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CITOESQUELETO “Está Vivo, está movendo!” lento e restrito (plantas) INTRODUÇÃO: Movimento pode ser visível (animais), Movimento Sistemas Vivos deriva movimento dentro céls. ou grupo de céls. INTRODUÇÃO: INTRODUÇÃO: Movimentos levam à modificação na forma da célula CÉLS. MUSCULARES AMEBÓIDE, CROMOS. NA DIVISÃO CELULAR, . Movimentos que não levam à modificações na forma da célula CORRENTES CITOPLASMÁTICAS, TRANSPORTE INTRACELULAR, MOV. DE ORGANELAS. - determinar a forma celular; - estabilizar e manter arquitetura subcelular – topologia das organelas, suporte e resistência para célula; - permitir flexibilidade e mobilidade de organelas e estruturas celulares [fagocitose, citocinese, junções cel-cél, e cel. matriz extracel.]; - movimento celular [céls. sang.; fibroblastos; mov. céls. embrion.]; - mudanças no formato celular. 2. FUNÇÕES: CITOESQUELETO = CITOMUSCULATURA Segregar os cromossomos durante a divisão celular, Entrelaçados num arranjo tridimensional altamente organizado. 3. CONSTITUINTES E DISTRIBUIÇÃO: Componentes Tamanho Proteína Atividades Microtúbulos ~25nm Tubulina Formação do fuso mitótico, transporte de vesículas e outras organelas, formação de cílios, flagelos, centríolos e corpúsculos basais. Microfilamentos 5-7 nm Actina Endocitose, migração celular, citocinese. Filamentos intermediários 7-10 nm Citosqueratina Vimentina Periferina Desmina Sustentação, desmossomos, hemidesmossomos. 4. MICROFILAMENTOS (MF) F-actin cytoskeleton in a 2D cultured bovine articular chondrocyte, labelled using phalloidin-FITC. Courtesy: Dr Mark Kerrigan, Dr Andrew Hall & Linda Sharp, Membrane Biology Group, School of Biomedical and Clinical Laboratory Sciences. 4. MICROFILAMENTOS (MF) actina G + profilina (ou timosina) ATP, K++, Mg++ Ao ME = fios de 8 nm espessura (+finos e + flexíveis que os MT) 5% ou mais das proteínas celulares (céls. mm. 20%) actina polipep. 357 aa. + 1ATP associado mamíferos 6 tipos actina: - princ. céls. mm.; e - céls. não mm. 4. MICROFILAMENTOS (MF) actina F Actina várias isoformas ( genes) 4.1 FUNÇÕES Formam estruturas relacionadas com a mobilidade celular Microvilosidades Feixes contráteis citoplasmáticos Protusões em forma de lâmina (lamelipódios) Anel contrátil na divisão lamelipódio córtex filopódio Proteínas ligadas a actina – organização e desorganização do filamento de actina MICROFILAMENTOS / MICROVILOSIDADES 5. MICROTÚBULOS (MT) estruturas cilíndricas, ocas, rígidas e dinâmicas – diâmetro 25 nm síntese MT = menos de 40 seg. meia vida MT = 10 min. vida média tubulina = 20 horas polimerização dos dímeros de tubulina - crescimento do MT despolimerização dos dímeros de tubulina - diminui ou até desaparece cilindro oco Pool tubulinas Mg2+,GTP polimeriza despolimeriza Centro Organizador do Microtúbulo (COM - CENTROSSOMA) Extremid. + (plus), cresce pela adição de tubulina Extremid. – (minus), perde subunid. se não estiver estabilizada MT estruturas POLARIZADAS MT – Câncer Drogas afetam polimerização e a despolimerização MT na mitose – tratamento câncer [colchicina, colcemide, vincristina e vinblastina = ligam tubulina/bloqueio divisão] 5.1 FUNÇÕES: proporciona rigidez e mantém a forma da célula coordena o movimento intracelular de organelas e outros componentes formam estruturas microtubulares 5.2 ESTRUTURAS MICROTUBULARES fuso da divisão celular (aparelho mitótico); áster Cílios; flagelos; corpúsculo basal; centríolo TRANSITÓRIAS PERMANENTES MT mitóticos, fibras do fuso mitótico MT citoplasmáticos, presente na cél em intérfase MT centriolares, dos corpusculos basais e centríolos MT mitóticos, fibras do fuso mitótico MT centriolares, dos corpusculos basais e Centríolos estruturas pequenas e cilíndricas (0,2 m diâmetro e 0,5 m comprimento) normalmente são estruturas pares em arranjo perpendicular localizadas no centrossoma (citocentro), próximo ao CG arranjo: nove trincas periféricas de MT (A,B e C) 5.4 CÍLIOS E FLAGELOS projeções celulares com motilidade própria COM dos cílios e flagelos = corpúsculo basal Espermatozóide Céls. epit. respir., Céls. revest. da Tuba Uterina Eucariót. pluricel. 