Relatório Bioquímica caracterização de aminoácidos e proteínas

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LEANDRA SINARA DE OLIVEIRA
MATRICULA: 2897783
BIOMEDICINA TURMA: BBl0344/2
BIOQUÍMICA BÁSICA E METABOLISMO
ISAC SOUZA SILVA RODRIGUES
CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS
REAÇÃO DE NINIDRINA E BIURETO
VIRTUALAB UNIASSELVI
SEMIPRESENCIAL EAD
2°SEMESTRE
SACRAMENTO – MG 16/09/2020
1 INTRODUÇÃO 
 Aminoácidos assim como as proteínas são compostos químicos orgânicos que desempenham inúmeras funções. Dentre as macromoléculas, as proteínas são as mais abundantes, com estruturas e funções bastante diversificadas. Atuam desde a constituição dos tecidos até a síntese hormonal.
 Há centenas de proteínas em uma única célula, no entanto todas se originam de cadeias de aminoácidos que contém um carbono central ligado a um hidrogênio e aos grupos funcionais amina (base) e ácido carboxílico (ácido), além de uma cadeia lateral R que varia conforme a classificação do aminoácido.
 Os aminoácidos podem ser ácidos e básicos ao mesmo tempo, dependendo do meio e ao processo do qual são submetidos, conferindo a eles caráter Anfótero. Aminoácidos principais são os que estão presentes no código genético, são apenas vinte. Estes vinte principais são classificados como essenciais e não essenciais, sendo os essenciais, aqueles que precisamos ingerir na alimentação pois o organismo não o sintetiza, enquanto que os não essenciais são sintetizados naturalmente durante os processos bioquímicos no organismo humano. 
 
 As proteínas são fundamentais em todos os processos biológicos, estruturam as célula, são chamadas de polímeros formados por unidades monoméricas de aminoácidos unidos por ligações peptídicas em combinações variadas e quase infinitas, formando milhões de estruturas.
 No estudo realizado em experimento foram analisados os efeitos da ninidrina durante a reação em dois tipos de aminoácidos: a prolina e o triptofano. Para identificar a presença de aminas na solução é usado a ninidrina em um processo com aquecimento, onde é revelado como resultado a coloração púrpura indicando assim aminas na solução e também diferenciar os aminoácidos normais dos imonoácidos.
 No experimento com o reagente biureto foram analisadas a presença de peptídeos, mostrando como resultado uma solução de coloração violeta pelo contato com as proteínas.
2 OBJETIVO
 Identificar através de experimentos bioquímicos com reagentes como a ninidrina e o biureto a presença de aminas livres e pepitídeos em soluções. 
Observar e compreender as reações que os reagentes revelam, encontrar evidência que mostre a presença de um aminoácido e de uma proteína ou como se comportam no calor e na presença dos reagentes através da mudança na coloração da solução biológica.
 No final deste experimento, foi revelado:
A presença de aminoácidos através da reação de ninidrina;
 A diferença entre aminoácidos de iminoácidos;
 Caracterizar a presença de proteínas através da reação de biureto.
3 MATERIAIS
Segurança:
Jaleco;
Luvas;
Óculos;
Para Reação de Ninidrina:
 02 Béqueres
 02 Tubos de ensaio 
 02 pipetas com pera
Soluções Biológicas:
Solução de Prolina
Solução de Triptofano
Solução Reagente de Ninidrina
Equipamento
Banho-maria com termostato
Materiais para reação de Biureto:
04 Béqueres
04 Pipetas com pera
03Tubos de ensaio
01 Pisseta
Soluções Biológicas:
Solução de Albumina: 2ml
Solução de Prolina: 2ml
Solução Reagente de Biureto: 2ml
Água destilada: 2ml
4 METODOLOGIA 
Passo a passo na reação de Ninidrina:
-Conheci o laboratório, os recursos disponíveis, li sobre o experimento e soube qual o resultado eu deveria esperar. Li o guia de utilização para melhor entendimento antes de iniciar o experimento.
-Vesti o equipamentos de EPIs, jaleco, luvas, óculos de proteção e máscara oronasal, abri e fechei o armário de EPIs.
- Coloquei os materiais na bancada, os béqueres. Os tubos de ensaio já estavam sobre a mesa. Abri e fechei a gaveta de vidraria.
- Coloquei a solução de Prolina no béquer 1 até a metade da vidraria e guardei o frasco de prolina na prateleira.
