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CENTRO PAULA SOUZA ETEC RAPOSO TAVARES RELATÓRIO DE MICROBIOLOGIA Coloração de Gram Lucas de Melo Lucas Rodrigues Matheus Enrique Victor Calibas Wendel Raldes SÃO PAULO JUNHO/2019 Sumário 1. INTRODUÇÃO 3 4 2. MATERIAIS E METODOLOGIA 5 2.1. Materiais 5 2.2. Metodologia 5 3. OBJETIVOS 6 3.1. Objetivos Gerais 6 3.2. Objetivos Específicos 6 4. RESULTADOS 7 5. DISCUSSÃO 8 6. CONCLUSÃO 9 1. INTRODUÇÃO A técnica de Gram, mundialmente conhecida como coloração de Gram, é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853-1938), em 1884, o qual permite diferenciar bactérias com diferentes estruturas de parede celular a partir das colorações que estas adquirem após tratamento com agentes químicos específicos. O método que consiste em tratar sucessivamente um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. As bactérias que adquirem a coloração azul violeta são chamadas de gram-positivas e aquelas que adquirem a coloração vermelho são chamadas de gram-negativas. O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias gram-negativas não o fazem. O Método de coloração de Gram é considerado um dos mais importantes dentro dos laboratórios de analises clinicas e microbiologia. Em, laboratórios de analises clinicas, por exemplo, a técnica é essencial para obtenção de resultados. As bactérias são caracterizadas em esfregaços de pus ou fluidos orgânicos, permitindo que o profissional do laboratório possa monitorar as infecções Gram Positivas: Gram Negativas: · +Peptideosglicanos -Peptideosglicanos · +Grossa +Fina · +Rígida +Mole · Ácidos Teicóicos Sem Ácidos Teicóicos 2. MATERIAIS E METODOLOGIA 2.1. Materiais · Alça de Niquel Cromo · Lâminas · Bico de Bunsen · Pinça de Madeira 2.2. Metodologia A lâmina foi esterilizada no bico de Bunsen por alguns segundos e então corada com cristal violeta por 60 segundos, em seguida recebeu um esguicho de àgua destilada, logo após ela foi coberta com lugol por mais 60 segundos e recebeu outro esguicho de água destilada, foi então descorada com acetona por cerca de 15 segundos e recebeu outro esguicho, por fim recebeu uma ultima corada com safranina por 45 segundos e um ultimo esguicho de água destilada, esperou-se então a lâmina secar para poder ser observada no microscópio 3. OBJETIVOS 3.1. Objetivos Gerais Estudar o funcionamento do método de coloração de Gram na pratica laboratorial 3.2. Objetivos Específicos - Identificar a presença de bactérias gram-positivas -Identificar a presença de bactérias gram-negativas 4. RESULTADOS 5. DISCUSSÃO Apesar do experimento ter sido realizado com sucesso, as boas praticas de laboratório não foram realizadas com eficiência, o laboratório foi deixado de maneira deplorável após a realização do método, tanto o grupo quanto a sala como um todo refletiu sobre o ocorrido e entramos em um consenso de que tal ato não se repetira. 6. CONCLUSÃO Todos os passos e procedimentos necessários para o método de coloração de Gram foram feitos, seguinte a risca o módulo. Os objetivos foram alcançados pois tanto bactérias Gram-positivas, quanto Gram-negativas foram bem visualizadas.
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