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AULA+5+DIAGNÓSTICO+SOROLÓGICO+DAS+DOENÇAS+PARASITÁRIAS+pdf

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DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DE 
DOENÇAS PARASITÁRIAS
PROFª RITA SPEROTTO
UNIVERSIDADE DE CRUZ ALTA
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE E AGRÁRIAS
DISCIPLINA DE IMUNOLOGIA CLÍNICA
DOENÇA DE CHAGAS
Introdução
Agente etiológico: Trypanosoma cruzi
FASE AGUDA: resolução espontânea e não identificada
FASE CRÔNICA: 10 a 30 % com manifestações cardíacas e/ou 
gastro e/ou gastrointestinais anos ou décadas após infecção.
DOENÇA DE CHAGAS
Definição
Doença infecciosa transmitida, principalmente, por 
inseto Hemíptero hematófago – “barbeiro”
Trypanosoma cruzi
Morfologia
Tripomastigota  sangue periférico humano e outros vertebrados
Amastigota  órgãos/tecidos humanos
Epimastigota  intestino médio do vetor
Trypanosoma cruzi
Patogenia
Sinais aparentes: Sinal de Romaña/chagomas
Manifestações clínicas: 
✓ Febre
✓ Mal estar
✓ Cefaleia
✓ Enfartamento ganglionar 
✓ Hepatoesplenomegalia 
✓ Miocardite (ECG)
✓ Meningoencefalite
Fase 
aguda
~10 a 15 
dias
Óbito 10%
(crianças)
Patogenia
Fase crônica Indeterminada Assintomática
Passada a fase aguda sintomática/assintomática (10 a 30 anos):
 Período silencioso - anos, décadas ............. Formas crônicas
Exame clínico, ECG, RX cardíaco e digestivo normal
Patogenia
Fase crônica Sintomática Megas
• Baixa parasitemia com lesões típicas no coração e tubo digestivo
✓ Cardiopatia chagásica crônica
✓ Megaesôfago
✓ Megacólon
Diagnóstico laboratorial
IDEAL  no mínimo dois testes sorológicos realizados 
simultaneamente
Por que? 
- Complexidade antigênica;
- Falso-positivo
- Falso-negativo 
Golden standard  parasitológico  técnicas hemoparasitos
OMS
RIFI + HAI
ELISA
Diagnóstico laboratorial
Imunofluorescência indireta (RIFI)
• Teste sensível – considerado como referência
• Detecta Ac de 2 a 3 semanas após a exposição
• Considerados reagentes títuIos iguais ou superiores a 1:32.
• Triagem de doadores de sangue
• Contudo...artesanal, subjetiva
Imunofluorescência indireta (RIFI)
Diagnóstico laboratorial
Hemaglutinação Indireta (HAI)
• Simples e de baixo custo
• Resultados falso-negativos - falta 
de sensibilidade próxima a fase aguda 
da doença
• Resultados falso-positivos -
2 – mercaptoetanol
• São considerados reagentes 
títulos iguais ou superiores a 
1:40.
Diagnóstico laboratorial
Enzimaimunoensaio (ELISA)
• Fácil execução, leitura objetiva e 
passível de automação
• Menor sensibilidade do que a 
imunofluorescência em títuIos de 
1:40 ou menos.
Western Blot (WB) = TESABLOT
• Teste confirmatório
• 100% sensibilidade e 
especificidade
Interpretação dos resultados
INTRODUÇÃO
o Infecção parasitária 
cosmopolita
o Agente etiológico: 
Toxoplasma gondii
o Morfologia:
TRANSMISSÃO
C
IC
LO
E
V
O
LU
TI
V
O
MANIFESTAÇÕES CLÍNICAS
Imunocompetente ≠ Imunossuprimido ≠ Congênita
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Sorologia
✓ Verifica a imunidade da 
paciente no início da gestação
✓ Diagnostica infecção aguda
✓ Diagnostica infecção congênita
Sabin Feldman Dye Test
vídeo
✓ Descrito em 1948
✓ A presença de Ac inibe a 
entrada do azul de metileno no
parasita
Parasitológico
✓ Demonstração do parasita no
sangue, fluídos biológicos ou
tecidos
https://youtu.be/h8CVDoRP37w
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
TESTE OBSERVAÇÕES 
1. DYE TEST ou SABIN FELDMAN  Teste de referência 
 
2. FIXAÇÃO DE COMPLEMENTO  Baixa sensibilidade 
 
3. HEMAGLUTINAÇÃO PASSIVA  Baixo custo e execução simples 
 Excelente para determinar prevalência 
 
4. IMUNOFLUORESCÊNCIA 
 INDIRETA – IgM e IgG 
 Artesanal: adequado para rotinas menores 
 Não é o teste ideal para medidas quantitativas 
 
5. ELISA – IgM e IgG 
 
 
 Automação adequados para grandes rotinas 
 Melhores resultados quantitativos 
6. TESTE DE AVIDEZ IgG 
7. WESTERN BLOT  Diferencia estágios da infecção 
 
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Sorologia
• Anticorpos IgM e IgG
• Avidez de IgG
Anticorpos da classe IgM:
• Geralmente aparecem em torno de 
5 dias após o contato com o 
parasito, desaparecendo depois de 
semanas ou meses;
• Em alguns casos, títulos residuais 
podem permanecer detectáveis por 
um tempo superior a 1 ano, o que 
invalida a presença da IgM como 
indicador de infecção recente. 
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Sorologia
• Anticorpos IgM e IgG
• Avidez de IgG
Anticorpos da classe IgG: 
• Aparecem 1 a 2 semanas após a 
infecção e persistem por toda a vida; 
• Indicam infecção passada, afastando 
mulheres do risco de produzirem 
infecção congênita;
• Mulheres com sorologia negativa 
devem consideradas grupo de risco e 
acompanhadas durante toda 
gestação. 
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Sorologia
• Anticorpos IgM e IgG
• Avidez de IgG
Teste de avidez de IgG 
• Testes muitos sensíveis detectando a 
IgM residual;
• Principal uso em gestantes; 
• Interpretação: 
- alta avidez(maior que 60%): infecção 
passada;
- baixa avidez (menor que 30%): infecção 
recente com menos de 3 meses. 
DIAGNÓSTICO NO RN
• IgG - pode ser materna, persistindo por até 1 ano e meio 
diminuindo progressivamente; 
• IgG - níveis elevados, criança infectada;
• Diagnóstico começa da mãe, seguido de pesquisa de IgM no 
RN; 
• Placentite; 
• Resultado Não Reagente, não exclui infecção congênita, 
devido a soroconversão tardia;
• Padrão ouro: PCR

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