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Acadêmica: Jéssyca Sara de Col Turma: Farmácia, 7º fase 
 
ESPERMOGRAMA 
OBJETIVO 
 
O espermograma serve para: 
- Controle de vasectomia; 
- Verificação de fertilidade; 
 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS 
 
 
Estufa 
Estante 
Lâminas 
Lamínulas 
Corantes 
Fita de pH 
Banho Maria 
Papel Toalha 
Cronometro 
Microscópio 
Spray Fixador 
Bastão de Vidro 
Óleo de Imersão 
Micropipeta 10µL 
Micropipeta 20µL 
Micropipeta 100µL 
Pipeta De Pasteur 
Caneta Para Vidro 
Eosina Amarela 5% 
Salina Formalada 1% 
Câmara De Neubauer 
Corante Hematológico 
Tubo Cônico Graduado 
Ponteiras Azuis E Amarelas 
Descarte Com Água E Hipoclorito 
VALOR REFERÊNCIA PARA 
HEMÁCIAS E LEUCÓCITOS: 
< ou = 1000/mm3. 
 
 
 
PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO 
EXAME MACROSCÓPICO 
(DEVE SER REALIZADO DENTRO DA 1º HORA) 
 
PASSO 1 
Organizar a bancada com os materiais necessários para a realização do 
exame macroscópico: estante, tubo cônico, fita de pH, pipeta de 
Pasteur, micropipeta de 1000mcg, ponteiras azuis, descarte, papel 
toalha e bastão de vidro. 
PASSO 2 
Análise da Liquefação e Aparência do Ejaculado: 
Abrir o frasco de coleta, analisar e anotar: a cor, odor, estado de 
liquefação do esperma e o aspecto (deve estar homogêneo). 
 (Verificar resultados esperados nas definições na margem esquerda). 
PASSO 3 
Análise da Viscosidade: 
Com auxílio da pipeta de Pasteur ou o bastão de vidro, a amostra 
normal deve formar pequenas gotas discretas; e se a amostra estiver 
anormal, a queda formará um fio com mais de 2 cm. 
PASSO 4 
Análise do Volume: 
Transferir o conteúdo de esperma do frasco de coleta para o tubo 
cônico graduado, tentando desperdiçar o menos possível, e sugando 
os restinhos do frasco com a pipeta de Pasteur se necessário. Lembrar 
de manusear vagarosamente pois pode formar bolhas dentro do tubo, 
dificultando a visibilidade correta do volume. 
Após fazer a transferência, anotar o volume obtido na coleta. 
PASSO 5 
Análise do pH: 
Com o sêmen já transferido para um tubo cônico, utiliza-se uma fita 
de pH para a análise. Está fita deverá ser submersa e retirada no 
mesmo instante, fazendo com que seja apenas molhada pelo material, 
não tendo a necessidade de deixar um tempo maior em contato. 
Para a verificação do resultado, coloca-se a fita ao lado da escala de 
cores que vem na caixinha desta, e faz-se a comparação. 
A análise de pH deve ser realizada entre 30 a 60 minutos após a 
coleta, devido reações que passam a ocorrer após esse tempo. 
 
2 
 
O SÊMEN 
 
- Líquido espesso, que adquire 
aspecto gelatinoso logo após a 
ejaculação, e em até 60min 
transforma-se em líquido fluído. 
- Volume: VR mínimo é 1,5mL; 
Se o valor obtido <1,5mL, significa 
quadro de hipospermia. 
-Cor: branco acinzentado e 
opalescente; 
Menos acinzentado: concentração 
de espermas for muito baixa; 
Marro avermelhada: hemorragia; 
Amarelado: icterícia; 
-Odor: característico de 
hipoclorito de sódio; 
Odor pútrido se houver processo 
bacteriano agudo. 
-pH: VR 7,2. 
Se <7,2, indica obstrução dos canais 
seminais, e se >8,2, indica problema 
de próstata. 
 
 
OUTRAS POSSÍVEIS PROVAS 
-Frutose; 
-Ácido Cítrico 
-Fosfatase Ácida 
- Cultura de Esperma 
-Anticorpos anti-espermatozoides 
 
SOLUÇÃO FORMALADA 1% 
 
Utilizar 60ml de solução fisiológica 
e 1,5ml de formol a 40%. 
Caso a solução de formol tenha 
concentração diferente de 40%, 
utilizar a fórmula: 
C1 x V1 = C2 x V2 
 
 
EXAME MICROSCÓPICO 
(DEVE SER REALIZADO PREFERENCIALMENTE DENTRO 
DA 1º HORA) 
 