- Coloquei a solução de Triptofano no béquer 2 até a metade da vidraria e guardei o frasco de Triptofano na prateleira.
- Retirei a pipeta do suporte, atenta que cada pipeta seria utilizada em uma solução. Apertei a pera, suguei usando a válvula S da pipeta 1ml da solução de Prolina no béquer 1.
-Movi a pipeta para o tubo de ensaio 1 e despejei a solução de Prolina usando a válvula E da pipeta. Guardei a pipeta usada no suporte.
- Agora usei a segunda pipeta no béquer 2, apertei a pera, suguei 1ml da solução de Triptofano usando a válvula S da pipeta, movi até o tubo de ensaio 2 e despejei a solução de Triptofano usando a válvula E da pipeta. Guardei a pipeta usada no suporte.
- Usando a solução de Ninidrina que já estava sobre a bancada, movi e pinguei 5 gotas no tubo de ensaio 2 e 5 gotas no tubo de ensaio 1. Deixei o frasco de Ninidrina fechado novamente sobre a bancada.
- Ao acrescentar a Ninidrina nos tubos, homogeneizei cada tubo de ensaio para misturar a solução e ocorrer a reação.
- Observei as reações nos tubos após a Ninidrina e fiz anotações.
- Na sequência usei um meio externo como fonte de calor para observar se iria ocorrer uma reação química, usei o banho-maria.
- Liguei o banho-maria e coloquei a temperatura em 95°.
- Movi os dois tubos de ensaio para o banho-maria e aguardei 2 minutos.
- Movi cada tubo para o suporte, desliguei o banho-maria.
-Observei a reação que ocorreu nos tubos de ensaio após a associação do calor e fiz anotações.
5 FOTOS DO EXPERIMENTO DE NINIDRINA
 
Imagem 1 – Despejando Triptofano no béquer 2
Imagem 2 – Gotejando ninidrina no tubo de ensaio 2 
 
Imagem 3 - Reação após homogeneizar os tubos de prolina e triptofano com 05 gotas de ninidrina.
Imagem 4 – Tubos de ensaio com Prolina e Triptofano no banho-maria, esperando reação na coloração após ação do calor por 2 minutos em 95graus. 
Imagem 5 – Após retirar do banho-maria os 2 tubos de ensaio, a tonalidade da reação se alterou. O tubo com a prolina/ ninidrina que não havia reagido, com a presença do calor ficou amarelo e o tubo com Triptofano/ninidrina que já havia reagido em tom de lilá claro, ficou lilás mais forte.
QUESTÕES SOBRE O EXPERIMENTO REAÇÃO DE NINIDRINA
A) O que houve com os fluídos contidos nos tubos de ensaio 1 e 2 após homogeneizar seus conteúdos? Justifique.
 No tubo com Prolina e ninidrina não houve reação na mudança de cor, a Prolina não reage com a ninidrina por ser uma amina secundária e não uma amina livre primária. No tubo com Triptofano a coloração mudou pra Púrpura de Ruhemann claro.
B) - O que houve nos fluídos contidos nos tubos de ensaio 1e 2 após passarem alguns minutos no banho-maria? Justifique.
 No tubo de ensaio com prolina e ninidrina a reação química mudou a coloração para amarelo, a prolina possui uma estrutura quimicamente coesa e rígida, sendo um dos aminoácidos codificados pelo código genético, sua estrutura anelar lhe confere ainda a classificação de imonoácido. No tubo com Triptofano e ninidrina a reação mudou a coloração para roxa-azulada ou seja, Purpura de Ruhemann. A reação se fez pelo Triptofano possuir aminas livres em sua cadeia, amina primária.
6 METODOLOGIA REAÇÃO DE BIURETO
 Passo a passo da reação de biureto:
-Conheci o laboratório, os recursos disponíveis, li sobre o experimento, sumário e roteiro, soube qual o resultado eu deveria esperar. Li o guia de utilização para melhor entendimento antes de iniciar o experimento.
-Vesti o equipamentos de EPIs, jaleco, luvas, óculos de proteção e máscara oronasal, abri e fechei o armário de EPIs.
- Coloquei os materiais na bancada: os béqueres, os tubos de ensaio já estavam na bancada, no suporte, assim como, as pipetas. Abri e fechei a gaveta de vidrarias.
- A primeira solução que usei foi a Albumina, despejei até a metade da graduação do béquer 1 e guardei o frasco fechado na prateleira.
