Avaliação I - Individual biologia molecular

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741)
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Prova 65698342
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 8/2
Nota 8,00
O sequenciamento de DNA permite a identificação de qual nucleotídeo ocupa cada posição na 
fita de uma molécula ou fragmento de DNA. As primeiras técnicas que permitiram sequenciar o DNA 
começaram a ser desenvolvidas na década de 70, com o método desenvolvido por Sanger. Sobre o 
método de Sanger, assinale a alternativa CORRETA:
A A técnica de Sanger, utiliza terminadores de sequência em réplicas de DNA de uma fita molde
diferenciada.
B Os didesoxinucleotídeos são similares aos primers ou iniciadores, já que iniciam a reação em
diferentes terminações 3'.
C
São utilizados iniciadores (primers), fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, ou seja, com a
mesma extremidade 5' e diferentes terminações 3', devido à inserção dos didesoxinucleotídeos,
que são nucleotídeos terminadores de cadeia (ddNTP: ddATP, ddTTP, ddCTP e ddGTP).
D Os didesoxinucleotídeos são ineficazes para a técnicas de Sanger, sendo utilizados somente os
primers e diversas fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, com a mesma extremidade 5'.
O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA permitem a manutenção e replicação do material 
genético em grandes coleções mantidas em colônias de bactérias, nas quais um fragmento específico 
de DNA ou um gene podem ser procurados. Sobre as bibliotecas de DNA e cDNA, avalie as asserções 
a seguir e a relação proposta entre elas:
I- A bactéria E. coli é a principal célula hospedeira utilizada no processo de clonagem em vetores, 
inclusive na construção de bibliotecas de DNA e cDNA, em que cada bactéria irá internalizar apenas 
um vetor.
 
PORQUE
II- Assim que o vetor é inserido, em condições adequadas de diluição e meio de cultivo, em poucas 
horas corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, sendo cada um encontrado em 
uma colônia diferente de crescimento bacteriano.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições falsas.
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O qPCR (PCR em tempo real) utiliza corantes fluorescentes ou sondas específicas, que emitem 
fluorescência quando se encontram ligados ou intercalados à fita de DNA no meio de reação da PCR. 
Considerando esse fator, a fluorescência, é proporcional à quantidade de material disponível para 
iniciar a amplificação. Sobre os parâmetros para quantificação do qPCR, avalie as asserções a seguir e 
a relação proposta entre elas:
I- O threshold, também conhecido como linha de corte, demonstra o momento em que a fluorescência 
apresentada está livre de ruídos, sendo essencialmente a representação da amplificação da amostra 
teste.
PORQUE
II- O equipamento é capaz de determinar em que momento a fluorescência detectada é proveniente 
apenas das amostras que estão sendo amplificadas e, assim, determinar a linha de corte.
Assinale a alternativa CORRETA:
A A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
B As asserções I e II são proposições falsas.
C As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica dependendo 
da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, que são mais robustas e 
sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, demonstram um excelente resultado, 
apesar de serem mais complicadas e menos automatizadas. Sobre essas técnicas, associe os itens, 
utilizando o código a seguir:
I- Sequenciamento de Sanger. 
II- Next Generation Sequencing. 
III- Sequenciamento de terceira geração.
( ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de cadeia 
(ddNTP).
( ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula de DNA, 
sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real.
( ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia para o 
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processamento das amostras.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - II - III.
B III - II - I.
C I - III - II.
D II - I - III.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da prática, os 
ácidos nucleicos apresentam características estruturais específicas, que permitem que sejam isolados e 
manipulados para diversos tipos de aplicações. A técnica de hibridização in situ, por exemplo, baseia-
se na complementaridade das fitas de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a detecção 
da fita complementar em uma determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da expressão 
gênica. Outra técnica, que também tem o mesmo princípio e finalidade, é a reação em cadeia da 
polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada no diagnóstico de algumas infecções e 
doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das técnicas citadas é o 
isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O processo de extração do DNA pode ser 
dividido em etapas. 
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool 96% no
eppendorf, homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin. 
B O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.
C Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.
D A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K, 20 µl da
amostra e 20 µl do tampão de lise S.
O PCR produz uma série de cópias de um determinado fragmento de DNA ou cDNA de uma 
maneira bastante rápida e eficiente. No entanto, de acordo com o seu objetivo de pesquisa, a PCR 
qualitativa ou quantitativa se torna mais eficaz para fornecer os resultados esperados. De acordo com 
essas duas técnicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A PCR qualitativa indica a presença de um fragmento específico de DNA ou cDNA em uma 
amostra, mas não indica quanto do gene está expresso na amostra. 
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( ) A qPCR é conhecida como PCR em tempo real (quantitativa) e fornece informações precisas 
relativas à quantidade de expressão de um gene. 
( ) A PCR qualitativa necessita de um termociclador específico capaz de quantificar a amplificação 
dos fragmentos de DNA ao final de cada ciclo em tempo real. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - F - V.
B V - V - F.
C F - V - F.
D V - F - F.
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática 
depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação 
(período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o 
momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia 
de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de 
base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre 
porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta 
apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de 
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão,outros fatores podem 
interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:
I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a opção III está correta.
B Somente a opção II está correta.
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C As opções I, II, III e IV estão corretas.
D Somente a opção I está correta.
A clonagem de DNA se refere à produção, dentro de uma célula, de diversas cópias de uma 
sequência específica de um fragmento de DNA. Sobre o exposto, avalie as asserções a seguir e a 
relação proposta entre elas:
I- A clonagem de DNA depende da utilização de um vetor, do fragmento de DNA e, posteriormente, 
de um organismo hospedeiro.
PORQUE
II- O fragmento de DNA de interesse, será inserido em uma molécula de DNA genômico com 
capacidade de autorreplicação (DNA do vetor), originando o DNA recombinante. Essa inserção se dá 
através de enzimas de restrição e enzimas de ligação. 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições falsas.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
O RNA é uma molécula muito semelhante ao DNA, originado a partir do processo de 
transcrição, em que carrega informações contidas no DNA para fora do núcleo. Essas informações, 
darão origem à síntese de proteínas, através do processo de tradução. Sobre o RNA, assinale a 
alternativa CORRETA:
A O RNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela desoxirribose, nucleotídeos e fosfato.
B O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, citosina e
guanina.
C O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pela pentose denominada como ribose; os
nucleotídeos adenina, uracila, citosina e guanina e fosfato.
D O RNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina.
Com o desenvolvimento das técnicas de clonagem de DNA, tornou-se possível a construção de 
bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa CORRETA:
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A As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas de
restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA.
B A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos de DNA,
incluindo o não codificante.
C Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido.
D As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que
posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa.
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