PASSO 1 
Prova de Vitalidade Espermática: 
 Nesta etapa do exame faz-se a contagem relativa (%) de 
espermatozoides vivos e mortos, por isso deve ser realizada 
imediatamente após a liquefação (contando 100 espermatozoides). 
PROCEDIMENTO: 
Utiliza-se os seguintes materiais: lâminas, micropipeta 10 µL, ponteiras 
amarelas, corante de eosina amarela 5%, estufa, e óleo de imersão. 
 Colocar, em uma lâmina, 10 µL de esperma + 10 µL de eosina 
amarela (ou eosina nigrosina), misturá-las, esperar 30 segundos, e fazer 
o esfregaço. Feito isso, colocar a lâmina na estufa até que seque por 
completo, e realizar a análise no microscópio, utilizando óleo de 
imersão se for necessário, contando 100 espermatozoides, 
classificando-os como vivos/ mortos. 
 As células coradas em vermelho, serão as consideradas mortas; e as 
brancas, serão as vivas. 
VR: mais de 58% deverão estar vivos. 
PASSO 2 
Morfologia: 
Utiliza-se os seguintes materiais: lâminas, micropipeta 10 µL, ponteiras 
amarelas, corante hematológico, estufa, e spray fixador. 
 Confeccionar duas lâminas com esfregaço do esperma puro, e 
deixar na estufa até que seque completamente. Após completamente 
seco, borrifar o spray fixador, e novamente levar à estufa. Em seguida 
corar com corante hematológico, e realizar o exame microscópico. 
 Nesta etapa da análise, verifica-se a morfologia dos 
espermatozoides, contando os normais e os com alterações de forma 
(cabeça, pescoço ou calda), até que cheguem em 100 para o resultado 
relativo. 
VR: Morfologia normal > ou = 30%. 
PASSO 3 
Contagem Espermatozoides, Hemácias e Leucócitos: 
Utiliza-se os seguintes materiais: tubo cônico, câmara de Neubauer, 
lamínulas, micropipeta 100 e 10 µL, ponteiras amarelas e azuis, e salina 
formalada 1%. 
PROCEDIMENTO: 
 Em tubo cônico, diluir o esperma 1:40 em salina formalada 1%, 
homogeneizando-o bem. Com auxílio da micropipeta 10 µL, preencher 
 
3 
 
INSTRUÇÕES PARA COLETA DE 
ESPERMOGRAMA 
 
-O material deve ser coletado 
preferencialmente no Laboratório; 
- Caso o paciente não consiga 
realizar a coleta no laboratório, 
poderá colher em casa e 
encaminhas o material para o 
laboratório em <60min. 
- O paciente deverá estar em 
abstinência sexual (sem ter relações 
sexuais) por um período de no 
mínimo 2 dias e no máximo 7 dias; 
- Para controle pós- vasectomia 
não será necessário abstinência 
sexual; 
- Coletar todo o material dentro 
do frasco tendo o cuidado de não 
desprezar nada; 
- O material deverá ser coletado 
por masturbação e não poderá ser 
utilizado nenhum creme ou 
preservativo; 
- Entregar o material 
imediatamente após a coleta; 
- Caso o paciente tenha 
espermocultura, deverá ser colhido 
em frasco estéril; 
a câmara de Neubauer, e deixar repousar por 5 minutos. Após esse 
tempo, fazer a análise microscópica, contando o nº total de 
espermatozóides no quadrante central, multiplicando o resultado 
obtido por 400000. 
VR: Acima de 15 milhões de espermatozóides/mL. 
Oligozoospermia: <15.000.000/mL. 
Azoospermia: ausência de espermatozoides. 
 
 Para contagem por volume de quantidade por ejaculação, calcula-se 
o resultado dos espermatozoides/mL multiplicando pelo volume 
ejaculado para o exame (verificado em tubo cônico no exame 
macroscópico). 
VR: > ou = 39.000.000/ ejaculação. 
PASSO 4 
Motilidade: 
Utiliza-se os seguintes materiais: lâmina, lamínula, micropipeta 10 µL, e 
ponteira amarela. 
PROCEDIMENTO: 
Colocar uma gota de esperma entre lâmina e lamínula, e observar no 
microscópico com objetiva de 400x, fazendo uma contagem relativa 
classificando o tipo de movimento realizado pelos gametas, que são 
classificados da seguinte maneira: 
Tipo A: Se movem rapidamente para frente; 
Tipo B: Se movem lentamente para frente; 
Tipo C: Se movem, mas sem direção certa; 
Tipo D: Não se movem; 
VR: A > 25% ou A+B>/= 32%; 
Astenozoospermia: A+B <32% e A < 25%.

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