REPLICAÇAO DO DNAok (1)

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REPLICAÇAO DO DNA 
 
 DNA Polimerase: 
o Polimeriza nucleotídeos na direção 5’3’; 
o Só adiciona nucleotídeos com iniciador do primer  precisa de uma ext3‘ com 
grupo hidroxila (OH) para utilizar como âncora, já que sem ele não consegue 
catalisar a ligação do grupo fosfato do novo nucleotídeo a cada em síntese; 
o Apresenta atividade exonucleolítica (enzima de correção)  após add base 
errada, verifica que ext3’ com a base não pareia com iniciador (bloqueio da 
síntese), volta e remove a base criando uma ext3’OH livre para nova base; obs.: 
funciona apenas com ext3’OH livre; obs.: DNA pol apresenta dois sítios: um para 
edição e outro para polimerização; 
 
 
 Desoxirribonucleosídeos trifosfatos (DNTPs): necessários para adição de novas 
bases; obs.: 3P é quebrado para gerar a energia responsável pela ligação de um 
novo nucleotídeo; 
 Iniciador: sequência de RNA que irá parear com DNA, sendo estendido pela 
DNAPol; obs: um iniciador para fita contínua, e vários para descontínua; obs.: 
cerca de 10 nucleotídeos em eucariotos; 
 
 DNA primase: sintetiza os primers ou inciadores de RNA; 
 DNA ligase: remove iniciador de RNA e faz a ligação do fragmento de Okazaki; 
faz ligação fosfodiester utilizando mol de ATP para ativar a ext5 antes da 
formação da nova ligação; 
 
 
 
 
 
 
 
 DNA helicase: hidrolisa ATP para separar as fitas de DNA; 
 
 Ptns ligadoras de fita simples de DNA (SSB): auxiliam a helicase; estabilizam 
a conformação distorcida de fita simples estendendo-a; 
 
 Cinta deslizante: composta por várias ptns; responsável por manter a DNAPol 
firmemente associada ao DNA; 
 DNA topoisomerase: evita supertorção das fitas; clivagem reversível das 
ligações fosfodiester para que DNA consiga girar livremente; Topoisomerase I: 
cliva apenas uma fita; Topoisomerase II: cliva as duas fitas; 
 Forquilha de replicação: região de replicação ativa; 
 Fragmentos de Okazaki: fragmento de nucleotídeos adicionados na fita 3’5’, 
mas que também é polimerizado no sentido 5’3’; gera a fita descontínua; 
 Na forquilha: helicase abre dupla hélice com o auxílio das SSBs ptns  fita 
contínua é sintetizada pela DNAPol, após ligação de iniciador para seu começo 
 fita descontínua utiliza vários primers para que DNAPol faça síntese  DNA 
ligase substitui RNA por DNA e liga os fragmentos em uma fita contínua também. 
 
 REPLICAÇÃO EM PROCARIOTOS: 
 Uma origem  com sequencia específica que atrai ptns iniciadoras de replicação; 
 Sequencias origem precisam ter: sítio de ligação para ptn ORC (complexo de 
reconhecimento da origem); sequencia rica em A-T = fácil desnaturação; e sítio 
de ligação para ptns que auxiliam ligação da ORC; 
 DNA circular; 
 Forquilhas de replicação seguem em direções opostas; 
 
 REPLICAÇÃO EM EUCARIOTOS: 
 Várias origens  não são ativadas em conjunto pois dependem da localização 
(heterocromatina = replicação tardia; eucromatina = replicação mais rápida); 
 Forquilha mais lenta  DNA compactado na cromatina; forquilha em pares que 
formam a bolha de replicação; obs.: nucleossomos são descompactados para 
forquilha passar (complexo de remodelagem da cromatina) e são reformados 
novamente logo atrás dela; 
 Nucleossomo se forma logo atrás da forquilha  comprimento do fragmento de 
Okazaki é determinado pelo local em que a DNAPol é bloqueada por um 
nucleossomo recém-formado; formação de nucleossomos  ajuda de chaperonas 
de histonas; 
 Forquilhas também seguem em direções opostas; 
 Eucariotos também apresentam ptn ORC semelhante; 
 Replicação apenas durante fase S; 
 Para que a replicação em eucariotos ocorra  necessário que complexo pré-
replicativo (helicases prox ao ORC) se forme na fase G1, e que quinases 
fosforilem-o, ativando-o; fosforilação do complexo  helicases ativas  abertura 
da dupla hélice  outras ptns podem se associar; 
 
 
 Telômero: extremidade final existente nos cromossomos com sequencias 
repetitivas não codificantes  impedem o desgaste do material genético e mantem 
a estabilidade estrutural do DNA; 
 Durante a replicação, o último iniciador de RNA adicionado não consegue ser 
alongado e substituído porque não há ext3’-OH livre para DNAPol atuar  
sequencia especial é adicionada na extremidade dos cromossomos (telomero); 
 Na extremidade do cromossomo não há fragmento de Okazaki que forneça 
hidroxila necessária para DNAPol catalisar sua ligação, substituindo o primer 
com DNA; extremidade fita simples precisa ser protegida para que não seja 
reconhecida como dano ao DNA pelo sistema de reparos; 
 Possui tampa shelterina que esconde os telomeros dos detectores de lesões no 
DNA; 
 Telomerase reconhece essas sequencias repetitivas e as estende; em células 
somáticas humanas a produção da telomerase é desativada  telomeros não são 
mantidos e encurtam a cada divisão;