epitélio, ácidos estomacais, ph, enzimas, microbiota
· inflamação - fagócitos, células dendríticas
· células do complemento
· célula NK
· ativação de macrófagos
Resposta imune adaptativa 
Antígeno dependente, específica
Inflamação crônica
Linfócitos
· Humoral: LB- liberação de anticorpos
· Celular: LT
-CD4+ helper, estimula ativação macrófagos, inflamação
-CD8+ elimina, libera grânulos induz apoptose
Células 
Fagócitos: função- ingerir e destruir microrganismos e se livrar dos tecidos
danificados. Ação por: recrutamento das células para locais de infecção,
reconhecimento e ativação pelos microrganismos, ingestão dos microrganismos por
processo de fagocitose e destruição dos microrganismos ingeridos
Neutrófilo: mais abundante, granulócito circulante
fases iniciais da resposta inflamatória. vida curta
Núcleo com 3 a 5 lóbulos, podem migrar rapidamente para locais de infecção após a entrada de microrganismos
Monócitos - originam de uma célula precursora na medula óssea, circulam no sangue e são recrutados para os tecidos em reações inflamatórias, onde eles amadurecem em macrófagos. 
Núcleo em formato de feijão com citoplasma granular contendo lisossomas.
macrófagos- ingestão e morte, quando ativados secretam várias citocinas 
que agem nas células do SI, sinalizando o recrutamento de cel de defesa para os locais de infecções.
Geram ROS e NO toxicas p/microorg
· Mastócitos: são células derivadas da medula e presentes na pele e mucosa epitelial, contendo abundantes grânulos citoplasmáticos cheios de histamina e outros mediadores. 
· Basófilos: menos de 1% dos leucócitos podem ser recrutados para alguns locais inflamatórios. Os basófilos contêm grânulos que se ligam a corantes básico. histamina
· Eosinófilos: granulócitos circulante, sanguíneos que expressam grânulos citoplasmáticos contendo enzimas que são danosas às paredes celulares de parasitas, mas também podem danificar os tecidos do hospedeiro. Normalmente presentes em tecidos periféricos, como mucosas.
com grânulos contra helmintos e doenças alérgicas
Células apresentadoras de antígenos (APCs):
· células dendríticas
· macrófaos
· linfócitos B
Células dendríticas: As células dendríticas são as APCs mais importantes para a ativação das células T imaturas
Tem dendritos q são projetados para captura de patógenos
convencionais: na pele, mucosas, parênquima regiões de contato
responde aos microrganismos migrando para os linfonodos
projeto o pseudópode fagocita o patógeno e apresenta o antigeno p/ os linfócitos
Linfócitos: expressam receptores de antígenos clonalmente expressos, cada um específico para um determinante antigênico diferente.
· linfócitos B: produzem os anticorpos. ativa macrófagos/ complemento
· Linfócito T: são divididos em vários subgrupos,
linfócitos T auxiliares (helper) CD4+. Precisa da apresentação de antígenos é ativada e secreta citocinas para estimular ativação de macrófagos, inflamação, ativação e proliferação de linfócitos T e B
LT CD8+ quando ativado reconhece células alvo, e libera grânulos induzindo apoptose 
LT regulador- controla resposta inflamatória, importante na tolerancia
Órgãos linfóides
· primários 
função: desenvolvimento e maturação de células do SI
· medula óssea maturação LB, células sanguíneas
função: hematopoese- geração de células sanguíneas
proliferação e maturação de células precursoras da MO feita por citocinas
(Hemácias, granulócitos, monócitos, células dendríticas, plaquetas, linfócitos B e T e
células NK) se originam de uma célula-tronco hematopoética comum (HSC) na
medula óssea
· timo maturação LT
localizado: mediastino anterior superior. possui 2 lobos, com vários lóbulos, cada lóbulo com medula e córtex
Córtex: isolado por cel epiteliais corticais q produzem IL-7( necessária desenvol. celula T). densa presença de linfócitos T e desenvolvi. timócitos
macrófagos
seleção de MHC1/2 , seleciona LT funcionais e descarta os auto-reativos
Medula: células epiteliais tímicas medulares (MTEC) importante na apresentação de antígenos p/ cel. 
cel.T maduras q migram do córtex
corpúsculo de Hassal- restos de cel em degeneração. aumenta com o tempo e esta relacionado a doenças auto-imunes.
