07 IA em cadelas pt 2

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FISIOPATOLOGIA DA REPRODUÇÃO II
Final de IA em cadelas
Depois de realizar a coleta do sêmen deve-se fazer a avaliação macroscópica e microscópica. Na avaliação macroscópica avalia-se volume (se está dentro do esperado pela raça. Pode variar muito entre raças. Deve coletar um volume mínimo pra fazer a inseminação, que seria de 6mL em raças maiores e pode ser um pouco menos para pequenas), coloração e viscosidade. 
Na avaliação microscópica avalia-se motilidade (porcentagem de espermatozoides moveis. Varia de 0 a 100%, é uma medida subjetiva, porém não deve ter discrepâncias entre dois avaliadores diferentes. Ex: uma pessoa falar que tem 90% e outra pessoa falar que tem 20% não pode), vigor (capacidade de andar em linha reta. Os que estiverem andando em círculos não possuem vigor), concentração (deve calcular para dose. É muito calculada quando for congelar sêmen), morfologia espermática (as patologias). 
Motilidade normal: 80 a 90%. E anormal abaixo de 60% (pode ser considerado inapto para reprodução e isso deve constar no laudo de reprodutores. Na monta natural, o macho pode emprenhar a fêmea mesmo com 60% de motilidade, mas para intuito reprodutivo dará um numero menor de filhotes do que um reprodutor com motilidade maior daria, e com isso não aproveita a máxima de ovulação da cadela).
Vigor normal: pelo menos 3. Abaixo disso poucos espermatozoides chegarão até a tuba uterina, gerando também poucos filhotes. 
pH do sêmen: deve ser entre 6,3 e 6,7. Não é muito mensurado. Se o pH estiver muito baixo ou alto pode afetar o ambiente uterino. 
Concentração: é feita na Câmara de Neubauer. 
Deve-se contar 5 quadradinhos, na diagonal ou 4 nas extremidades e 1 no meio. Antes de começar a contar, deve diluir o sêmen (no cão dilui de 1:100) com água ou formol 4% (é o melhor, pois mantem as estruturas celulares melhor). 1mL de sêmen para 99 de solução de formol ou água (deve matar os espermatozoides pra fazer a contagem, pois se continuarem vivos ficarão nadando atrapalhando a contagem). 
Ex: contou 100 espermatozoides. Para transformar para mL na Câmara de Neubauer, o fator de correção é 50.000. Então será 100 x 50.000 = 5.000.000 espermatozoides/mL. Porém esta não é a concentração final. Deve retirar a diluição, portanto será 5mi x 100 (da diluição 1:100) = 500.000.000 de espermatozoides/mL, sendo esta a concentração final espermática. 
Se o volume for de 10mL, a concentração total será de 5 bilhões de espermatozoides/10mL. Seria 500.000.000 x 10mL = 5bi. O total de doses depende da dose inseminante. 
Avaliação morfológica: em busca de patologias e quantificar o numero de espermatozoides viáveis. Busca-se cabeça dupla, dupla cauda etc. O normal é encontrar entre 5 a 10% de patologias. Se contou 100 espermatozoides e encontrou 10 patológicos, a porcentagem é de 10%. Se de 100, 10 são patológicos, 90 são normais. Portanto, 5bi x 0,9 = 4.500.000.000 de espermatozoides viáveis. 
Tipos de sêmen para utilização: sêmen fresco, resfriado e congelado. O resfriado pode ser usado em qualquer espécie. Deve ser mantido entre 4 a 5°C por até 5 dias. Deve ser diluído, sendo que a terceira fração pode ser usada como diluidor para dar volume pra inseminar (não pode ser usada como diluidor para transporte). 
O congelado se mantém a -196°C por tempo indeterminado. 
IA propriamente dita: via intraginal (sêmen fresco ou resfriado) ou via intrauterina (sêmen congelado, pois perde muita qualidade com o congelamento então precisa garantir o máximo possivel). A via intrauterina pode ser feita de 2 formas: por laparoscopia ou passando a cérvix e chegando até o útero. 
Na intravaginal, apenas introduz na vagina e despeja o sêmen. Depois deve-se levantar os membros pélvicos da cadela de forma que ela fique apoiada somente pelos torácicos, por cerca de 3 a 5 minutos, ajudando assim que o sêmen “desça” até o útero por gravidade. 
 
Pode ser feita por laparoscopia ou intravaginal ultrapassando a cérvix. 
A dose inseminante diz respeito aos espermatozoides viáveis. 
A frequência de inseminação é de 48h em 48h, ou seja, a cada 2 dias. Isso ocorre por conta do macho, que se sofrer coletas seriadas em intervalos pequenos terá queda na qualidade do sêmen. A cadela ovula durante muito tempo (72h até 96h), então se coletar sêmen e inseminar desde o começo do estro onde não tem muitos oocitos viáveis, quando chegar o melhor momento onde tem os oocitos viáveis não terá sêmen de qualidade. O macho precisa passar por uma recuperação espermática depois de cada coleta. 
Tem que inseminar antes do oócito ficar pronto (após maturação oocitária ficará pronto), pois depois terá um intervalo pequeno para fertilizar. No momento em que começar a maturação oocitária já deve ter espermatozoides circulando. 
Coleta de sêmen: máximo de 1 a 2 coletas semanais, intervaladas em 3 dias. O local da coleta é piso seguro e lugar tranquilo. O método da coleta pode ser por massagem digital, vagina artificial e eletroejaculador. Pode usar um swab congelado com cheiro da cadela para estimular o macho. 
No estudo observou-se que a qualidade das coletas de sêmen com 24h de intervalo diminuiu na 2ª coleta. Enquanto que com intervalo de 48h, a qualidade caiu na 3ª coleta. A medida que o intervalo entre as coletas aumenta, melhor é a recuperação espermática.