Exercício I de Imunologia

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Exercício I de Imunologia 
Nome: Kátia Regina de Azevedo 
Professora: Bianca Leticia Rocha 
Modulo: 5° Farmácia 
Respostas: 
 
QUESTÃO 01 
São parâmetros que dependem do Anticorpo Utilizado no imunodiagnóstico: 
 
a)Sensibilidade (anticorpos policlonais ou monoclonais, classe de anticorpo); 
b) Especificidade anticorpos policlonais ou monoclonais, classe de anticorpo); 
c) Afinidade; 
d) Avidez e Diversidade; 
e) Todos estão corretas; 
 
QUESTÃO 02 
 As ligações que unem o antígeno ao sítio de ligação do anticorpo são todas abaixo 
listadas, exceto: 
 
a) Pontes de hidrogênio; 
b) Ligações covalentes; 
c) Ligações eletrostáticas; 
d) Forças de Van der Waals 
e) Ligações hidrofóbicas. 
 
QUESTÃO 03. 
Em relação aos imunoensaios quantitativos, considere as seguintes afirmativas: 
I – As Reações cruzadas ocorrem devido a, baixa especificidade dos anticorpos 
utilizados e o uso de anticorpos policlonais; 
II – A presença de anticorpos heterofilos produz Resultados falso positivos ou altos em 
pacientes transplantados ou submetidos a tratamento com anticorpos monoclonais; 
III - A contagem de fundo elevada (Background) refere-se a leituras mais elevadas do 
que as reais por ligação inespecífica de constituintes do soro ao suporte sólido, 
lavagens inadequadas ou conjugados de pobre afinidade. 
Conclui-se que: 
a) Somente as afirmativas I e II estão corretas; 
 b) Somente as afirmativas I e III estão corretas; 
c) Somente as afirmativas II e III estão corretas; 
d) Somente afirmativa I está correta; 
e) Todas afirmativas estão corretas; 
 
QUESTÃO 04. 
Em relação aos testes de aglutinação, considere as seguintes afirmativas: 
 I - Ocasionalmente é observado que quando a concentração do anticorpo é elevada 
(i.e. diluições menores) não há aglutinação, mas quando a amostra é posteriormente 
diluída ocorre a aglutinação; 
 II - A ausência de aglutinação em altas concentrações de anticorpos é chamada de 
efeito prozona; 
III - A ausência de aglutinação no efeito prozona é devida ao excesso de anticorpos 
resultando em complexos muito pequenos que não se aglomeram para produzir 
aglutinação visível. Conclui-se que: 
 a) Somente as afirmativas I e II estão corretas; 
b) Somente as afirmativas I e III estão corretas; 
c) Somente as afirmativas II e III estão corretas; 
d) Somente afirmativa I está correta; 
e) Todas afirmativas estão corretas 
 
QUESTÃO 05. 
Em relação a reação antígeno x anticorpo, considere as seguintes afirmativas: 
I - Afinidade de um anticorpo se refere à força de ligação entre um único determinante 
antigênico e um sítio de combinação de um anticorpo particular; 
II - Avidez de um anticorpo se refere à força total de ligação entre antígenos e 
anticorpos; 
 III - Afinidade é a constante de equilíbrio que descreve a reação antígeno-anticorpo. 
Conclui-se que: 
a) Somente as afirmativas I e II estão corretas; 
b) Somente as afirmativas II e III estão corretas; 
c) Somente as afirmativas I e III estão corretas; 
d) Somente afirmativas I está correta; 
e) Todas afirmativas estão corretas; 
 
QUESTÃO 06. 
 Em relação a reação antígeno x anticorpo, considere as seguintes afirmativas: 
I - Especificidade se refere à habilidade de um sítio de combinação de anticorpo em 
particular de reagir com apenas um antígeno. Em geral, há um elevado grau de 
especificidade nas reações antígeno-anticorpo; 
II - Reatividade cruzada se refere à habilidade de um sítio de combinação de anticorpo 
em particular de reagir com mais de um determinante antigênico ou a habilidade de 
uma população de moléculas de anticorpos de reagir com mais de um antígeno; 
III - Reações cruzadas aparecem porque o antígeno envolvido na reação cruzada 
compartilha um mesmo epitopo com o antígeno imunizador ou porque ele tem um 
epitopo que é estruturalmente semelhante ao epitopo no antígeno imunizante (multi-
especificidade). Conclui-se que: 
a) Somente as afirmativas I e II estão corretas: 
b) Somente as afirmativas I e III estão corretas: 
c) Somente as afirmativas II e III estão corretas: 
d) Somente afirmativa I está correta; 
e) Todas afirmativas estão corretas. 
 