· secundários
manter ambiente adequado para que SI possa funcionar de forma correta. contato com microorg
· Vasos linfáticos: drena fluidos ( linfa) dos tecidos (q o sist. circulatório não consegue) e leva para os linfonodos. 
· linfonodos: localizados no corpo todo ao longo de canais linfáticos.
Um linfonodo é cercado por uma cápsula fibrosa, sob a qual existe um sistema sinusal cercado por células reticulares fibroblásticas (FRC), preenchido com linfa, macrófagos, células dendríticas e outros tipos celulares, o sino subcapsular tbm contém vasos aferentes onde a linfa entra . abaixo está o córtex externo cheio de folículos zona celB, alguns com centros germinativos (folículos secundários- proliferação cel B), sem centros( primários-linfócitos B virgem)
cortex em volta dos folículos= paracortex e ontem células zona de cel T
depois tem a medula e a sino medula com vasos eferentes onde a linfa sai.
· baço: localizado no quadrante superior do abdômen
função: remover células sanguíneas velhas/danificadas (por macrófagos) e partículas (imunocomplexos e microrganismos opsonizados) da circulação e iniciar as respostas imunes adaptativas aos antígenos originados no sangue
é recoberto por uma cápsula, e é dividido em polpa vermelha( com sinusóides vasculares cheios de sangue) e polpa branca rica em linfócitos
Uma região de células especializadas circundando o sino marginal, chamada de zona marginal, forma uma fronteira entre a polpa vermelha e a polpa branca.
A polpa branca contém zonas de células B (folículo) e T, Os folículos com cél B ocupam o espaço entre o sino marginal e a bainha periarteriolar. as áreas de células T no baço contém uma rede de complexos conduítes composta de proteínas da matriz recobertas por células do tipo FRC. 
· MALT: tecidos linfóides associados a mucosas- qualquer local com contato exterior tem um revestimento de tecido linfóide portas de entrada
SI cutâneo: pele
Captura de antígenos pelas Cel dendríticas entra nos vasos linfáticos e vai para o linfonodo onde tem muitos células T 
primeira barreira a epiderme com queratinócitos, células dendríticas, LTCD8. na derme com mastocitos, macrófagos, LTCD4, CDT, e vasos linfáticos para a saída dos microorganismos
SI mucoso:
 gastrointestinal(GALT) com placas de peyer, 
broncopulmonar(BALT)
ex:GALT primeiro possui uma barreira física,o muco(dificulta acesso) e o epitélio mucoso com células epiteliais, linfócitos intra-epiteliais, cel de paneth e células M(captura e leva antígenos do lûmem p/ serem fagocitados por cel dendríticas), logo abaixo delas fica a placa de peyer (tem folículos ricos em LT) 
na lâmina própria, assim como cel dendríticas, cel B e T, mastócitos , macrófagos, plasmócitos(secretores de anticorpo- IgA). Logo abaixo está o mesentério com o linfonodo mesentérico
 
células epiteliais intestinais com receptores NLR e toll-like para reconhecer
 Aula 2
Receptores
Receptores de superfície:
· tipo toll (TLR): 
reconhecem PAMPS, padrões associados a patógenos (LPS, manose,RNA dupla hélice). presentes na membrana(1,2,4,5,6) ou nos endossomos(3,7,8,9) para identificar RNA ou DNA de microorganismos fagocitados.
· tem um domínio voltado para o citosol, para ativar uma cascata de sinalização, ativa as proteínas adaptadoras, e leva a fator de transcrição e expressão de genes(citocinas, interferon, quimiocinas) 
· toll-4 depende de CD14,e reconhece LPS
· N-formyl: proteínas bacterianas
· receptor de manose: reconhece carboidratos 
· scavenger: LPS, peptideoglicano, proteínas
Receptores citosólicos: 
· NLR ou NOD: reconhecem PAMPS/DAMPS, peptidoglicano bacteriano
· RLR ou RIGS : RNA viral
· CDS sensores citosólicos: DNA viral
importantes para reconhecerem vírus queconseguem se inserir no citosol, devido a transdução gênica viral. 
