RELATÓRIO BIOQUIMICA CLINICA

Prévia do material em texto

14
UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
CURSO: Farmácia DISCIPLINA: Bioquímica clinica 
NOME DA ALUNO: Luciano Nascimento de Araújo
R.A:2036046 POLO: Ercília – São José do Rio Preto-SP 
DATA: 15/11/2022
INTRODUÇÃO
Sangue total é o sangue humano a partir da doação total de sangue padrão (VASCONCELOS,2007).
O plasma sanguíneo é um dos componentes do sangue e representa cerca de 55% do volume desse tecido. Ele corresponde à parte líquida e reúne os elementos celulares: hemácias ou eritrócitos, leucócitos e plaquetas (ARENAS,2009).
O soro é o líquido restante depois que os fatores de coagulação são removidos do plasma sanguíneo. O soro é um suplemento comum em meios de cultura celular e proporciona uma mistura de hormônios, fatores de crescimento e adesão, agentes tamponantes e outros componentes nutricionais (DA FARMACOPEIA,2019).
Ureia é uma substância produzida pelo fígado que permite analisar o funcionamento não só do fígado, como também principalmente dos rins. O exame de ureia serve para avaliar e monitorar a saúde destes órgãos. Essa substância é resultado do nosso metabolismo reagindo às proteínas ingeridas na alimentação (SARZEDAS, 2011).
Creatinina é um resíduo gerado em decorrência da degradação da creatina, utilizada como energia nos músculos (WILLIAMS,2000).
O ácido úrico é uma substância produzida naturalmente no organismo em decorrência do processamento de purinas (bases nitrogenadas que ajudam a formar o DNA) e do consumo de alimentos ricos em proteínas como carnes vermelhas e frutos do mar.
Normalmente é excretado pela urina, porém, níveis elevados dessa substância (hiperuricemia) podem estar relacionados a patologias como a gota, doença que causa dores intensas e é caracterizada pela deposição de cristais de uratos nas articulações e em alguns órgãos como os rins (SCHNARWILER, 2019).
A glicose no sangue, diabetes é uma doença na qual o organismo possui déficit na produção de insulina também chamado diabetes mellitus; um hormônio secretado pelo pâncreas responsável pela regulação da glicose no sangue (Hipoglicemia/Hiperglicemia). Cerca de 4% da população adulta mundial convive com a diabetes mellitus variando apenas pelo estilo de vida em que se encontra (CRUZ FILHO, 2002). 
Os minerais são elementos necessários em pequenas quantidades para o funcionamento do organismo e da manutenção da saúde. Eles representam de 4 a 5% do peso corporal em mulheres e homens adultos. Estão presentes, principalmente, nos vegetais, cereais e alimentos de origem animal (BORDIGNON, 2003).
