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18/05/2015 1 Prática Desnaturação, Osmose e DNA Tema 1 –Desnaturação de Proteínas Procedimento para observação de desnaturação • a. quebre a casca do ovo e libere seu conteúdo em um recipiente semelhante a um prato; • b. sobre este despeje álcool etílico; • c. aguarde e descreva as alterações observadas; 18/05/2015 2 Transporte Passivo – Osmose - Difusão de água através da membrana – passa pela bicamada fosfolipídica Transporte Passivo 18/05/2015 3 Objetivos - observação da movimentação de água do interior da célula por meio do transporte passivo em função das características da solução de imersão (hipo ou hipersalina) Tema 2 – Observação de osmose em célula vegetal Procedimento para observação de célula vegetal • a. Pegue as lâminas e limpe-as cuidadosamente com papel macio; • b. Com ajuda de um conta-gotas coloque duas ou três gotas de água sobre uma lâmina; • c. Com uma lâmina de bisturi ou gilete, corte uma parte com cerca de 5 mm da epiderme inferior da planta e posicione sobre a gota de água na lâmina; Tradescantia sp Retire a epiderme inferior 18/05/2015 4 Procedimento para observação de célula vegetal • d. Pegue uma lamínula cuidadosamente e posicione-a sobre a lâmina na borda das gotas de água, formando um ângulo de 90º; • e. Vá soltando delicadamente a lamínula sobre a água – o objetivo é cobrir as gotas d’água sem deixar bolhas – até que esteja totalmente “deitada” sobre a lâmina; • f. Posicione a lâmina sobre a platina - certifique-se que a objetiva é a de menor aumento – com auxílio do charriot posicione a lâmina sob a objetiva e inicie a observação, utilizando as objetivas de 10x e de 40x, sucessivamente; Vacúolos com Antocianina (pigmento) Epiderme inferior Procedimento para observação de célula vegetal • g. Faça um esquema do material observado no aumento de 400x, indicando as estruturas representadas (cloroplastos, parede celulósica e vacúolo contrátil). • h. Na lateral da lamínula pingue duas gotas de solução salina e com o auxílio de um pedaço de papel absorvente retire o excesso de água do outro lado da lamínula - esquematize a alteração observada. • Repita o procedimento com água limpa. Vacúolos com Antocianina (pigmento) 18/05/2015 5 Objetivos - observação de milhares de filamentos de DNA vegetal visíveis a olho nu - espécies utilizadas – morango, banana e cebola - discussão a respeito das propriedades das membranas e sua quebra por meio dos reagentes utilizados Tema 2 – Observação de DNA Procedimento para observação de DNA vegetal A – Pique e macere bem o material orgânico (morango, banana ou cebola) a ser utilizado; B – Em um béquer de 250mL adicione 150 mL de água, uma colher de sopa de sal de cozinha e uma colher de sopa de detergente – misture cuidadosamente para não espumar; C – Adicione o macerado no béquer e o coloque em banho-maria (70°C) por 5 minutos; D – Retire do banho-maria e coloque em banho de água gelada por 3 minutos; 18/05/2015 6 Procedimento para observação de DNA vegetal E – Retire do banho gelado e peneire o conteúdo em outro béquer (500 mL) – deixe descansar por 3 minutos; F – Adicione cuidadosamente o mesmo volume de álcool gelado (deixando escorrer pela parede do béquer); G – Observe entre as fases e descreva o observado após a adição do álcool gelado. Responda: Qual a função da adição do detergente, sal e álcool gelado no macerado da espécie vegetal utilizada (banana, tomate ou morango)? Explique 18/05/2015 7
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