O NOD detecta PAMPS e DAMPS, se funde a uma proteína adaptadora ASC e caspase-1(inativa), que se fundem e formam o oligômero (inflamassoma)
para levar a ativação da caspase-1, que vai clivar a pró IL-1 e pró IL-18, e liberar IL- e IL-18 que vão gerar a inflamação aguda.
Inflamação
Eventos
· alteração no calibre vascular
· aumento no fluxo sanguíneo, deposição de fibrinas e outras proteínas plasmáticas
· migração leucocitária
Migração/recrutamento de leucócitos 
· Nos locais de infecção: macrófagos ativados fagocitam microrganismos e produzem citocinas (como TNF e IL-1) 
· Citocinas ativam as células endoteliais de vênulas a produzirem selectinas, ligantes para integrinas e quimiocinas.(permitem rolamento e adesão de leucócitos para chegarem a infecção)
1ª = Rolamento: Selectinas (fraca ligação dos leucócitos sanguíneos ao endotélio, e a força do fluxo sanguíneo quebra a ligação e faz os leucócitos rolarem ao longo da superfície)
2ª = ativação integrina: As quimiocinas secretadas por macrófagos, se ligam a receptores nos leucócitos em rolamento, o que resulta em ativação das integrinas do leucócito devido a ligação agora ser forte. 
3ª = adesão estável: As integrinas ativadas se ligam à seus ligantes nas células endoteliais, acontece o achatamento do leucócito, e sua firme adesão.
4ª = migração: Os leucócitos passam, então, pelas paredes endoteliais e migram até o sítio de infecção (diapedese). 
Neutrófilos, monócitos e linfócitos T utilizam essencialmente os mesmos mecanismos para migrar para fora do sangue
quando chegam ao sítio de infecção esses macrófagos e neutrófilos recrutados fagocitam o microorganismo.
Fagocitose
· Macrófagos residentes 
· neutrófilos recrutados
1ª =identificação: microorganismo identificado por receptores na membrana, toll, manose, scavenger
2ª = englobamento: membrana do fagócito emitem pseudópodes para englobar o patógeno e formam o fagossomo
3ª = eliminação: Os lisossomos dentro da célula se acopla ao fagossomo formando o fagolisossomo, a eliminação ocorre devido a enzimas lisossomais e compostos tóxicos (NO e ROS)
A proteina iNOS converte arginina em NO e a fogócito oxidase converte O2 em ROS(espécies reativas de oxigênio) degradam o microorganismo.
 Aula 3
Sistema Complemento
Ativada após ligação com microorganismo
Promove inflamação e eliminação 
3 vias de ação
· Via Clássica
depende de anticorpos ( IgM ou IgG)
· C1 se liga a dois fragmentos de anticorpo 
· gera ativação de fragmentos C1r e C1s que clivam C2 e C4
· C4b+C2a= C3 convertase; C3b se junta formando C5 convertase; C5b permanece na membrana e chama C6,C7,C8, vários C9 para formar o MAC (complexo ataque membrana) 
· C3a e C5a vão ajudar na inflamação 
· 
· Via alternativa
ocorre na ausência de antígeno ou anticorpo
· C3 clivada naturalmente na circulação (proteólise: hidrólise espontânea)
· com inflamação: C3b se liga a superfície da bactéria no fator B
· fator B clivado por fator D ( C3b + Bb= C3 convertase) + C3b = C5 convertase
· reações seguintes iguais.
· Via lectina
inicia com a lig. da lectina ligadora de manose na manose (açúcar que se encontra na superfície dos fungos/bac) 
· manose é um PAMP
Funções efetoras do sistema do complemento: 
· Sinalizam para fagocitos fagocitose do microorganismo
· C3a e C5a estimulam inflamação (recrutando e ativando leucócitos)
· Lise osmótica da bactéria pelo MAC 
 Células B-1
B-1: originada no figado fetal, produz anticorpo e reconhece antígenos papel na R. Adaptativa
células epiteliais gama delta: produzem citocinas rapidamente e ativam fagocitos. reconhecem antígenos diretamente Papel na RI
Células T NK: 
Resposta imune inata contra vírus
vírus pode entrar na célula:
· por uma célula infectada
· diretamente no citosol na replicação viral
· são endocitados
são detectados pelos receptores de reconhecimento, que ativam o fator de transcrição de genes de interferón de tipo 1 (IFN- IFN-). Responsáveis por criar estado antiviral
· Essas citocinas podem ter ação parácrina ou autócrina. 