QUESTOES 07. 
 Nas reações de precipitação, é incorreto afirmar: 
a) A Quantificação dos complexos formados pela reação Antígeno-anticorpo que se 
precipitam no meio; 
b) Reação Antígeno x Anticorpo é irreversível; 
c) Torna-se desnecessária separação do complexo antígeno-anticorpo (fase ligada) 
das substâncias livres no meio; 
d) O fenômeno da pró-zona ocorre quando há excesso de um dos componentes; 
e) O complexo antígeno-anticorpo pode ser quantificado visualmente a olho nu; 
 
QUESTÃO 08. 
Nos testes de aglutinação qualitativo, a ausência de aglutinação em altas 
concentrações de anticorpos é chamada de: 
a) Efeito Bohr 
b) Efeito prozona 
c) Zona aglutinante 
d) Zona intermediária 
e) Efeito Dopler 
 
QUESTÃO 09. 
 O que se entende por título em uma reação de aglutinação: 
a) Maior diluição que ainda causa aglutinação; 
b) Menor diluição que ainda causa aglutinação; 
c) A diluição posterior à maior diluição que causa aglutinação; 
d) A diluição posterior à menor diluição que causa aglutinação; 
e) Maior diluição que não causa a aglutinação; 
 
QUESTÃO 10. 
Os Sinais de FSC e SSC obtidos na citometria de fluxo são obtidos devido: 
a) à dispersão da luz fluorescente quando excitada pelo fluorocromo. 
b) ao potencial elétrico gerado pela partícula quando atravessa o feixe de laser. 
c) à dispersão da luz que ocorre quando a partícula atravessa o feixe de laser. 
d) aos sinais fluorescentes gerados pelos anticorpos. 
e) à dispersão das células gerada no fluxo laminar. 
 
QUESTÃO 11. 
A citometria de fluxo é uma técnica usada para medir as propriedades de células em 
suspensão. Em relação aos princípios e mecanismos desse método, assinale a 
alternativa correta. 
a) As células são orientadas em um fluxo laminar e interceptadas em bloco por um 
feixe de luz. 
b) A granulosidade intracelular é avaliada através da reflexão da luz. 
c) Uma importante vantagem do método é que consegue observar todas as alterações 
identificadas pelo olho humano. 
d) O tamanho da célula é avaliado pela refração e difração da luz. 
e) A radiação incidente atravessa as células em suspensão e é detectada por 
sensores especializados em medir fluorescência. 
 
QUESTÃO 12. 
A técnica da imuno-histoquímica originou-se da necessidade de identificar moléculas 
específicas nos tecidos, auxiliando o diagnóstico histopatológico. Em relação a essa 
técnica, é correto afirmar: 
a) A solução de anticorpos obtida de soro animal total é a mais dispendiosa, por conter 
elementos séricos e anticorpos diversos. 
b) No método imuno-histoquímico indireto, um marcador visual fica quimicamente 
ligado ao anticorpo primário. 
c) Consiste no uso de anticorpos selecionados para a identificação de antígenos 
específicos. 
d) O tempo de fixação com formol a 10% tamponado pode exceder o prazo de 24 
horas. 
 
QUESTÃO 13. 
O teste de ensaio imunocromatográfico (teste rápido) para a detecção de anticorpos e 
antígenos contra o vírus HIV é um recurso altamente usado na prática laboratorial. Em 
relação a esse teste de ensaio, assinale a afirmativa correta. 
a) O teste é uma triagem diagnóstica, no caso de positividade permite ao clínico 
medidas de precauções como em gestantes para evitar transmissão ao recém-
nascido. 
b) Para realização do teste, a amostra recomendada é somente o soro. 
c) As principais desvantagens desse método são: difícil interpretação, exigência de 
pessoal altamente capacitado para a execução e prolongado tempo da reação. 
d) O resultado do teste apresenta 2 barras de resultado (paciente/controle), o teste é 
válido mesmo quando não visualizar a barra de controle, pois é uma limitação desse 
método em resultados positivos. 
e) O teste tem baixa sensibilidade e especificidade devido ao fenômeno de “prozona”. 
 
QUESTÃO 14. 
Para algumas viroses o diagnóstico a nível molecular é importante. Por exemplo, oWestern Blotting é uma das técnicas utilizadas. Explique essa técnica. 
 