Os hormônios tireoidianos exercem uma ampla variedade de efeitos no desenvolvimento, crescimento e metabolismo de diferentes sistemas, mas têm o tecido ósseo como um dos seus principais alvos. Tanto a diminuição quanto o aumento da oferta de hormônios tireoidianos são deletérios ao tecido ósseo. Sabe-se que os hormônios tireoidianos agem direta e indiretamente no tecido ósseo. E uma das doenças causadas pelo hormônio tiroidiano é o hipotireoidismo congênito, crianças recém-nascidas com hipotireoidismo congênito apresentam severas alterações no desenvolvimento do sistema nervoso central e grave atraso da ossificação endocondral e intramembranosa, enquanto a exposição prematura a altos níveis hormonais induz a ocorrência de taquicardia, maturação óssea acelerada, craniossinostose, baixo peso corporal e retardo do crescimento intra-uterino. Portanto, tanto níveis insuficientes de T3 quanto a exposição prematura do embrião aos hormônios tireoidianos podem ser deletérios, resultando em desenvolvimento anormal ou morte (CAPELO, 2008).
RESULTADOS E DISCUSSÃO.
AULA 1 – ROTEIRO 1- COLETA DE MATERIAL BIOLÓGICO.
PROCEDIMENTO. 
MATERIAIS E MÉTODOS:
A técnica foi realizada professor, de forma demonstrativa foi realizado a simulação de coleta de sangue com um braço artificial (plástico), realizado a técnica de garrotear para visualizar melhor a veia e também de como sentir a veia tocando com o dedo.
Preparado seringa com agulha para realizar a punção demonstrativa de como é feita a coleta, feito assepsia com álcool 70% de cima para baixo, de baixo para cima e em movimentos circulares, após num ângulo de +- 30º realizado a punção e feito a coleta de sangue do paciente, em seguida pressionado o local da punção e orientado o paciente a segurar por um minuto.
Feito também o procedimento de punção a vácuo.
 Figura 1 - punção venosa
 Fonte: google (2022)
AULA 1 – ROTEIRO 2 - PRINCÍPIOS DE FOTOMETRIA.
PROCEDIMENTO.
MATERIAIS E MÉTODOS:
Iniciamos esse procedimento identificando dois tubos de ensaios, e com auxílio de uma pipeta automática foi preparado 03 tubos: tubo de ensaio, B (branco) contendo 1,5 ml de água destilada e 2,5 ml de reagente de biureto e P (padrão) contendo 1,0 ml de de albumina (8 mg/ml), 0,5 ml de água destilada e 2,5 ml de reagente de biureto, em seguida misturou-se esses tubos em um misturador de tubos e levou-os em banho-maria a 37º.C, por quinze minutos. 
Passado o tempo determinado os tubos foram levados para leitura em espectrofotômetro para obtenção do comprimento de onda máximo do tubo padrão, as cubetas foram preenchidas, o equipamento foi zerado com o branco em cada intervalo de leitura, sendo os resultados descritos abaixo. 
Resultados após análise do tubo padrão em espectrofotômetro.
	Comprimento de onda ( λ)
	Absorbância
	400 nm
	0,382
	420 nm
	0,300
	450 nm
	0,268
	470 nm
	0,307
	500 nm
	0,423
	520 nm
	0,487
	550 nm
	0,500
	580 nm
	0,433
	600 nm
	0,357
	630 nm
	0,226
	650 nm
	0,148
	680 nm
	0,068
	700 nm
	0,030
Gráfico 1 - Curva de varredura.
Fonte: Autor (2022).
Diante dos resultados obtidos na curva de varredura foi descoberto que o comprimento de onda com maior absorbância foi 550 nm, sendo assim ajustou o espectrofotômetro com essa absorbância e preparou quatro tubos de ensaio identificados com as letras A, B, C e D e preparados da seguinte forma:
Tubos preparados para curva de calibração.
	