OBS: Na infecção viral a ação de resposta adaptativa demora, assim as células NK tem um papel importante no início da infecção.
Células NK
subgrupo de linfócitos
Ação na resposta inata
Função: semelhante ao LT CD8+ 
Receptores são codificados pelo DNA germinativo 
Reconhecimento do antígeno 
possui 2 receptores, ativador e inibitório
· Célula normal: Receptor inibitório está ocupado, ligado a uma molécula de MHC I: o receptor ativador ligado a uma molécula PTK, e o inibitório ligado a uma molécula PTP, que ativado sequestra o fósforo do PTK e interrompe a cascata de ativação. 
· Célula infectada por vírus: Receptor inibitório livre, pois o vírus inibe a expressão de MHC I, e assim, permite a ativação da célula NK. Morte da célula infectada
· célula estressada por meio de infecção ou transf. neoplásica ocorre múltipla ativação de receptores 
· Célula NK ativada libera grânulos citotóxicos e mata a célula por apoptose
· Ativação por.citotoxicidade mediada por anticorpo
parte da resposta adaptativa
· Célula infectada, que está opsonizada por anticorpos (IgG1 ou IgG3)
· O receptor CD16 da Célula NK se liga a porção Fc do anticorpo e ocorre a ativação da NK
Mecanismos efetores da célula NK
· Morte de células infectada por vírus ou lesionadas 
· Secretam interferon tipo I (gama) importante para ativação de macrófagos
Ação do interferon tipo I
· aumenta a capacidade fagocitica dos macrófagos
· aumenta produção de ROS 
· criam estado antiviral, com célula parácrina enviando interferon para células vizinhas não infectadas, para induzir a expressão de enzimas que bloqueiam a replicação viral. Para inibir a infecção
Na RA, LT CD4+ secreta interferon
 Aula 4
MHC e processamento de antígenos 
MHC -complexo principal de histocompatibilidade
Ou HLA -antígenos leucocitários humanos 
o MHC apresentam antígenos próprios em células nucleadas 
Restrição do MHC
Para ter reconhecimento o T Cell receptor (TCR) precisa ser compatível para o antígeno e para 
Propriedades de antígenos 
· LTs reconhecem apenas peptídeos lineares curtos (protéicos)
· Receptores de LTs reconhecem apenas antígenos apresentados pelo MHC
· LBs n dependem de MHC 
MHC classe I
· CD8+
Formada por duas cadeias alfa(pesada) e beta (leve) são ligadas por lig NÃO covalente
Fenda de ligação na cadeia alfa
Região de transmembrane na cadeia alfa 
· Região lig CD8+
Peptídeo 8-11 amino
Expressada em todas células nucleadas - função de reconhecer células próprias e não próprias (tolerância)
MHC classe II
· CD4+
Cadeia alfa e beta iguais, lig covalentes 
Fenda formada parte da alfa e parte da beta
região transmembrana em alfa e beta
· Tem região de lig com molécula CD4+
Peptídeo 10 a 30 amino (maior)
Expressada em c. dendríticas, LB,macrófagos -Função- ativar células Ts
Processamento de antígenos 
Via MHC I
· Diferença, onde o antígenos está: presente no citosol (antígenos de vírus, ou Bat q escapam do fagossomo)
· Vai p/ Proteína ubiquitinada vai para o proteassoma e é clivada em vários peptídeos 
· No retículo: MHC se liga a molécula chaperona(molda/estabilidade) se liga a 2m e se liga a TAP pela molécula de tapasina 
