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INSTITUTO BRASILEIRO DE MEDICINA DE REABILITAÇÃO ANÁLISES CLÍNICAS I Este trabalho é composto por um estudo dirigido e dois relatórios referentes as aulas práticas realizadas nas dependências da IBMR Curso: Biomedicina Discente: Deisy Dantas da Cruz Docente: Fabricio da Mota Costa Ramalho Rio de Janeiro 2020 ESTUDO DIRIGIDO: 1) Diferencie os tubos de coleta sanguínea e seus respectivos anticoagulantes. Citrato de Sódio (azul) - O Citrato de Sódio Tamponado é utilizado para prova de coagulação em amostras. Diferentes concentrações de Citrato de Sódio podem ter efeitos significativos nas análises terapias anti-trombóticas, Tempo de Protombina (TP) e Tempo de Tromboplastina ativada (TTPa) Ativador de Coágulo (vermelho) - Possui ativador de coágulo (sílica) jateado na parede do tubo, fazendo com que o processo de coagulação da amostra seja acelerado. Utilizados para determinação em soro nas áreas de Bioquímica e Sorologia. Podem ser utilizados para tipagem ABO, RH, pesquisa de anticorpos, fenotipagem eritrocitária e teste de antiglobulina direta. Ativador de Coágulo com gel (amarelo) - Contém ativador de coágulo jateado na parede do tubo que faz com que o processo de coagulação seja acelerado e gel separador, para obtenção de um soro com melhor qualidade. Utilizados em rotinas de bioquímica, sorologia, imunologia, marcadores cardíacos e tumorais. EDTA (roxo) - Possui EDTA jateado na parede do tubo e são utilizados em bancos de sangue. O EDTA é o anticoagulante recomendado para rotinas de hematologia por ser o melhor anticoagulante para a preservação da morfologia celular. Heparina de Lítio (verde) - Possuem Heparina de Lítio jateada na parede do tubo. São utilizados quando é necessário o uso de plasma para determinações Bioquímicas. Estes aditivos são anticoagulantes que ativam as enzimas antiplaquetárias, bloqueando a cascata de coagulação. Fluoreto de Sódio com EDTA (cinza) - Utilizados na dosagem de glicose, lactato e hemoglobina glicada no plasma. O Fluoreto de Sódio é utilizado como inibidor glicolítico e o EDTA como anticoagulante, preservando a morfologia celular. 2) Explique as diferentes fases laboratoriais Existem três fases, a fase pré-analítica é a fase que inicia-se desde a indicação pré-teste, passando pela solicitação do exame, orientação ao paciente, coleta da amostra biológica, sequência de tubos, identificação, triagem, acondicionamento, transporte, até a entrada do material para a análise. Na parte do transporte é importante que o material coletado com os recipientes e com os materiais biológicos sejam identificados e transportados por meio de maletas e veículos adequados, que evitem a agitação das amostras e respeitem a relação tempo e temperatura no qual o material é exposto. A fase pré-analítica é a fase onde se concentra a maior parte dos erros laboratoriais. A segunda fase é a fase analítica. É nela que são realizadas as análises do material coletado. O laboratório inicia o processo de análise do material biológico. Atualmente existe um grande emprego de automação nessa fase, porém ainda é necessário que o profissional supervisione os instrumentos, reagentes, estabilidade da amostra, além da monitorização de todos os processos. A última fase, é a fase pós- analítica tem como papel a verificação das análises realizadas na fase Analítica. É a fase de checagem e liberação do exame para o envio do resultado ao paciente ou ao médico. 3) O que podemos observar ao realizar o EAS? Existem três etapas que podem ser observadas ao realizar a interpretação do EAS (Elementos Anormais e Sedimentares). O exame físico, macroscópico, que observa características que podem ser vistas a olho nu. Nesta fase será analisado o volume, coloração e aspecto da urina. No exame químico, são utilizadas fitas reagentes que indicam a presença ou não de substâncias no líquido, essas substancias são o pH, densidade, glicose, corpos cetônicos, bilirrubina, urobilinogênio, nitrito, hemoglobina e proteínas. E o exame sedimentar, no qual utiliza-se a microscopia para identificar o que está presente no material, como por exemplo, os leucócitos, hemácias, células epiteliais, bactérias, cristais e cilindros. 