	Tubo A
	Tubo B
	Tubo C
	Tubo D
	Albumina (8 mg/ml)
	100 µl
	300 µl
	500 µl
	1000 µl
	Água destilada
	1,4 ml
	1,2 ml
	1,0 ml
	0,5 ml
	Reagente de biureto
	2,5 ml
	2,5 ml
	2,5 ml
	2,5 ml
O tubo teste foi previamente preparado pelo professor contendo 1,0 ml de solução problema, 0,5 ml de água destilada e 2,5 ml de reagente de biureto.
Os tubos foram misturados e levados em banho-maria a 37Cº por quinze minutos.
Após 15 minutos foi analisado os tubos em espectrofotômetro em 550 nm, onde foi apontado anteriormente sendo o maior resultado na leitura do comprimento de onda. 
Resultados obtidos após análise em espectrofotômetro dos tubos A, B, C e D.
	Concentração de albumina 
	Absorbância
	0,53 mg/ml
	0,082
	1,60 mg/ml
	0,251
	2,66 mg/ml
	0,317
	5,33 mg/ml
	0,456
 Gráfico 2 - Curva de calibração.
 Fonte: Autor (2022).
No tubo teste obteve uma absorbância de 0,207, e utilizou a fórmula fornecida pelo gráfico da curva de calibração obtendo uma concentração de albumina neste tubo de 0,064 mg/ml.
AULA 2 – ROTEIRO 1 – PERFIL RENAL: UREIA, CREATINA, ÁCIDO ÚRICO. 
PROCEDIMENTO.
MATERIAIS E MÉTODOS:
A) UREIA. 
Para realizar esse procedimento foi utilizado um kit Ureia CE Labtest, pelo método Uréase. Separou-se 3 tubos de ensaios e identificou com as letras B (branco), T (teste) e P (padrão). 
	Com uma pipeta automática, no tubo B foi adicionado 1ml de uréase tamponada, no tubo T adicionou 0,01ml (10µl) da amostra mais 1ml de uréase tamponada e no tubo P 0,01ml (10µl) do padrão mais 1ml de uréase tamponada, após misturou com o de misturador de tubos e em seguida os mesmos foram levados em banho-maria à 37º.C por 5 minutos e após esse tempo adicionou mais 1,0ml de oxidase de uso nos três tubos, em seguida homogeneizou e levou novamente em banho-maria por mais 5 minutos. Depois foi realizado a leitura no espectrofotômetro ajustado para 600nm o comprimentode onda. 
	O equipamento foi zerado com o branco, em uma nova cubeta preencheu com o padrão onde a leitura foi de 0,701Abs e em uma nova cubeta efetuou a leitura do teste e o resultado foi de 0,321Abs. 
Com os resultados obtidos, realizou-se o cálculo para ureia onde o resultado foi de 32,05mg/dl. 
Com esse resultado, podemos dizer que se encontra desejável, pois estão dentro dos valores de referência, que são de: (Adultos: 15 a 45mg/dl). 
B) CREATINA. 
Para realizar esse procedimento foi utilizado um kit Creatinina da Biotecnia, através do método Picrato, com amostra soro, plasma (EDTA e heparina).
Com uma pipeta automática em um tubo de ensaio pipetou 100 L da amostra, 100 L Reagente de Trabalho 1,0ml, após misturou com o auxílio de um agitador de tubos e em seguida encubou em banho-maria o reagente a 37º.C por 3 minutos. Após, ajustou o equipamento espectrofotômetro em 500nm para leitura. 
Após o tempo determinado, preencheu-se uma cubeta com o teste e acionou o cronometro para leitura da absorbância em 30 e 90 segundo sendo identificados essas cubetas como A1 0,356 e A2 0,377. 
Com os resultados obtidos foi realizado o cálculo para creatinina onde o resultado foi de 1,08mg/dl. 
Consequentemente podemos interpretar que os resultados obtidos estão desejáveis, pois os valores encontram-se dentro dos valores de referência que são de: (Homem: 0,9 a 1,3mg/dl e Mulher: 0,6 a 1,1mg/dl). 
C) ÁCIDO ÚRICO. 
Para realizar esse procedimento foi utilizado um kit Ácido Úrico Liquiform da Labtest, através do método Enzimático-Trinder, com amostra soro ou plasma (heparina).
Separou-se e foi identificado 3 tubos de ensaios, no tubo B, adicionou-se 1ml do reagente de trabalho, no tubo T adicionou-se 0,02ml (20µl) da amostra mais 1ml do reagente de trabalho e no tubo P 0,02ml (20µl) do padrão mais 1ml do reagente de trabalho, misturou e incubou em banho-maria à 37º.C por 5 minutos e depois leitura no espectrofotômetro ajustado para 505nm o comprimento de onda. 
