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Estudo Dirigido 4: Cultivo e Crescimento Microbianos. 
Com base no capítulo 6 do livro Microbiologia Tortora 10 ed, responda as seguintes 
questões. 
NOME: José Carlos Resende Rodrigues 192650014 
1) Como é medido o crescimento bacteriano? O que é tempo de geração? Que 
condições podem aumentar ou diminuir o tempo de geração bacteriano? 
Pode-se medir o crescimento bacteriano por meio de métodos como a montagem de 
placas, o número mais provável (MNP), a contagem microscópica direta. Também é 
possível de se medir de forma indireta a partir da atividade metabólica da população 
bacteriana e da medição do peso seco, em organismos filamentosos 
Entende-se o tempo de geração como o tempo requerido para uma célula se dividir ou 
uma população bacteriana duplicar de tamanho. Esse tempo pode variar 
consideravelmente entre os organismos e com as condições ambientais, como a 
temperatura. 
2) O que são meios de cultura? Em que situações são utilizados? Qual o tipo de meio 
de cultivo mais utilizado? O que deve conter um meio de cultivo? Com que finalidade 
acrescentamos sangue, BHI, extrato de levedura, glicose ou outro aditivo em um meio 
de cultivo? 
O meio de cultura consiste em qualquer material nutriente preparado para o 
crescimento de micro-organismos no laboratório. Essa técnica é usada para detectar a 
presença de micro-organismos específicos associados com doenças ou saneamento 
deficiente bem como para monitorar o crescimento/desenvolvimento de determinado 
microrganismo. O meio mais utilizado é o ágar. 
Um meio de cultura deve conter nutrientes adequados para o microrganismo cultivado, 
quantidade de água suficiente, um pH apropriado e um nível conveniente de oxigênio 
ou nenhum. Além disso, deve ser um meio estéril e incubado em temperatura 
apropriada. Ao adicionar outro aditivo em um meio de cultivo tem-se a finalidade de 
identificar quais tipos específicos de micro-organismos estão presentes. 
3) O que são meios de cultivo quimicamente definidos? Quando são aplicados? 
Os meios de cultivo quimicamente definidos são aqueles cuja composição exata é 
conhecida. Esse meio é aplicado quando a cultura necessita de fontes de energia 
específicas, as quais os microrganismos são incapazes de sintetizar, assim pode-se 
mensurar a influência de determinado nutriente no crescimento bacteriano. 
4) Explique o que é temperatura mínima, temperatura máxima e temperatura ótima 
de crescimento. A temperatura ótima de crescimento é mais próxima da temperatura 
máxima do que da temperatura mínima. Por que? Explique cada grupo microbiano de 
acordo com sua temperatura ideal de crescimento. 
Corresponde como temperatura mínima à menor temperatura, na qual a bactéria pode 
crescer. A temperatura ótima é aquela em que o desempenho de crescimento 
bacteriano é o melhor possível, enquanto a temperatura máxima é o limite de 
temperatura, a qual as bactérias ainda podem se multiplicar. 
A temperatura ótima de crescimento tende a ser deslocada próxima a temperatura 
máxima, pois dentro do espectro de crescimento ótimo, quanto maior a temperatura 
mais ativas as enzimas bacterianas se tornam, até atingir um máximo, em que se 
desnaturam. 
Em relação as temperaturas, os grupos bacterianos podem ser segmentados como 
psicrófilos, mesófilos e termófilos. Os psicrófilos são capazes de crescer a 0 ºC e possuem 
temperatura ideal de aproximadamente 15ºC, algumas entre 20 a 30ºC. Os mesófilos, 
incluem a maioria dos organismos patogênicos e deteriorantes, e possuem temperatura 
ótima de crescimento entre 25 a 40ºC. Já os termófilos, são organismos cuja 
temperatura ideal está entre 50 a 60 ºC. 
5) Qual a diferença entre bactérias halofílicas facultativas e halofílicas obrigatórias? O 
que acarreta o crescimento bacteriano em stress osmótico? 
Bactérias halofílicas vivem em ambientes com elevadas concentrações de sais. As 
halofílicas obrigatoriamente necessitam da presença de sais para o seu 
desenvolvimento. Entretanto, as halofílicas facultativas não requerem concentrações 
elevadas de sal para crescer, porém são capazes de crescer em concentrações de até 2% 
de sal, o que inibe o crescimento de muitos organismos. 
Algumas espécies podem tolerar até 15% de sal. O crescimento bacteriano em stress 
osmótico é inibido, observado que a perda ou o ganho de água celular causa plasmólise 
ou lise da célula. 
Ademais, as bactérias halofílicas possuem estratégias para prevenir a dessecação 
através circulação osmótica de água para fora do seu citoplasma. Os lipídios também 
são importantes para fornecer resistência a salinidade extremam, adaptados a 
membrana, que por sua vez, têm o caráter de permeabilidade de sódio em altas 
concentrações de sal. 