4) Como avaliar a qualidade da curva padrão? A calibração é um processo de comparação de um equipamento que desejamos calibrar com um padrão, que pode ser um outro equipamento ou algum material. Consideramos que cada quantidade do material de referência utilizado é a mesma, pelo menos em relacao as propriedades do analito. A curva de calibração é uma relação funcional do sinal observado, dada uma certa quantidade de analito. Em geral, utilizamos a regressão linear para estimarmos a incerteza devido a curva de calibração, que possuí uma qualidade que pode ser assegurada se caso os desvios do valor nominal de concentração excedem de 15% ou 20% no limite e qualificação, sendo que a determinação da curva de calibração é um indicador linear que se aproxima da unidade, e deverá apresentar um valor de pelo menos 0,99. O ajuste e a qualidade também pode ser avaliada pelos valores de porcentagem do erro sendo relativo, e devem aparecer aleatoriamente divididos numa banda horizontal estreita em torno do eixo da concentração que devem apresentar uma menor soma em um valor absoluto. 5) Qual a importância da manutenção iônica? Quais os distúrbios podem ocorrer com o desbalanço de Na, K e Cl? Os eletrólitos têm um papel importante na manutenção da homeostase no organismo. O sódio, o potássio e o cloro são eletrólitos típicos encontrados no organismo. Esses são componentes essenciais de fluidos corporais, como sangue e urina e, ajudam a regular a distribuição de água ao longo do organismo além de desempenhar um papel importante no equilíbrio ácido básico. Considerando os fluídos corporais, o sódio (Na+ ) é o principal cátion extracelular, o potássio (K+ ) é o principal cátion intracelular e o cloro (Cl- ) é o principal ânion extracelular Os distúrbios envolvidos nas alterações das concentrações plasmáticas de sódio podem levar a quadros de hiponatremia ou de hipernatremia. Na hiponatremia, os sintomas incluem letargia, apatia, desorientação, câimbras, anorexia, náuseas, dores de cabeça e agitação. Dentre os sinais clínicos clássicos observados no paciente hiponatrêmico estão anormalidades sensório motoras, reflexos profundos diminuídos. Na hipernatremia, os sintomas são geralmente inespecíficos e incluem forte sensação de sede, fraqueza, náuseas, perda de apetite, agitação, delírio, espasmos musculares, estupor e coma. A hipocalemia é a quantidade de potássio na corrente sanguínea que está abaixo do nível necessário. O potássio é um eletrólito muito importante para o funcionamento adequado das células musculares e nervosas e, principalmente, para as células do músculo do coração. A hipercalemia é o acúmulo de potássio no corpo pode se dar, também, devido a um problema nos rins, responsável pela remoção do excesso de potássio do corpo. Na maioria dos casos, pacientes que sofrem com hipercalemia também sofrem com distúrbios que reduzem a capacidade dos rins de eliminar a substância do organismo A hiperclaremia é o aumento dos níveis de cloro no sangue, ela não apresenta muitos sintomas visíveis e só pode ser confirmada com o teste, mas as causas da hipercloremia apresentam sintomas de desidratação, hipertensão, disfunção cardiovascular. A hipocloremia é causada pela diminuição dos níveis de cloro no sangue. Normalmente cloreto é consumido como cloreto de sódio (NaCl) e perdido aos poucos pelo suco gástrico, urina e suor. Desse modo causas de hipocloremia podem incluir a perda de fluidos corporais por vômitos prolongados, diarreia, diuréticos e laxantes 6) O que são ácidos graxos? Descreva sua estruturaOs ácidos graxos consistem em um tipo de lipídio formado por cadeias longas de carbonos (C) com um grupamento carboxila (–COOH) em uma de suas extremidades. Eles são a parte dos lipídios utilizada como combustível pelas células, constituindo uma das principais fontes de energia junto com a