-A segunda solução que usei foi a Prolina, despejei até a metade da graduação do béquer 3 e guardei o frascona prateleira.
- A terceira solução que usei foi o Biureto, despejei até a metade da graduação do béquer 4 e guardei o frasco na prateleira.
- Na bancada tem uma pisseta com água destilada, despejei até a metade da graduação do béquer 2 e coloquei a pisseta de volta sobre a bancada.
-Usei as pipetas seguindo a ordem da esquerda para a direita, sabendo que sempre devo usar uma pipeta para cada solução específica.
-Movi a primeira pipeta para o béquer 1, apertei a pera, suguei 2ml da solução de Albumina usando a válvula S.
-Movi a pipeta para o tubo de ensaio 1 e despejei a Albumina no tubo usando a válvula E. Guardei a pipeta no suporte.
-Movi a segunda pipeta para o béquer 2, apertei a pera, suguei 2ml de água destilada usando a válvula S.
-Movi para o tubo de ensaio 2 e despejei a água destilada no tubo usando a válvula E. Guardei a pipete no suporte.
-Movi a terceira pipeta para o béquer 3, apertei a pera, suguei 2ml de Prolina usando a válvula S.
-Movi a pipeta para o tubo de ensaio 3, despejei toda a Prolina no tubo usando a válvula E. Guardei a pipeta no suporte.
-Preenchi os três tubos de ensaio com soluções específicas e coloquei a solução reagente de Biureto em cada tubo da seguinte forma:
- Movi a quarta pipeta para o béquer 4, apertei a pera, suguei 2ml de Biureto usando a válvula S.
-Movi a quarta pipeta com Biureto para o tubo de ensaio 1 e despejei a solução no tubo usando a válvula E. 
- Movi a pipeta para o béquer 4 novamente e suguei 2ml de Biureto usando a válvula S.
-Levei a pipeta ao tubo de ensaio 2 e despejei o Biureto no tubo usando a válvula E. 
-Movi a pipeta para o béquer 4, suguei 2ml de solução de Biureto usando a válvula S.
-Levei a pipeta ao tubo de ensaio 3 e despejei o Biureto no tubo usando a válvula E.
-Movi a quarta pipeta para o suporte.
-Nesta etapa os três tubos de ensaio continham:
Tubo de ensaio 1 com 2ml de Albumina e 2ml de Biureto
Tubo de ensaio 2 com 2ml de água destilada e 2ml de Biureto
Tubo de ensaio 3 com 2ml de Prolina e 2ml de Biureto
- Homogeneizei cada tubo de ensaio para ficar bem misturadas as soluções e ocorrer as reações esperadas.
-Observei as reações e fiz anotações.
7 FOTOS DA REAÇÃO DE BIURETO
Imagem 1- Preparando os quatro béqueres com as soluções, na foto despejando água destilada no béquer 2.
Imagem 2 – Pipetando albumina do béquer 1 para o tubo de ensaio 1
Imagem 3 - Pipetando 2 ml de biureto no béquer 4 para colocá-lo nos tubos de ensaio
Imagem 4 - Colocando o reagente biureto nos tubos de ensaio, na foto 4 despejando 2ml de biureto na albumina, tubo 1.
Questões sobre o experimento de reação com Biureto:
A) O que houve com os fluídos contidos nos tubos de ensaio 1,2 e 3 após eles serem homogeneizados? Justifique
 O Biureto é um reagente analítico, composto de Hidróxido de sódio e Sulfato de cobre. A reação com biureto é detectar a presença de ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos.
Tubo de ensaio 1 = 2 ml de Albumina + 2 ml de Biureto: Apresentou coloração púrpura porque a albumina possui proteínas com ligações peptídicas.
Tubo de ensaio 2 = 2 ml de Água destilada + 2 ml de Biureto: Coloração azul muito pálida que é a cor do biureto, a água não contém proteínas na composição.
Tubo de ensaio 3 = 2 ml de Prolina + 2 ml de Biureto: Coloração clara, a prolina 
 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Livro virtual Bioquímica básica e Metabolismo Uniasselvi
Laboratório – Caracterização de Aminoácidos e proteínas - Sumário
Laboratório – Caracterização de Aminoácidos e proteínas - Roteiro
https://www.docsity.com/pt/desnaturacao-proteica-reacao-de-biureto-e-ninhidrina/4707108/
https://pt.slideshare.net/MauroPerezCG/aula-prtica-reaes-qualitativa-par-aminocidos-e-protenas