Iniciando a leitura preencheu uma cubeta com o branco, e zerou o equipamento, após preencheu outra cubeta com o padrão e efetuou a leitura onde o resultado foi de 0,040Abs e em uma nova cubeta efetuou a leitura do teste cujo o resultado foi de 0,043Abs. 
Com esses dados foi feito o cálculo para ácido úrico onde o resultado foi de 6,45mg/dl. 
Portanto, podemos interpretar que os resultados se encontra desejável, pois os valores encontram-se dentro dos valores de referência que são de: (Homem: 2,5 a 7,0mg/dl e Mulher: 1,5 a 6,0mg/dl). 
AULA 2 – ROTEIRO 2 – PERFIL RENAL UROANÁLISE. 
PROCEDIMENTO. 
MATERIAIS E MÉTODOS:
Feito a coleta de urina de 03 alunas para a análise e acondicionado em tubo cônico. E os resultados estão descritos a seguir:
Exame físico 
	Cor
	amarelo
	Volume
	40ml
	Aspecto
	límpido
Exame físico-químico após 1 minuto
	Leucócitos
	negativo
	Densidade 
	boa
	Presença de sangue 
	negativo
	Ph 
	5,5
	Nitrito
	negativo
	Proteínas 
	negativo
	Bilirrubina 
	negativo
	Glicose 
	negativo
Iniciamos o procedimento transferindo para um tubo cônico identificado com número 1 e 2 a amostra de urina colhida para análise física, físico-químico e microscópico. 
	Primeiramente realizou a análise física, onde identificou que uma urina foi colhida 40ml e a outra 15ml, apresentou colocação amarelo cítrico sendo considerada normal. 
	Depois realizou o exame físico-químico, onde utilizou o kit Urocolor-Check, pegou uma fita e mergulhou nos 2 tubos com as amostras de urinas, uma de cada vez, e ao retirar aguardou-se 1 minuto para leitura da densidade, Ph, proteínas, glicose, cetonas, sangue, bilirrubinas, urobilinogênio, nitrito e leucócitos, onde foram identificados todos normais. 
	Após iniciou o exame do sedimento, retirou a urina do tubo cónico deixando apenas 10ml de urina de cada amostra de urina, levou-se para uma centrifuga para centrifugar na rotação número 6 para sedimentação durante 10 minutos. 
	Após esse período, retirou os tubos da centrifuga, onde foi verificado que os sedimentos no fundo do tubo, e com auxílio de uma pipeta pasteur, foi retirado o sobrenadante, deixando apenas 1ml dentro do tubo, agitou os tubos para quebrar os sedimentos. Após com auxílio de uma pipeta automática colheu a amostra de urina, e efetuou o preenchimento da câmara de Neubauer a parte inferior com a urina 1 e a superior com a urina 2 e levou para análise microscópica iniciando com a menor objetiva para visualização de como funciona a leitura da câmara de Neubauer e aumentando até chegar na maior objetiva, onde foi visualizado leucócitos, células epiteliais e cristal de oxalato de cálcio. 
AULA 3 - ROTEIRO 1 – PERFIL HEPÁTICO
PROCEDIMENTO. 
MATERIAIS E MÉTODOS:
A) DOSEAMENTO DE GAMA-GT
Procedimento: Para realizar o procedimento foi utilizado um kit Gama_GT da biotecnia. Tipo de amostra: soro e plasma EDTA. Preparou o reagente de trabalho virando o frasco 2, no frasco 1, homogeneizou e incubou em banho maria por 3minutos a 37ºc, após identificou-se um tubo de ensaio, em seguida pipetei 2ml de reagente e 200µl da amostra (soro), o tubo foram agitados; o espectrofotômetro foi zerado em 405nm com água destilada, inserir a cubeta, e liguei o cronometro medindo as leituras: 60s: A0 = 0,979; 120s: A1 = 0,987; 180s: A2 = 0,996 e 240s: A3=1,009
Com os resultados obtidos efetuamos os cálculos de acordo com o fabricante onde obteve-se o resultado de 11,58u/l.
De acordo com esse resultado podemos interpretar que os valores se encontram desejável, pois os valores estão dentro dos valores de referência que são de: (Homem: <55u/l e Mulher: <38u/l).
B) BILIRRUBINAS.
