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Regulação da expressão gênica em procariotos Genoma dos procariotos O genomas desses seres é um DNA dupla fita e circular, sendo um cromossomo único (genoma haplóide) e qualquer mutação será expressa. Além disso, o genoma é menor que o dos eucariotos e praticamente todo o genoma é codificante ou tem função reguladora, bem como o genoma é compactado (sobreposição de genes - uma sequência codifica 2 proteínas diferentes). Ademais, o genoma procarioto tem uma quantidade quase nula de íntrons, o qual o tamanho do gene = tamanho da proteína (a sequência de nt/3 = sequência de aa). Por fim, as bactérias apresentam unidades genéticas acessórias que ficam de fora do DNA, como os plasmídeos, capazes de mediar sua própria transferência para outras bactérias. Os plasmídeos são elementos genéticos extra cromossômicos com capacidade de auto replicação, DNA dupla fita circular de 1-1000 kb. Como função, ele apresenta genes de virulência, bactericidas, resistência a antibióticos e para conjugação. Operons O genoma bacteriano apresenta operons, que são unidades transcricionais, ou seja, genes em posições adjacentes que compartilham o mesmo promotor e são transcritos como unidade (criação do mRNA policistrônico a qual será traduzido); os produtos dessa unidade apresentam funções relacionadas e compõem a mesma via metabólica. Para o processo de transcrição de operons, pode-se apresentar dois tipos de genes: ● Genes estruturais: também chamados de constitutivos, transcrevem proteínas e RNAs que dão sustentação ao que a célula precisa, eles são expressos constantemente. ● Genes regulatórios: genes que regulam a expressão dos genes estruturais. OBS! O gene regulatório dos procariotos fica bem perto do seu gene estrutural e, em algumas situações, no mesmo operon. OBS! Exemplo: a regulação da E. coli para que ela faça respiração aeróbia ou fermentação é por meio da expressão de genes regulados. Sendo assim, esses operons tem certas regiões: 1. Gene regulador (não fica distante do óperon): codifica proteínas reguladoras, que controlam a expressão dos genes estruturais de um óperon; a. Proteína Reguladora Ativadora: estimula a transcrição (proteína positiva) b. Proteína Reguladora Repressora: inibe a transcrição (proteína negativa) 2. Promotor: sítio de ligação da RNA polimerase 3. Indutor: agente ambiental que desencadeia a transcrição do operon 4. Operador: sítio de ligação da proteína ativadora/repressora, que permite/impede a ligação da RNA polimerase ao promotor 5. Genes estruturais: genes codificantes Logo, esse controle pela proteína reguladora pode ser de dois tipos: ● Controle negativo: prot. reguladora é repressora, ligando-se ao DNA e inibindo a transcrição. ● Controle positivo: prot. reguladora é uma ativadora, estimulando a transcrição. Ademais, os operons podem ser classificados de dois tipos: ● Operons induzíveis: transcrição normalmente está desligada e algo precisa acontecer para induzir (ligar) a transcrição; ● Operons reprimíveis: a transcrição está normalmente ligada e algo deve acontecer para reprimir (desligar) a transcrição. Óperon induzível negativo(pois a prot. quando se liga ao operador inibe a transcrição) Óperon reprimível(normalmente ligada) negativo(quando a prot. reguladora se liga ao operon inibe a transcrição). Óperon induzível positivo Óperon reprimível positivo OBS! Essa regulação de genes serve para economia de energia, a fim de evitar que a célula produza substâncias desnecessárias. Óperon lac É um óperon induzível negativo relacionado ao metabolismo da lactose na bactéria E. coli; o qual, quando a bactéria tem disponibilidade de lactose no meio, ela ativa esse óperon para a sua metabolização em glicose + galactose. O óperon lac tem 3 principais genes estruturais: ● LacZ: produz a permease, que transporta lactose para o interior da célula ● LacY: produz a beta-galactosidase, a qual cliva a lactose em glicose e galactose ● LacA: produz a transacetilase, não há comprovação do seu efeito (talvez retire os metabólitos desse processo) OBS! Nas imagens é perceptível que a lactose entra na célula (mesmo sem a transcrição da permease) e serve como indutor da proteína reguladora para inativá-la; Então, vale ressaltar que mesmo com a proteína repressora ativada, ocorre ainda uma pequena transcrição do Óperon lac, possibilitando a entrada da lactose e a sua conversão em alolactase para a inativação da proteína reguladora. Além disso, é necessário uma outro processo para ativar a expressão do óperon lac, que é por meio da ligação da enzima CAP (Proteína Catabólica Ativadora), junto com o cAMP, a outro sítio do óperon lac em situações de níveis muito baixos de glicose. Já quando a glicose aumenta de concentração, há menor [cAMP] e menos chances dele se ligar ao CAP. Essa inativação do metabolismo de outros açúcares é chamado de repressão catabólica Sendo assim, o resumo da expressão do Óperon lac está resumido a seguir:
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