Aula Prática: Tolerância à glicose e curva glicêmica

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Aula Prática: TESTE DE TOLERÂNCIA À GLICOSE E CURVA GLICÊMICA
O teste oral de tolerância à glicose e a curva glicêmica são usados no diagnóstico de diabetes mellitus, embora respostas anormais também ocorram em outras doenças, tais como nefrite e certas anormalidades endócrinas. O teste avalia a capacidade do indivíduo de remover da circulação o excesso de glicose adicionada. Inicialmente, colhe-se uma amostra de sangue basal após o jejum de uma noite. Então, se administra ao paciente 1 g de glicose por kg de peso, com um limite máximo de 75 g de glicose, por via oral, diluída em cerca de 300 mL de água. A glicemia se excede na primeira hora, voltando gradativamente ao normal após duas horas. No exame com fins clínicos, o paciente deve estar confortavelmente sentado durante todo o teste, não deve fumar ou realizar exercícios e deve ter tido uma dieta normal pelo menos três dias antes do teste. 
Esta prática tem como objetivo determinar a captação de glicose por meio da curva glicêmica no repouso e após a atividade física. 
MATERIAIS E REAGENTES 
Material 
1)  Glicosímetro. 

2)  Fitas para glicosímetro. 

3)  Lancetador automático. 

4)  Lancetas descartáveis. 

5)  Algodão. 

6)  Luvas descartáveis. 

Reagentes 
1)  1 copo de suco de laranja açucarado e/ou 4-5 bolachas doces. 

2)  Álcool 70% para assepsia. 

Material Biológico 
1) Voluntários humanos. 
PROCEDIMENTO 
A)  Observações sobre coleta de material biológico humano. 
· Sempre usar luvas de procedimento para coleta do material. 
· Realizar assepsia local com álcool 70% antes da coleta. Não levar o dedo à boca após a coleta. Estancar eventual sangramento com um pedaço de algodão limpo. 
· Descartar material descartável perfurocortante (lancetas descartáveis) contaminadas em recipientes adequados (“Descarpak”). 
B)  Realização da curva glicêmica. 
1. Com o uso do lancetador automático, coletar uma pequena amostra de sangue de cada voluntário em jejum. Dosar a concentração de glicose com auxílio do glicosímetro. 

2. Ingerir 1 g/kg de peso de sacarose em solução (máximo de 75 g de sacarose) ou beber o suco de laranja e/ou ingerir 4-5 bolachas. 

3. O voluntário deverá manter-se sentado durante todos os intervalos de coleta. 

4. Medir a glicemia de cada voluntário nos tempos 30, 60 e 120 minutos, com o auxílio do glicosímetro. 
5. Organizar os dados por indivíduo de cada grupo, calcular a média da turma e faixa máxima e mínima obtida na turma, construindo gráficos com os dados de valores de glicemia na ordenada e tempo na abscissa. 

Aula Prática: Fermentação Alcoólica
OBJETIVOS 
Observar o processo de fermentação alcoólica utilizando-se fermento biológico e avaliar os efeitos do substrato e da temperatura sobre este processo. 
MATERIAIS E REAGENTES 
Será utilizado o sistema multi-enzimático do fermento de padeiro na sua forma intacta, ou seja, sem rompimento das paredes celulares. Como substrato será utilizado glicose. 
Material 
· 2 béquers de 1 L. 
· 6 erlenmeyers de 250 mL. 
· 1 proveta de 250 mL. 
· 1 proveta de 100 mL. 
· 1 proveta de 25 mL. 
· 6 balões de festa. 
· 1 colher de sopa. 
· 1 agitador magnético. 
· 1 barra magnética. 
· 1 bastão de vidro. 
· 1 pipeta Pasteur. 
· Banhos a 37°C e a 100°C (ou bico de Bunsen). 
· Banho de gelo. 
Reagentes 
· 30 g de fermento biológico (Fermento de padeiro, Fleishman, Itaiquara etc). 
· 60 g de sacarose.
· 10 gotas de adoçante dietético. 
· 600 mL de água destilada morna. 
· 45 mL de óleo mineral nujol. 
PROTOCOLO 
1) Preparar a suspensão de fermento biológico: ressuspender 30 g de fermento biológico em 500 mL de água morna. Agitar inicialmente com o bastão e, se necessário, no agitador magnético. Com o repouso prolongado pode ocorrer sedimentação, sendo necessário que, no momento do uso, o frasco seja novamente agitado. 
2) Acrescentar as seguintes soluções em cada tubo de ensaio:
3) Incubar os frascos na temperatura indicada por 1h. 
4) Anotar os resultados e discutir. 
QUESTÕES TOTG
1)  Explique a eventual diferença (ou não) nos valores de glicemia no jejum e nos diferentes tempos após a ingestão de açúcar. 
2)  Como seria a curva de um paciente com suspeita de diabetes mellitus? 
QUESTÕES FERMENTAÇÃO 
1) Qual a constituição do fermento biológico? E do fermento químico? 
2) Qual a diferença observada entre o frasco 1 (sem fermento) e o frasco 2 (com fermento)? Justifique bioquimicamente os resultados. Como é denominado este processo? Em que local, nas células, ele ocorre? 
3) Qual a diferença observada entre o frasco 2 (com açúcar) e o frasco 4 (com adoçante)? Justifique bioquimicamente os resultados. 
4) Qual o gás produzido durante o processo? Esquematize a reação em que ele é produzido? 
5) Esse processo ocorre na ausência do oxigênio? 
6) Em qual frasco o balão ficou mais cheio? Compare com o frasco 3 e justifique. 
7) Qual a influência da temperatura no processo de produção de CO2? 
8) O que ocorreu no frasco 6? Você poderia relacionar o resultado observado, utilizando reagentes similares, com algum evento cotidiano?