6) Explique a relação do pH com o crescimento microbiano. Quais os microorganismos 
mais exigentes com relação ao pH? Quais os mais tolerantes? O que são 
microrganismos acidófilos? O que são micro-organismos acidogênicos? 
Para o crescimento microbiano máximo é necessário um pH ótimo, que é, 
aproximadamente, o meio do intervalo onde o crescimento ocorre, entre o pH máximo 
e mínimo. O aumento ou diminuição do pH leva a uma diminuição da taxa de reações 
químicas devido à destruição das enzimas celulares e, por conseguinte afeta a taxa de 
crescimento bem como a sobrevivência do microrganismo. Diferentes espécies de 
microrganismos têm diferentes tolerâncias ao pH, refletindo na adaptação do 
organismo ao seu ambiente natural. As bactérias são organismos mais exigentes em 
relação ao pH. Já os fungos e as leveduras crescem em uma faixa maior de pH. 
Organismos acidófilos são aqueles resistentes à acidez e os acidogênicos são 
microrganismos que produzem ácidos. 
7) Explique cada grupo de microrganismo quanto a sua resposta ao oxigênio gasoso. 
Quais grupos possuem mecanismos de proteção contra o oxigênio molecular? 
Os grupos quanto resposta ao oxigênio gasoso são os aeróbicos obrigatórios, os 
anaeróbicos facultativos, os anaeróbicos obrigatórios, anaeróbicos aerotolerantes e os 
microaerófilos. 
• Aeróbicos obrigatórios: o crescimento bacteriano só ocorre em ambientes com 
presença de oxigênio. 
• Anaeróbicos facultativos: podem utilizar o oxigênio quando ele está presente, mas são 
capazes de crescer utilizando apenas a fermentação ou a respiração anaeróbica quando 
o oxigênio não está disponível. 
• Anaeróbicos obrigatórios: bactérias incapazes de utilizar o oxigênio molecular para as 
reações produtoras de energia, não há crescimento bacteriano na presença de oxigênio. 
O oxigênio molecular é tóxico a essas espécies. 
• Anaeróbicos aerotolerantes: bactérias que não utilizado oxigênio para seu 
crescimento, porém o toleram bem. 
• Microaerófilos: microrganismos que crescem onde há uma concentração baixa de 
oxigênio difundido, menor que a do ar atmosférico; 
Em relação aos mecanismos de proteção contra oxigênio molecular são os aeróbicos 
obrigatórios, aeróbicos facultativos e anaeróbicos aerotolerantes. 
8) Qual a vantagem de ser capaz de utilizar o oxigênio molecular? Que microrganismo 
você espera que cresça mais rapidamente em condições de aerobiose: Um 
aerotolerante ou um microrganismo aeróbio? Por que? 
Observa-se a vantagem nos organismos que utilizam oxigênio molecular de produzir 
mais energia a partir dos nutrientes que os microrganismos que não utilizam o oxigênio. 
Espera-se que um micro-organismo aeróbico cresça mais rápido que um aerotolerante, 
visto que o aerotolerante não pode utilizar o oxigênio para o crescimento. 
9) Explique quais as técnicas especiais que devem ser aplicadas no cultivo de 
microorganismos anaeróbios estritos. 
Para cultivo de microorganismos anaeróbicos estritos deve ser aplicada a técnica 
especial como, o uso de uma câmara anaeróbica, preenchida com um gás inerte livre de 
oxigênio e equipada com sistemas de transferência para a introdução e a retirada de 
culturas e materiais.10) Defina meio seletivo e meio diferencial e imagine uma situação em que você deva 
utilizar cada um destes meios de cultivo. Dê um exemplo de meio de cultivo seletivo, 
de um meio diferencial e de um seletivo/diferencial, explicando o funcionamento do 
meio. 
O Meio seletivo consiste em meios elaborados para impedir o crescimento de bactérias 
indesejadas e favorecer o crescimento dos micro-organismos de interesse. Como 
exemplo temse o uso de ágar sulfeto de bismuto que é um meio utilizado para isolar a 
bactéria da tifoide, a gram-negativa Salmonella typhi, a partir das fezes. Já o meio 
diferencial facilita a diferenciação das colônias de um microrganismo desejado em 
relação a outras colônias crescendo na mesma placa. Um exemplo disso é o uso do ágar 
sangue, meio utilizado com frequência pelos microbiologistas para identificar espécies 
bacterianas que destroem hemácias, como o Streptococcus pyogenes, a bactéria que 
causa infecção de garganta. 
Além disso, as características seletivas e diferenciais podem ser combinadas no mesmo 
meio, como exemplo tem-se o meio ágar hipertônico manitol onde as bactérias nas 
colônias são capazes de fermentar o manitol do meio em ácidos, permitindo a uma 
mudança na coloração. Esse meio também é seletivo por causa da alta concentração de 
sal que previne o crescimento da maioria das bactérias.