glicose e as proteínas. O termo “gordura” é frequentemente utilizado para designar ácidos graxos. Porém, as gorduras são formadas não só por estas moléculas, mas pela união desses ácidos graxos a uma molécula de glicerol. As gorduras podem ser sólidas ou líquidas em temperatura ambiente, dependendo da estrutura do ácido graxo que a compõe, podendo ser basicamente de duas formas: saturada ou insaturada. De acordo com o número de átomos de carbono, os ácidos graxos podem ser classificados como, ácido graxo de cadeia curta (4 - 6 carbonos), ácido graxo de cadeia média (8 - 12 carbonos), ácido graxo de cadeia longa (14 - 18 carbonos) e ácido graxo de cadeia muito longa (20 carbonos ou mais). 7) Explique a biossíntese de colesterol e a digestão/absorção de triglicerídeos. https://pt.wikipedia.org/wiki/Letargia https://pt.wikipedia.org/wiki/Apatia https://pt.wikipedia.org/wiki/Desorienta%C3%A7%C3%A3o https://pt.wikipedia.org/wiki/C%C3%A2imbra https://pt.wikipedia.org/wiki/Anorexia_(sintoma) https://pt.wikipedia.org/wiki/N%C3%A1usea https://pt.wikipedia.org/wiki/Cefaleia https://pt.wikipedia.org/wiki/Polidipsia https://pt.wikipedia.org/wiki/Polidipsia https://pt.wikipedia.org/wiki/Astenia https://pt.wikipedia.org/wiki/N%C3%A1usea https://pt.wikipedia.org/wiki/Anorexia_(sintoma) https://pt.wikipedia.org/wiki/Del%C3%ADrio https://pt.wikipedia.org/wiki/Espasmo https://pt.wikipedia.org/wiki/Espasmo https://pt.wikipedia.org/wiki/Estupor https://pt.wikipedia.org/wiki/Coma https://pt.wikipedia.org/wiki/Cloreto_de_s%C3%B3dio https://pt.wikipedia.org/wiki/Suco_g%C3%A1strico https://pt.wikipedia.org/wiki/Suco_g%C3%A1strico https://pt.wikipedia.org/wiki/Urina https://pt.wikipedia.org/wiki/Suor https://pt.wikipedia.org/wiki/Diarreia https://pt.wikipedia.org/wiki/Diur%C3%A9tico https://pt.wikipedia.org/wiki/Laxante https://www.infoescola.com/bioquimica/lipidios/ https://www.infoescola.com/elementos-quimicos/carbono/ https://www.infoescola.com/quimica/carboxila/ A via da biossíntese do colesterol se processa em quatro fases. Na primeira, acontece a conversão do acetilcoenzima A (acetil-coA) em mevalonato, um composto com seis carbonos (C-6), em três passos: duas moléculas de acetil-coA condensam, por ação da enzima tiolase (primeiro passo), formando acetoacetil-coA, o qual condensa com uma terceira molécula de acetil-CoA (segundo passo) para formar o β-hidroxi-β-metilglutaril- CoA (HMG-CoA), reação catalisada pela HMG-CoA sintetase. O HMG-CoA é depois reduzido a mevalonato pela HMG-CoA redutase (terceiro passo). Na segunda fase, ocorre a conversão do mevalonato em unidades isoprenoides ativadas através da adição de três grupos fosfato ao mevalonato, provenientes de três moléculas de ATP, em três passos sucessivos. Na terceira fase, forma-se o esqualeno (C-30), através da condensação de seis unidades isoprenoides (C-5). Na quarta e última fase, ocorre a ciclização do esqualeno para formar os quatro anéis do núcleo esteroide do colesterol, ao nível do retículo endoplasmático. Mais de 90% de nossa ingestão de lipídeos é feita sob a forma de triglicérides (compostos de três moléculas de ácidos graxos e uma de glicerol). Depois de ingeridas, as gorduras chegam ao duodeno praticamente inalteradas. No duodeno libera-se a colicistocinina que induz a contração vesicular, resultando na excreção da bile, e promovendo a liberação do suco pancreático, rico em lipase, enzima que fraciona a gordura em partículas menores. Os produtos da digestão de triglicérides (ácidos graxos, monoglicerídeos, poucas quantidade de glicerol) tendem a aglomerar-se e formar micelas, ocorrendo posteriormente sua absorção. Após a absorção, os produtos da digestão de lipídeos, são novamente convertidos em triglicérides e empacotados em partículas de lipoproteínas (quilomícrons e VLDL) que caem na circulação. Ao passar pelos capilares de determinados tecidos, especialmente no tecido adiposo, os triglicérides destas partículas são novamente dissociados em ácidos graxos livres e glicerol. Os ácidos graxos são absorvidos pelos tecidos onde formarão novos depósitos de gordura, enquanto o glicerol é transportado para o fígado ou rins, onde será armazenado ou metabolizado. No corpo existem células especializadas em armazenar gorduras, são as células adiposas (adipócitos), que chegam a ser compostas de 95% de gordura, na forma de triglicérides. 