pratica bioquímica

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FACULDADE ESTÁCIO DE SÁ 
 
 
ROTEIRO DE PRÁTICA 
Curso: enfermagem Data: Sexta Turma: 
 
Disciplina: Bioquímica aplicada Professora: Igor Melo 
 
PRÁTICA 7 – Identificação de carboidratos 
 
Introdução 
 
Essa prática segue os mesmos princípios teóricos que embasam a reação de Molisch, 
onde há formação de furfural e hidroximetilfurfural (HMF). Como vimos, esses dois produtos, 
isoladamente, são incolores. Assim, adiciona-se um composto fenólico ao meio para que seja 
desenvolvida coloração visível (nesse caso, vermelha). A reação de Seliwanoff só diferencia-se 
da reação de Molisch nos reagentes utilizados: o ácido que causará a desidratação do 
carboidrato é o ácido clorídrico (HCl) e o fenol que reage como o furfural e HMF é o resorcinol. 
 Esse teste permite diferenciar aldoses de cetoses porque a reação com a cetose é mais 
rápida e mais intensa. Isso porque a formação do furfural é mais fácil que a formação do 
hidroximetilfurfural. 
A identificação dos açúcares como ALDOSE ou CETOSE pode ser realizada através de 
uma reação com o reativo de Selliwanoff. Esse reativo, após aquecimento, reage com cetoses, 
formando um produto de cor vermelho escura (púrpura) e reage com aldoses formando um 
produto de cor mais clara, rosa. 
 
Objetivo 
 
1 – Identificar carboidratos e classificá-los segundo o grupo funcional (aldoses ou cetoses) 
2 – Verificar a presença de amido 
 
Material: 
 
a) Reagentes e soluções 
 
• Solução 0,1M de frutose 
• Solução 0,1M de glicose 
• Solução 0,1M de sacarose 
• Água destilada 
• Reagente de Seliwanoff * 
 
b) Vidraria e instrumental 
• 04 tubos de ensaio 
• Conta-gotas ou pipeta Pasteur 
• Banho maria 
• Pipeta de 5 mL 
Procedimento: 
 
1. Enumere quatro tubos de ensaio, adicionando: 
 
(1) 3ml de Seliwanoff + 5 gotas de água destilada 
(2) 3ml de Seliwanoff + 5 gotas da solução de frutose 
(3) 3ml de Seliwanoff + 5 gotas da solução de glicose 
(4) 3ml de Seliwanoff + 5 gotas da solução de sacarose 
 
2. aquecer todos os tubos em banho-maria fervente por um minuto e observar a coloração 
desenvolvida; 
3. ferver por mais 5 minutos e anotar a coloração desenvolvida; 
4. compare os resultados. 
 
A reação positiva é caracterizada pelo aparecimento de coloração avermelhada, que indica a 
formação do complexo entre furfural ou HMF com o resorcinol e, conseqüentemente, indica 
presença de aldoses e cetoses. Como foi dito, a reação para cetoses é mais rápida e mais 
intensa do que para aldoses. 
 
Identificação do amido 
 
 
Polissacarídeos são moléculas de elevado peso molecular, cuja unidade fundamental são 
os monossacarídeos, principalmente a glicose. Como exemplos de polissacarídeos importantes 
na natureza podemos destacar o glicogênio, a celulose e o amido. 
O amido, polissacarídeo de extrema importância em alimentos, é produzido em grande 
quantidade nas folhas dos vegetais como forma de armazenamento dos produtos da 
fotossíntese, e é constituído por dois outros polissacarídeos estruturalmente 
diferentes: amilose e amilopectina (ver figura abaixo). 
 
 
Como podemos observar, a molécula da amilose não 
apresenta ramificações e, no espaço, assume 
conformação helicoidal (forma de hélice). A ligação entre 
os átomos de carbono das unidades de glicose são do 
tipo alfa 1-4. 
 
