Teste de Falcização e teste de solubilidade da HbS - NHCL

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Universidade Federal de Pernambuco 
Centro de Biociências 
 
 
Pós Graduação Lato Sensu em Hematologia Clínica e Laboratorial – UFPE- NHCL 
Prof. Dr. Marcos André C. Bezerra – Profa. Dr. Antonio Roberto Lucena de Araujo 
 
Teste de Falcização Eritróide 
 
O teste ou prova de falcização eritróide revela-se positivo em todas anemias nas quais ocorrem a 
presença de hemoglobina S (Síndromes Falciformes) incluindo ainda a condição não anêmica na qual 
evidencia-se HbS denominada de traço falciforme. 
 
 
Teste de Falcização pelo Método de Daland e Castle 
1- Colocar uma gota de sangue no centro da lâmina. 
2- Colocar sobre a gota de sangue duas gotas de metabissulfito de sódio a 2%, misturando-as com um bastão. 
3- Cobrir a mistura com uma lamínula. Removendo, se necessário, o excesso com algodão ou papel de filtro. 
4- Selar a preparação com esmalte ou vaselina e colocá-las em câmara úmida por 30 minutos em estufa a 
37°C. 
5- Realizar observação microscópica com aumento de 400 vezes procurando, pricipalmente, nas margens da 
lamínula os eritrócitos falcizados. 
6- Caso nos 30 primeiros minutos não ocorra a falcização, realizar observação microscópica novamente após 
3, 6 e 24 horas antes de considerar o teste negativo. 
7- O resultado é expresso como positivo ou negativo. 
 
O teste de falcização positivo não é suficiente para diagnosticar a anemia falciforme, uma vez que é 
positivo também no traço e síndromes falciformes, sendo necessário a eletroforese das hemoglobinopatias. 
Em substituição ao teste de falcização utiliza-se o teste de solubilidade. Afim de detectar precocemente a 
anemia falciforme pesquisa-se a HbS através da eletroforese das hemoglobinas. 
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Teste de Solubilidade em Papel de Filtro 
 
PRINCÍPIO: 
Este teste é fundamentado na insolubilidade da Hb S no estado reduzido.O teste de 
solubilidade é de fácil execução e de resultados positivos imediatos para todas as 
hemoglobinopatias com presença de HbS. O teste também apresenta positividade para a 
HbC Harlem. Pela rapidez de resultados e facilidade de execução este teste é indicado em 
substituição ao teste de falcização pelo método de Daland e Castle. 
 
 
EQUIPAMENTO 
 
1- Tubo de vidro 12x75mm 
2 - Pipetas de 5 ml 
3 - Pipetas automáticas de 200 ul e 50 ul respectivamente. 
4 - Placas escavadas 
5 - Papel de filtro whatman n°6 
 
REAGENTES 
1- Solução Fosfato 
 K2HPO4 ----------------------- 29,66 g 
 KH2PO4 ----------------------- 16,89 g 
 Saponina P.A. ----------------- 1,25 g 
 H2O dest q.s.p. ---------------- 125 ml 
 Conservar a solução fosfato na geladeira. 
2- Na2S2O4 (ditionito de sódio) 
3- Solução redutora (preparada na hora de ser usada) 
 1 ml de solução fosfato 
 10 mg de ditionito de sódio 
 Homogeneizar por inversão até completar a dissolução. 
 
PROCEDIMENTO 
Em um poço da placa cavada, colocar 200 ul da solução redutora e adicionar 50 ul de 
sangue total com E.D.T.A. Misturar por 30 segundos e aplicar em papel de filtro. Esperar 2 
minutos para realizar a leitura. 
 
INTERPRETAÇÃO 
- A presença da Hb S confere ao papel de filtro a precipitação em forma de um botão. 
- A ausência da Hb S, faz com que haja uma distribuição homogênea do sangue aplicado. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PPaacc.. 11,, 22,, 33,, 55,, 66 ee 77 –– PPoossiittiivvooss 
PPaacc.. 44 ee 88 -- NNeeggaattiivvooss