8) Qual medicamento administrado para pacientes com colesterol alto? Qual seu mecanismo de ação? O medicamento administrado para pacientes com colesterol alto são as estatinas. As estatinas são agentes hipolipemiantes que exercem os seus efeitos através da inibição da HMG-CoA redutase. Os inibidores da HMG-CoA redutase (vastatinas ou estatinas) constituem uma notável classe de medicamentos redutores de colesterol e têm sido associados com uma expressiva diminuição da morbidade e mortalidade cardiovascular para pacientes em prevenção primária ou secundária da doença coronariana. O mecanismo de ação das estatinas para obtenção da redução do colesterol se deve a inibição da enzima HMG-CoA redutase, por meio de uma afinidade destes fármacos com o sítio ativo da enzima. Esta inibição é reversível e competitiva com o substrato HMG-CoA3. Essa enzima fundamental na síntese do colesterol, levando a uma redução do colesterol tecidual e um consequente aumento na expressão dos receptores de LDL 9) Explique o mecanismo de filtragem realizado nos rins. Os rins filtram diariamente quase 180 litros de sangue. Depois de filtrado os produtos da excreção, como, a ureia, excesso de sais minerais e drogas são eliminados em forma de urina. O aporte de sangue ocorre através das artérias renais e o sangue filtrado ou depurado retorna à circulação por meio das veias renais. Apesar dos rins filtrarem, 180 litros de sangue, apenas 1,2 a 1,8 litros de urina é produzida por dia, o que significa que o rim reabsorve grande parte do filtrado. O processamento do sangue é realizado pelo nefro, a unidade funcional do rim. O nefro filtra o sangue e depois modifica o filtrado, recuperando água e solutos e eliminando os excretas, principalmente ureia. A urina produzida pelos rins são coletada pelos ureteres e armazenada na bexiga urinária. 10) Correlacione o sistema excretor com a regulação de pH. Os rins controlam o pH ajustando a quantidade de HCO3− que é excretada ou reabsorvida. A reabsorção de HCO3− é equivalente a excretar H+ livre, já a filtragem sem a absorção de HCO3− equivale ao aumento da concentração de H+ no plasma, ou seja, diminuição do pH. 11) Mecanismos tamponantes são essenciais pro bom funcionamento do organismo. Como a troca gasosa atua regulando o pH sanguíneo? Acidose respiratória é quando pH está abaixo de 7,35. Neste caso a respiração é deficiente. Em virtude dessa hipoventilação, a transferência de CO2 para o exterior é reduzida e a sua concentração aumenta no sangue, diminuindo o pH sanguíneo. Alcalose respiratória é quando o pH está acima de 7,45. Neste caso existe uma hiperventilação, a concentração de CO2 diminui e o pH do sangue aumenta. Deste modo, a troca gasosa em relação ao CO2 está inversamente relacionada ao pH, pois quando há um aumento de CO2, o pH está baixo (acidose) e quando o CO2 está baixo, o pH está alto (alcalose) 12) Anexar os relatórios RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM URINÁLISE A urina é um importante objeto de estudo. Permite avaliar a função renal e fornece indícios sobre a etiologia da disfunção. O exame de urina completo inclui exames físico, químico e microscópico. A aula prática temcomo objetivo auxiliar o aluno a aplicar as técnicas e os métodos utilizados na coleta de urina, apresentadas em sala de aula e realizar a técnica de EAS no laboratório. A pratica é fundamental para ocorra a aplicabilidade dos matérias, ferramentas e equipamentos com competência técnica. Materiais utilizados: Coletor com amostra biológica; Estantes para tubos; Pipetas; Tubos pasteur cônicos de 15 mL (falcon); Proveta graduada; Centrifuga; Tiras reagentes de urina; Lâminas; Lamínulas; Amostra de urina; Luva descartável