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PROTOCOLO PARA TIPAGEM SANGUÍNEA EM TUBO PREPARAR SUSPENSÃO HEMÁCIAS: Identificar um tubo com número do paciente Colocar - 950 ul soro fisiológico Colocar - 50 ul de hemácias 1. Colocar: · 50 ul Soro Anti A no tubo A · 50 ul Soro Anti B no tubo B · 50 ul Soro Anti Rh (D) no tubo Rh 3. Homogeneizar bem os tubos 4. Colocar para centrifugar a 3400 rpm por 15 segundos5. Ressuspender o botão de hemácias formado agitando levemente 6. Ler para aglutinação e hemólise, usando auxiliar ótico. 7. Anotar os resultados PESQUISA de D-fraco: · Pegar o tubo de identificado com Rh deu negativos Adicionar 100 ul de albumina · Incubar o tubo - Rh em Banho Maria a 37ºC durante 30 minutos · Retirar os tubos do BM e centrifuga-los a 3400 rpm por 15 segundos · Fazer a leitura para presença ou ausência de aglutinação · Quando negativo realizar a lavagem 3 x com soro fisiológico · Desprezar o sobrenadante e secar bem os tubos · Adicionar soro de Coombs (Anti IgG) 100 ul, homogeneizar bem os tubos · Centrifugar a 3400 rpm por 15 segundos · Fazer a leitura TESTE DE COOMBS DIRETO Em um tubo de ensaio adicionar 100 ul da suspensão de hemácias a ser testada Lavar 3 x com soro fisiológico Adicionar anti-IgG e homogeneizar Centrifugar a 3400 rpm por 15 segundos Fazer a leitura TESTE DE COOMBS INDIRETO Em um tubo de ensaio adicionar 100 ul da suspensão de hemácias a ser testada Lavar 3 x com soro fisiológico Adicionar 100 ul do soro a ser testado Homogeneizar e incubar por 30 minutos a 37 ºC Lavar 3 x com soro fisiológico Adicionar anti-IgG e homogeneizar Centrifugar por 15 segundos a 3400 rpm Fazer a leitura
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