A bilirrubina é a dosagem por formação de diazobilirrubina vermelha com absorção em 525nm, para o procedimento foi utilizado um kit de bilirrubinas (LABTEST) ®, com amostra de soro com jejum de 4ª a8 horas, para iniciar o procedimento identifiquei 03 tubos de ensaio B (bilirrubina), BD (bilirrubina direta) e BT (bilirrubina total),com uma pipeta foi adicionado 2ml de água destilada, e no tubo B.T 2ml de acelerador, em seguida usando uma pipeta automática foi adicionado no tubo B ácido sulfanílico 200ml, nos tubos B.D e B.T adicionou-se Diazo reagente 200ml, e nos 03 tubos acrescentou-se amostra com concentração padrão (10mg/dL), 100ml cada um, os tubos foram para o misturador e aguardado por 5 minutos em temperatura ambientem após foi determinado as absorbâncias das BD e BT, acertando o “zero” com o branco (B); sabendo que a absorbância do padrão é de 0,337mg/dl, sendo assim mediu a absorbância do tubo B.D onde o resultado foi de 0,045mg/ml, e absorbância do tubo B.T igual a 0,116mg/dl. 
Com os resultados acima e sabendo que a concentração do padrão a 10mg/dl, realizou o cálculo cujo resultado foi 1,33mg/dl, para bilirrubina direta, 3,44mg/dl para bilirrubina total e 2,11mg/dl para bilirrubina indireta 
Podemos concluir nosso teste afirmando que o paciente pode ter provável sinais de icterícia pois os valores encontram-se acima dos valores de referência que são de: (bilirrubina direta até 0,4mg/dl; bilirrubina total até 1,2mg/dl e bilirrubina indireta até 0,8mg/dl).
AULA 3 – ROTEIRO 2 – PERFIL PANCREÁTICO. 
PROCEDIMENTO
MATERIAIS E MÉTODOS:
A) DOSEAMENTO DE GLICOSE EM JEJUM. 
Para o procedimento foi utilizado o kit de glicose liquiform (LABTEST) ®, inicie o procedimento identificando 3 tubos de ensaio B (branco), T (teste) e P (padrão), no tubo B , adicionou-se 2ml do reagente de trabalho, no tubo T 20µl da amostra mais 2ml do reagente de trabalho e no P após adicionar o reagente de trabalho nos tubos a amostra no tubo T e o padrão no tubo P 20µl do padrão, foram levados ao misturador e em banho maria a 37 por 10 minutos, passado o tempo foi determinado a absorbância do tubo “T” e “P” em 505nm, acertando o “zero” branco com o branco, os resultado obtidos foram os seguintes : padrão a leitura foi de 0,402Abs e após preencheu outra cubeta com o teste cujo o resultado foi de 1,080Abs.
Com esses resultados acima, foi realizado o cálculo onde o resultado foi de 268,65mg/dl. 
Portanto podemosconcluir que o paciente pode ter provável sinais de Diabetes pois os valores encontram-se acima dos valores de referência que são de: (Normal: 65 a 00mg/dl; pré-diabetes: 100 a 125mg/dl; provável diabetes: > 126mg/dl), provável hiperglicemia (diabetes). 
AULA 4 – ROTEIRO 1 – PERFIL LIPÍDICO. 
PROCEDIMENTO. 
MATERIAIS E MÉTODOS:
A) TRIGLICÉRIDES.
Procedimento: para realizar esse procedimento foi utilizado um kit de triglicérides liquiform (LABTEST) ®, iniciei esse procedimento identificando 3 tubos de ensaio B (branco), T (teste), e P (padrão); adicionei o reagente nos 3 tubos, a amostra apenas no T 20µl e o 20µl do padrão no P, levei no misturador para homogeneizar m coloquei no banho maria a 37ºc por 10 minutos em seguida determinei a absorbância do “T” e do “P” em 505nm acertando o “zero” com o branco (B),após preencher outra cubeta com o padrão o resultado obtido foi de 0,226 Abs, foi feita a lavagem da cubeta e feito com o teste e o resultado foi de 0,119Abs.
Com esses valores foi feito o cálculo para triglicérides e o resultado o foi 105mg/dL. Com isso concluímos que os resultados se encontra dentro dos valores de referência (com <150mg/dL e sem jejum:<175mg/dL)	 
B) COLESTEROL HDL. 
Para esse procedimento foi utilizado um kit de HDL colesterol (LABTEST) ®; as lipoproteínas de muito baixa densidade (V.L.D.L.) e as lipoproteínas de baixa densidade (LDL) são precipitação após centrifugação e o HDL determinando no sobrenadante. Esse procedimento foi realizado com 250ml de amostra (soro) + 250ml precipitante (kit), agitei por 30segundos, levei na centrifuga por 15minutos a 3.500 rpm em seguida separei o sobrenadante, misturei, levei em banho maria a 37 por 10 minutos e determinei a absorbância do “T” e “P” em 500nm, acertando o “zero “ com o branco (B).