Papel toalha Procedimento: Homogeneizar a urina no frasco coletor (movimentos circulares); Avolumar a urina homogeneizada na proveta graduada; Analisar volume, cor, aspecto e odor; Observar e anotar os resultados; Identificar um tubo falcon; Transferir cerca de 10 ml para o tubo falcon; Reservar o restante da urina no frasco coletor; Preparar a centrifuga, balanceando os tubos para minimizar o risco de quebra. (de acordo com mesmo volume de aspiração, de forma equidistante, tubos de tamanhos iguais e do mesmo material); Centrifugar por 10 min a 2.000 rpm; Aguardar até que a centrífuga pare completamente antes de tentar retirar os tubos. (Nunca parar a centrífuga com a mão, usar o freio. A brusca interrupção, além de hemólise, pode deslocar o gel separador). Verter a urina do tubo falcon centrifugado; Com o auxílio da pipeta, coletar 20 microlitros do sedimento existente no tubo falcon e colocar na lâmina, cobrir com a lamínula e observar no microscópio com objetiva de 10x e de 40x. Observar e anotar os resultados; Enquanto a urina encontrar-se na centrífuga: Utilizando o restante da urina reservada no frasco coletor; (paço 3) Mergulhar a tira reagente, completamente, no frasco coletor contendo a urina homogeneizada; Remover o excesso de urina, encostando a borda da tira no tubo falcon, e em seguida em um papel toalha; Observar o tempo necessário para que haja as reações; Comparar a cor de cada um dos quadrados, referentes aos diversos parâmetros, com a tabela de cores do recipiente das tiras; Anotar os resultados; Para microscopia: Lamina Lamínula Colocar 20 μl de urina na lamina colocando a lamínula por cima Analisar no microscópio Resultado: Aspecto Físico: VOLUME 23ml; COR Amarelo Claro ASPECTO ligeiramente turva. ODOR “sui generis” Aspecto Químico: Leucócitos Negativo Urobilinogênio Negativo Bilirrubina Negativo Sangue/Emoglobina Negativo Nitrito Negativo pH 6,5 Densidade 1027 Proteínas Negativo Glicose Negativo Corpos cetônicos Negativo Microscopia: Negativo. RELATÓRIO DE VALOR DE ABSORVÂNCIA: A prática realizada no laboratório de análises do IBMR trouxe um exemplo prático, do que vimos em sala de aula, de uma prática comum em laboratório, uma diluição seriada. É uma técnica na qual se realizam várias diluições progressivas. Inicia-se com a solução mais concentrada chegando a soluções menos concentradas, amplificando o fator de diluição rapidamente. - Materiais utilizados: 4 tubos; Água destilada; Pipeta; Ponteira; Estante; Luva; Solução KMNO4; - Metodologia: Enumeração dos tubos de 1 a 4. Acrescentar 2ml de água destilada em cada tubo. Adicionar 3,2ml de água destilada e 0,8ml da solução de estoque. No segundo tubo adicionar 2ml do primeiro tubo. - Valor de absorvância de cada tubo: 1º tubo = 0,290 mg de permanganato de potássio na solução; 2º tubo = 0,174 mg de permanganato de potássio na solução; 3º tubo = 0,123 mg de permanganato de potássio na solução; 4º tubo = 0,096 mg de permanganato de potássio na solução. Referencias Bibliográficas: https://www.google.com/search?q=espectrofot%C3%B4metro&rlz=1C1CHBD_pt- PTBR852BR852&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ved=2ahUKEwiaz9mP1J3oAhWaD rkGHYTWCMkQ_AUoAXoECBIQAw#imgrc=1N6hY2k6t_eqcM – https://aprender.ead.unb.br/pluginfile.php/327505/mod_resource/content/1/d27960PJ03 AE05SE.pdf https://www.google.com/search?q=unidade+de+medida+microlitro&tbm=isch&ved=2a hUKEwiei_i2xJ3oAhXWILkGHTe1DgYQ2- cCegQIABAA&oq=unidade+de+medida+microlitro&gs_l=img.3...11514.30073..30846 ...1.0..0.146.4274.13j27......0....1..gws-wiz- img.....0..0i8i30j0i19j0i10i19j0i8i30i19j0j0i30j0i67j0i5i30j0i24.YZTvWiQD838&ei=- axuXt6qDtbB5OUPt-q6MA&rlz=1C1CHBD_pt-PTBR852BR852 https://www.google.com/search?q=luva+descartavel&tbm=isch&ved=2ahUKEwjyiPajv Z3oAhXfKrkGHaL5A58Q2- cCegQIABAA&oq=luva+descar&gs_l=img.1.0.0l10.767606.770097..772369...0.0..0.1 32.1156.4j7......0....1..gws-wiz-img.IYAO396IvYg&ei=eqVuXvLjEt_V5OUPovOP- Ak&rlz=1C1CHBD_pt-PTBR852BR852#imgrc=KGVqOt01WN3GtM 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