A amilopectina apresenta estrutura ramificada, sendo que os "ramos" aparecem a cada 24-30 
moléculas de glicose. A ligação entre as unidades de glicose também é do tipo alfa 1-4 na mesma 
cadeia. Porém, unindo duas cadeias aparecem ligações do tipo a 1-6. Observe a figura: 
 
 Moléculas de alto peso molecular (como a amilose e a amilopectina) podem sofrer reações 
de complexação, com formação de compostos coloridos. Um exemplo importante é a 
complexação da amilose e da amilopectina com o iodo, resultando em complexo azul e vermelho-
violáceo, respectivamente. A figura abaixo esquematiza a interação do iodo com a estrutura do 
amido: 
 
Já sabemos que o amido é formado pela combinação da amilose 
com a amilopectina. Também sabemos que a amilose forma um 
complexo azul com o iodo, enquanto a amilopectina forma um 
complexo vermelho. Qual será então a cor do complexo iodo - 
amido??? 
O complexo esquematizado ao lado apresenta coloração azul 
intensa, desenvolvida pela oclusão (aprisionamento) do iodo nas 
cadeias lineares da amilose. 
E a interação iodo -amilopectina? 
 Como vimos, o aprisionamento do iodo dá-se no interior da hélice formada pela amilose. 
Como a amilopectina não apresenta estrutura helicoidal, devido à presença das ramificações, a 
interação com o iodo será menor, e a coloração menos intensa. 
IMPORTANTE - nem todos os polissacarídeos, apesar de serem moléculas grandes, dão 
complexo colorido com o iodo. Isso porque é necessário que a molécula apresente uma 
conformação que propicie o "encaixe" do iodo. A celulose é um exemplo de polissacarídeo que 
não dá reação colorida com o iodo. 
Material 
 a) Reagentes e soluções 
 - solução de amido 1% * 
 - solução de glicose 2% 
 - solução de lugol ** 
 - solução de hidróxido de sódio (NaOH) 1M 
 - solução de ácido clorídrico (HCl) 1M 
 - água destilada 
 
 b) Vidraria e instrumental 
 
- 03 tubos de ensaio 
- conta-gotas ou pipeta Pasteur 
- pipetas de 2 mL 
 
 
Procedimento 
 1. Prepare a seguinte bateria de tubos, identificando-os: 
 (1) 2 mL de água destilada 
 (2) 2 mL da solução de amido 
 (3) 2 mL da solução de glicose 
 
 2. a cada um dos tubos adicionar 4 gotas de lugol; 
 3. observar a coloração desenvolvida e descrever o resultado. 
 O desenvolvimento de coloração azul intensa indica presença de polissacarídeo. 
 
 
 
Responda aos seguintes questionamentos: 
 
1. Descreva o que houve no primeiro experimento. 
Após colocar reagente no 1º tubo com água destilada, 2º tubo com solução de frutose, 3º 
tubo solução de glicose, 4º tubo solução de sacarose e levar para o aquecimento, 
podemos observar que no 1º tubo não houve alteração pois a água destilada é o reagente 
controle, no 2º tubo assim como no 4º houve altercação na cor para vermelho escuro, 
identificamos uma cetose que quando foi submetida a fervura mudou de cor porque a 
cetose tem a capacidade de se ligar com os reagentes que estar no reagente seliwanoff 
e os seus componentes do grupo cetona irão mudar de cor rapidamente, como no 4º tubo 
a sacarose também contém frutose durante essa reação há a separação da glicose e da 
frutose , dessa forma a frutose reage. No 3º tubo identificamos uma áudios onde a solução 
é mais clara pois sua reação é mais lenta. 
2. Descreva os acontecimentos do segundo experimento. 
Podemos observar que o tubo onde tem polissacarídeo ( amido ) ao entrar em contato 
com o lugol a coloração irá mudar para azul mais intenso. Como o amido é uma molécula 
grande o iodo vai se encaixar nas moléculas de amilose dando essa coloração, diferente 
do 3º tubo onde a glicose tem moléculas menores impedindo que o iodo se encaixe e 
cause essa coloração. No 1º tubo onde tem água destilada não houve alteração pois ela 
é uma reação controle.