5.4 CÍLIOS MT citoplasmáticos, presente na cél em intérfase Movimento oganelas e macromoléculas RECEPTORES, cinectina e dinactina PROTEÍNAS MOTORAS, cinesina e dineina PROTEÍNAS MOTORAS PROTEÍNAS MOTORAS, cinesina PROTEÍNAS MOTORAS, dineina 5.6 FILAMENTOS INTERMEDIÁRIOS Suporte mecânico para a célula, Manutenção da forma celular, Estabelecem a posição das organelas no interior da célula. É o filamento mais resistente e durável ~ cabos formados vários fios enrolados – resistência à tração. Microscopy of keratin filaments inside cells Distribuição: malha filamentosa compacta (rede contínua) entre MP e envoltório nuclear (EN). E uma malha na face interna do EN = lamina nuclear. Rico em céls. sujeitas estresse mecânico: - axônio neurônio; - céls. Mm.; - Céls. Epiteliais. Protege céls. e suas membranas rompimento 5.6 FILAMENTOS INTERMEDIÁRIOS Composição química 5.6 FILAMENTOS INTERMEDIÁRIOS Diversa - mais 50 tipos - 3 classes: Filamentos de queratina céls epiteliais Neurofilamentos Filamentos de vimentina céls conjuntivo, MM Neuroglias Lâmina nuclear = laminofilamento LAMINOFILAMENTOS - LÂMINA NUCLEAR Todas as células Na face interna do EN Forma malha achatada Fornece forma e resistência ao EN The nucleus of a cell imaged with confocal microscopy (red = DNA, green = nuclear lamina). Nuclear stability governs the nanomechanical dynamics of cells during physiological processes www.london-nano.com/.../andrewpellingnucleus.jpg LAMINOFILAMENTOS - LÂMINA NUCLEAR FILAMENTOS DE QUERATINA (= ceratina, tonofilamentos) Citoesqueleto células epiteliais Epiderme e derivados (unhas, pêlos,…); Mucosas; Glândulas. Citoqueratinas Mais 30 tipos: classe I (ácidos); classe II (neutras ou básicas) Proteina ligadora = filagrina Placas citoplasmáticas dos desmossomos e hemidesmossomos Diferentes tipos céls. epiteliais apresentam diferentes tipos queratinas: . Epiderme: céls. basais – queratinas K5 e K4; céls. superf. K1 e K10 mutações – doenças vesiculosas Como as céls epiteliais apresentam uma combinação particular de citoqueratinas, esta característica é aproveitada para diagnosticar a origem de alguns tumores cancerígenos e suas metástases, já que as citoqueratinas não se modificam com a formação cancerosa e podem ser identificadas com a ajuda de anticorpos específicos. 3. FILAMENTOS DE VIMENTINA Comum em céls. embrionárias Adulto: céls origem mesodérmica fibroblastos, céls endotelais, céls sangue,… Proteína ligadora = plactina Troncalcell de Ariel O. Ahumada Alvarez Microscopía de fluorescencia. Mención Especial Categoría Técnica. Células troncales (Stem cell) de endometrio humano cultivadas in vitro hasta semi-confluencia y teñidas con doble marca para ADN (núcleo color rojo) y citoesqueleto de vimentina (filamentos color verde). ADN teñido con ioduro de propidio y vimentina con anticuerpo (AB) anti-vimentina conjugada con fluorocromo (FITC es fluorescente verde). Se aprecia núcleo de células en rojo y una red profusa de microfilamentos de vimentina que lo circunda. La vimentina es una proteina que forma parte de la estructura celular. Fotografía registrada en la Red de Medicina Reproductiva y Molecular, Buenos Aires. Figura 1 - Marcação para anticorpo anti-Vimentina. Células de Tecido conjuntivo em Apêndice ileo-cecal. Método Polímero Indirecto 100x. pwp.netcabo.pt/amadeuferro/imagens.htm 3. FILAMENTOS DE VIMENTINA - DESMINA Citoplasmacéls musculares Proteína ligadora sinamina 3. FILAMENTOS DE VIMENTINA - GLIAIS Citosol dos astrócitos e algumas céls Schwann http://www.ofir4news.com.br/2008/07/31/pesquisa-cria-celulas-tronco-reprogramadas-e-personalizadas/ www.imagem.ufrj.br/thumbnails/4/4753.jpg 4. NEUROFILAMENTOS Principais elementos estruturais dos neurônios, incluindo dendritos e axônios Formam rede tridimencional que converte axoplasma em um gel resistente e estruturado 6. NEUROFILAMENTOS The eukaryotic cytoskeleton. Actin filaments are shown in red, microtubules in green, and the nuclei are in blue
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