Roteiro de Laboratorio - PB

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Disciplina: Processos Biológicos 
 
 
ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 
Princípios de Microscopia, Coloração e Análise de Células da Mucosa Oral e Mitose na raiz 
de cebola 
 
I. Introdução: 
A palavra microscópio é de origem grega (micros =pequeno, scopein =observar, olhar com atenção). Trata-se 
de instrumento óptico que amplia a imagem de um pequeno objeto utilizando um sistema de lentes e fontes de 
iluminação. 
O microscópio é um instrumento utilizado para ampliar, através de uma série de lentes, estruturas impossíveis 
de serem observadas a olho nu. Constituído por uma parte mecânica, que serve de suporte, e uma parte óptica, 
que é constituída por três sistemas de lentes: condensador, objetiva e ocular. A ampliação total dada por um 
microscópio é igual ao aumento da objetiva multiplicado pelo aumento da ocular. 
II. Objetivos: 
- Identificar componentes das partes mecânica e óptica do microscópio óptico. 
- Calcular a ampliação total obtida por cada objetiva, a partir da observação de células da mucosa oral. 
III. Atividades: 
 III. a. Identificar os componentes das partes mecânicas do microscópio: 
• Base ou pé: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras partes do aparelho. 
• Braço ou coluna: peça que liga o pé à parte superior do microscópio. 
• Mesa ou Patina: peça de apoio da lâmina contendo o material para estudo, no centro da mesa existe 
um orifício para a passagem da luz. 
• Charriot: peça ligada à platina que permite movimentar a lâmina no plano horizontal da esquerda 
para a direita e vice-versa, e de trás para frente e vice-versa. 
• Parafuso macrométrico: localiza-se em ambos os lados do braço, serve para ajustar o foco 
grosseiramente através de avanço ou recuo da mesa em relação à objetiva. 
• Parafuso micrométrico: ajusta o foco finamente através de pequenos avanços ou recuos da mesa. 
• Tubo ou Canhão: parte superior do microscópio constituída por um tubo contendo um prisma. 
Sustenta lentes objetivas e oculares, e serve para focalização do material. 
• Revolver ou Tambor: peça onde se encaixam as lentes objetivas. É composto por um disco de ranhuras 
que permite a mudança das objetivas. 
 
III. b. Identificar os componentes das partes ópticas do microscópio: 
 
 
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• Condensador: conjunto de lentes situado abaixo da platina que concentra a luz e fornece iluminação 
uniforme à preparação biológica. 
• Diafragma: regula a intensidade de luz que atinge a preparação através de uma alavanca para sua 
abertura ou fechamento. 
• Objetivas: conjunto de 4 ou mais lentes superpostas que proporcionam aumentos diferentes para 
observação do material. O valor do aumento está gravado na objetiva. 
• Oculares: possui 2 lentes convergentes que ampliam e corrigem os defeitos da imagem. O valor do 
aumento proporcionado está gravado na ocular. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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III.c. Preparação das lâminas Mucosa Oral 
Materiais: 
- Swab 
- Lâminas e lamínulas de microscopia. 
- Solução de azul de metileno (0,5%) 
- Microscópio 
 
 Procedimento: 
- Raspar levemente com o swab, a parte interna lateral da bochecha. Faça esse processo 
delicadamente, sem agredir e nem machucar a mucosa. 
- Passe o swab na lâmina, de forma a depositar o material na superfície da mesma. - - Aperte o swab 
contra a lâmina no sentido do comprimento, para deixar o “esfregaço” homogêneo. 
- Deixe secar por 5 – 10 min. 
- Ao verificar que o esfregaço está seco, inicie a coloração. 
- Instilar uma gota da solução de azul de metileno; 
- Cobrir com uma lamínula (aproxime a lamínula, e toque a lâmina em um ângulo de 45o, então solte 
a lamínula delicadamente sobre o corante (sem apertar). Se necessário, aproximar um papel 
absorvente das bordas para retirar o excesso de solução. 
- Analisar ao microscópio em diferentes aumentos. 
 
IV. Elaboração de um relatório