· ERAP clica o peptídeo para ficar num tamanho certo pra se encaixar na fenda da molécula de MHC 
· MHC + antígeno migra para Golgi, sai por vesícula exocítica e é apresentada para CD8+ 
via MHC II
· Antígeno entra via endocitose, é degradado dentro do endossoma, fagolisossomo
· MHC II chaperona, tem q se deslocar do retículo p/ fagolisossomo, se liga ao clip e li cadeia invariante( q impede q outras mol se liguem a fenda)
· MHC vai p/ Golgi e sai em vesícula exocítica até o fagolisossomo
· A cadeia o variante é degradada mas o clip continua, HLA-DM tira o clip 
· se liga ao peptídeo e sai da membrana e é apresentada a CD4+ 
Apresentação cruzada
· Exclusivo de DCs (dendríticas)
· Capaz de apresentar para CD4 e CD8
· Captura de antígenos e tem a agilidade de levar antígenospara citosol p/ apresentar a MHC I, e ativar CD8+ 
Aumento da expressão MHC II
Célula NK secreta interferon e a célula recebe sinal p/ aumentar MHC, aumento de apresentação de antígenos e ativação de células T, depois as CD4 tbm vao secretar mais interferon 
Imunodominância
Peptídeos q se ligam melhor a molécula de MHC
 
 Aula 5
desenvolvimento de linfócitos T e B
o receptor de antígenos dos LTs : TCR
para o reconhecimento ele precisa de outras moléculas, cadeia zeta(auxilia a ativação) 
maturação de linfócitos
caso a célula não apresenta o pré receptor ela é eliminada 
na fase de expressão do receptor o reconhecimento ao antígeno próprio deve ser fraco, (tolerância) caso seja forte a célula morre por apoptose. 
· capacidade do SI em reagir contra tantos antígenos
Diversidade de receptores, devido ao rearranjo gênico em órgão primário
domínios de proteínas Ig e TCR
cadeia pesada
região V variável e é onde interage com o antígeno- sofre recombinação
Região C- constante.
Região transmembrana que ancora a célula
cadeia leve
TCR
cadeia alfa V J(junção)
e beta VD(diversidade) J
 
Recombinação gênica é uma recombinação de regiões V, D, e J, formando receptores
depois da recombinação o DNA é transcrito, processado e traduzido, passa por um processamento onde é formada a cadeia pesada
a mesma coisa acontece com a cadeia leve e as duas se juntam para formar a imunoglobulina.
maturação de células T no timo
com um reconhecimento fraco de moléculas MHC I ou II, o linfócito se diferencia 
· vantagem evolutiva do rearranjo
permitir variedade de receptores
gerar essa variedade em um genoma compacto
 Aula 6
Ativação de linfócitos
objetivo: para linfócitos se diferenciarem 
Antes da ativação de linfócitos- apresentação de antígenos
Após a ativação dos leucócitos secreta, citocina IL-2 (autócrina e paracrina) que manda sinais para a proliferação(expansão clonal), e segue para os tecidos periféricos 
Receptor TCR, auxiliantes: cadeias CD3 e zeta
Receptores e ligantes de ativação 
1 sinal: TCR não possui domínios orbitantes, precisa de cadeia CD3 e zeta(ITAM) para a transdução do sinal. 
2 sinal: Ligação de CD28 com B7, fundamental
CD4 ou CD8 - transdução de sinal
LFA-1 realiza a adesão, mantendo as duas células próximas.
OBS: para q as células se liguem precisam estar próximas, para isso necessario região de ativação sinapse imunológica.