A técnica western blotting baseia-se na separação das proteínas por peso molecular 
através de uma eletroforese, seguindo-se da transferência para uma membrana e a 
detecção da proteína de interesse com um anticorpo específico. Os passos para a 
elaboração dessa técnica podem ser resumidos em cinco etapas: extração e 
quantificação das proteínas, eletroforese em gel de poliacrilamida, transferência das 
proteínas para uma membrana, incubação da membrana com um anticorpo para 
detectar a proteína específica a ser analisada, revelação dessa membrana para 
análise dos dados 
 
 
QUESTÃO 15. 
 Desenho em anexo. 
 
 
QUESTÃO 16. 
Diferencie ELISA direto, indireto, sanduíche e competitivo. 
 
ELISA Direto: Quando o antígeno/alvo está ligado na placa, e um anticorpo (AC) 
primário já conjugado com um emissor de cor ou fluorescência é colocado diretamente 
sobre o alvo. A sensibilidade deste tipo de ELISA é a mais baixa e quase não é usado. 
ELISA Indireto: Semelhante ao direto, mas se utiliza um AC secundário marcado. 
Apresenta maior especificidade no teste, por usar o AC secundário. 
ELISA Sanduíche: Este provavelmente é o ELISA mais comum, e parte do princípio de 
ter o anticorpo de captura específico para o alvo já adsorvido em uma placa (ou 
deixado para se ligar à placa overnight, o que chamam de sensibilizar a placa), e a 
amostra é adicionada na placa, incubada, e os analitos-alvo se ligam ao seu AC de 
captura, e ficam aderidos à placa. Então outro AC específico para o alvo é adicionado, 
e um AC secundário marcado, que tem como alvo o AC colocado anteriormente é 
adicionado. Possui grande sensibilidade e poder de amplificação do sinal. 
ELISA de Competição: Utiliza um antígeno marcado para competir com o alvo. O 
antígeno marcado se liga menos quando houver mais antígeno não marcado (da 
amostra) e assim, a cor fica mais fraca quando houver muito do alvo na amostra. É 
utilizado principalmente quando o alvo possui poucos epítopos de ligação ou é muito 
pequeno. 
 
QUESTÃO 17. 
Por que no ensaio imunoenzimático realiza-se o bloqueio dos poços após a 
sensibilização da placa? 
O método utilizado para realizar o teste baseia-se na interação antígeno-anticorpo. 
Geralmente, o ELISA é realizado em placas com 96 poços, onde são ligados 
antígenos, diretamente, ou indiretamente, por meio de um anticorpo já selecionado e 
ligado ao poço. É essa ligação e imobilização dos reagentes que permite que o ELISA 
fique mais fácil de realizar. O fato de imobilizar os reagentes na placa torna fácil 
separar os materiais que foram fixados e os que não foram durante o teste. E essa 
possibilidade de lavar materiais é o que torna o ELISA uma ferramenta poderosa de 
medição de um composto específico com uma preparação básica 
 
QUESTÃO 18. 
Por que a etapa de lavagem é de grande importância no método de ELISA? 
O ELISA se baseia em fixar compostos nos poços e então lavar para remover outros 
compostos que não tiveram a especificidade para se fixarem no poço. 
 
Questão 19. 
Desenho em anexo. 
 
QUESTÃO 20. 
Diferencie afinidade de avidez. 
Afinidade de um anticorpo é à força da reação entre um único determinante antigênico 
e um único sítio de combinação no anticorpo. É a soma das forças de atração e 
repulsão que operam entre o determinante antigênico e o sítio de combinação do 
anticorpo. 
Avidez é uma medida da força total de ligação de um antígeno contendo muitos 
determinantes antigênicos e anticorpos multivalentes. A avidez é influenciada tanto 
pela valência do anticorpo como pela valência do antígeno. Avidez é mais que a soma 
de afinidades individuais.Repetindo, afinidade se refere à força de ligação entre um 
único determinante antigênico e um sítio de combinação de um anticorpo particular, 
enquanto que avidez se refere à força total de ligação entre antígenos e anticorpos. 
 
QUESTÃO 21. 
O que é reatividade cruzada? Dê exemplos. 
Reatividade cruzada se refere à habilidade de um sítio de combinação de anticorpo 
em particular de reagir com mais de um determinante antigênico ou a habilidade de 
uma população de moléculas de anticorpos de reagir com mais de um antígeno. 
Reações cruzadas aparecem porque o antígeno envolvido na reação cruzada 
compartilha um mesmo epitopo com o antígeno imunizador. Por exemplo, na 
brucelose, uma importante doença zoonótica que acomete principalmente o gado, 
existe reação cruzada algumas cepas de Yersinia enterocolitica pela sua semelhança 
antigênica com a Brucella abortus, principal agente causador da doença. Assim existe 
a possibilidade de acusar um resultado falso-positivo em testes sorológico, nessa 
doença resultando em um abate sanitário desnecessário.