Com uma cubeta foi feito a leitura do padrão onde o resultado foi de 0,262Abs e efetuou a lavagem dessa cubeta, após preencheu novamente com o teste cujo o resultado foi de 0,592Abs.
Sabendo que a concentração do padrão é de 40mg/dl, foi feito o cálculo para o colesterol HDL onde o resultado foi de 90,38mg/dl.
Com esse resultado encontra-se desejável, pois os valores estão dentro dos valores de referência que são de: (com jejum: <150mg/dl; sem jejum: <175mg/dl)
AULA 4 – ROTEIRO 2 – SAIS MINERAIS. 
MATERIAIS E MÉTODOS: 
Para realizar esse procedimento foi utilizado um kit de cálcio (LABTEST) ® a amostra utilizado foi soro, dei início a esse procedimento identificando 01 tubos de ensaio, nele foi adicionado 2,0ml de reagente de trabalho e 2,0ml da solução padrão, o mesmo foi transferido para a cubeta e colocado no espectrofotômetro em 570nm, foi acertado o zero com o reagente de trabalho e em seguida adicionei 40 µl de amostra (teste), foi misturado e feito a leitura da absorbância que foi de 1,465abs, após, zerou o equipamento novamente com a cubeta padrão apenas com o reagente de trabalho e posteriormente pipetou-se mais 40L do teste dentro dessa cubeta e misturou com a própria pipeta, da mesma forma da anterior e efetuou a leitura que foi de 1,100abs. 
Diante desses resultados obtidos, e sabendo que a concentração do padrão é de 10mg/dl, foi feito o cálculo para o cálcio onde o resultado foi de 12,21mg/dl.
Podemos interpretar que o paciente pode considerar que está com provável hipocalcemia pois os resultados encontra-se acima dos valores de referência que são de: (Adultos: 8,8 – 11,0mg/dl).
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 ARENAS, Géssica Cantadori F. Plasma Rico em Plaquetas E Fatores de Crescimento. Bióloga. São Paulo, 2009.
BORDIGNON, Clara Venilda Melchior. Os minerais do corpo: uma visão interdisciplinar. Arquivos do Mudi, v. 7, n. 2, p. 61-63, 2003.
CAPELO, Luciane Portas. Os hormônios tireoidianos e o desenvolvimento esquelético fetal e pós-natal: estudo do padrão de expressão dos transportadores e das selenodesiodases das iodotironinas. 2008. Tese de Doutorado. Universidade de São Paulo.
CRUZ FILHO, Rubens A. et al. O papel da glicemia capilar de jejum no diagnóstico precoce do diabetes mellitus: correlação com fatores de risco cardiovascular. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia, v. 46, p. 255-259, 2002.
DA FARMACOPEIA, Coordenação et al. Soro reagente de tipagem sanguínea anti-Rh (anti-D, anti-C, anti-E, anti-C, anti-e e anti-Cw) para uso humano PB036-00. 2019.
SARZEDAS, Carolina Galvão. Uroanálise e Líquidos Corpóreos,2011)
SCHNARWILER, Natasha Oliveira et al. ÁCIDO ÚRICO COMO FATOR DE RISCO PARA DOENÇAS CARDIOVASCULARES. Mostra Interdisciplinar do curso de Enfermagem, v. 3, n. 2, 2019.
VASCONCELOS, Sandra Mary Lima et al. Espécies reativas de oxigênio e de nitrogênio, antioxidantes e marcadores de dano oxidativo em sangue humano: principais métodos analíticos para sua determinação. Química nova, v. 30, p. 1323-1338, 2007.
WILLIAMS, Melvin H. Creatina. Editora Manole Ltda, 2000.
 
 
 
 
UNIVERSIDADE PAULISTA 
–
 
UNIP 
 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
CURSO: 
Farmácia 
DISCIPLINA: 
Bioquímica clinica 
 
 
NOME DA ALUN
O
: 
Luciano Nascimento de Araújo
 
 
R.A:
2036046
 
 
 
 
POLO: Ercília 
–
 
São José do Rio Preto
-
SP 
 
 
DATA: 
15/11/2022
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP 
 
 
 
 
 
 
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
CURSO: Farmácia DISCIPLINA: Bioquímica clinica 
 
NOME DA ALUNO: Luciano Nascimento de Araújo 
 
R.A:2036046 POLO: Ercília – São José do Rio Preto-SP 
 
DATA: 15/11/2022