sinapse imunológica com regiões chamadas de balsas lipídicas. A sinapse forma um contato estável entre as células T específicas a um antígeno e uma APC
Importância dos dois sinais de ativação
com a APC em repouso deficiência de coestimulador B7
Com APC ativa, ela aumenta a expressão de B7
 
vias de co-estimulação
sinal 1: reconhecimento de antígenos pelo receptor TCR vía MHC, apresentados pela APC
sinal 2: reconhecimento de CD28 com a B71 ou B72 presentes na APC
sinal 3: mais importante para levar a diferenciação, secreção de citocinas q direcionam a diferenciação das células T
moléculas co-estimuladoras
CD28: 
DCs: dendríticas têm maior expressão de B7
APCs em repouso: B7 em baixa expressão
B7-2: expressão constitutiva, em CD86
B7-1: induzida depois de horas após ativação da APC
adjuvantes: auxiliam a ativação da resposta, estimula expressão de coestimuladores
CD40: presenta na APC, quando ligado no seu ligante, recebe sinais e aumenta expressão de B7 e secreta citocinas
moléculas inibidoras
· auxiliar no controle da resposta, equilíbrio 
· induzir tolerância
· contração da resposta principalmente CTLA-4
CTLA-4: presentes nos linfócitos principalmente T regulador, se liga a B7 impedindo que a CD28 se ligue. (alta afinidade com B7)
libera sinais inibidores para bloquear sinais ativadores de atcr ou CD28
· utilizada para fins terapêuticos: bloquear ativação de linfócito em doenças auto imunes, transplantes
PD-1: estão nos linfócitos e se liga a PD-L1 ou 2
consequências da ativação
Essa cascata leva 
· produção de Bcl-Xl sobrivivencia
· de c-Fos, fator de transcrição 
· secreção IL-2 aumento proliferação de Ls
· de CD69: inibe S1PR1 que levaria as células para fora dos órgãos linfóides
· citocinas ↓ inibidores
· mecanismo de proliferação que levam a aumento células de memória
sinalização intracelular
o que é: respostas bioquímicas em resposta aos receptores
o ligante se liga ao receptor presente na parede, fosforilação dos domínios ITAM ricos em tirosina. que leva ativação de moléculas adaptadoras, que leva a ativação de um fator de transcrição que ativado segue para o núcleo e ativa a transcrição de proteínas.
via de transdução de sinal
ligação do receptor ligação de CD4 ou CD8 ativa a LCK que começa a fosforilar domínios ITAM ricos em tirosina cuja fosforilação ativa LAT, ativação de fatores de permuta...leva ativação de vias Ras e MAPK 
· levam a ativação fator de transcrição 
Fatores de transcrição
NFAT: ativação citocinas IL-2…
AP-1: 
NF-KB: síntese de citocinas
Via JAK-STAT 
Receptores de citocinas q ligando com citocinas, dimerização do receptor, JAK é ativada e fosforila domínio ITAM, permite recrutamento de STAT, fosforilação e dimerização das STAT, mediada pela JAK. As STAT são ativadas se desloca pro núcleo e ativa a transcrição
Papel da IL-2
ação autócrina e parácrina e induz proliferação 
promove sobrevivência induz proteína anti apoptótica
aumenta produção de citocinas
pode ser reconhecidas por T reg, que compete com IL-2 e consome o IL-2 suprimindo a resposta
T reg: tem receptor da IL-2 formado. (células naive n tem receptor totalmente formado) tolerância a antígenos devido vantagem a ligação com B7 
· consome IL-2 por competição para suprimir resposta.
· N secreta IL-2
Após ativação LT CD4
TH1: secretam IFN interferon gama ativação e aumento macrófagos, aumenta síntese anticorpo IgG ; papel em doenças autoimunes e infecções crônicas
TH2: IL-4,5,13 - ativação mastócito, eosinófilo, macrófago alternativo (reparo tecidual) IgE, antiinflamatorio. Em helmintos; doenças alérgicas
TH17: IL-17 e 22 - inflamação neutrofílica, bactérias extracelulares e fungos; doenças inflamatórias e autoimunes
Desenvolvimento de subtipos
TH1: citocina IL-12 secretada pela APC ou macrófago, leva ativação STAT4, e interferon(via NK) ativa T-bet, que leva a secreção de interferon que mantém diferenciação e amplifica sinal, estimula produção anticorpo em LBs
TH2: por Helmintos secreção IL-4 (mastócitos, basófilos) ativa STAT6; TCR ativa GATA-3; ativa secreção IL-4- mantém a diferenciação, amplifica, leva ativação mastócitos. I-L5 ativa eosinófilos IL-13- secreção de muco
TH17: bac e fungos extra; IL-6 ou IL-1 (CDs) , TGF - ; secreta IL-21- amplificação, IL-17 inflamação e IL-22 estimula barreira física. outra CD secreta IL-23 que vai manter a diferenciação
Diferenciação em células de memória: 
· modelo linear: ativação LT específico, proliferação (efetora) e algumas viram de memoria
· ramificado: algumas viram efetoras e outras já de memória
circulantes depois do antígenos eliminado
resposta rápida e potente comparada a Naive
manutenção depende de citocinas