Qual o princípio da técnica de citometria de fluxo

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1. Qual o princípio da técnica de citometria de fluxo?
Um feixe de luz (normalmente laser) de um único comprimento de onda (cor) é direcionado a um meio líquido em fluxo. Cada partícula suspensa passando através do feixe de luz do laser, dispersa a luz de uma forma, e os corantes químicos fluorescentes (fluorocromos) encontrados na partícula ou acoplados a anticorpos específicos juntos as partículas podem ser excitadas emitindo luz de comprimento de onda característico. Um número de detectores são aponta dos ao local onde o fluxo passa a través do feixe de luz; um na posição do feixe de l luz (Forward Scat ter ou F SC) e vários perpendiculares a es te ( Side Scatter ou SSC) , além de um o u mais detectores fluorescentes. Esta combinação de luz dispersa e fluorescente é captada pelos detectores, de a cordo com filtros situados a frente. Analisando as flutuações de brilho de cada detector (uma para cada pico de emissão fluorescente) é possível explorar vários tipos de informação sobre a estrutura física e química de cada partícula individual. FSC correlaciona com o volume celular e SSC depende da complexidade interna da partícula, por exemplo: forma do núcleo, quantidade e tipo dos grânulos citoplasmáticos e rugosidade da membrana.
2. Quais são as vantagens de se utilizar a técnica de citometria de fluxo comparada aos outros métodos de análise?
 Esse tipo de determinação se faz importante na detecção da doença residual mínima, isto é, quando há persistência de uma quantidade pequena de células blásticas resistentes o trata mento. O reconhecimento da célula doente que gerou todo o processo neoplástico é fundamental, pois uma vez definida a célula anômalia, sua biologia , seu mecanismo leucemogênico, pode melhor conduzir o paciente. Para que sejam obtidas tais informações é necessário que vários métodos diagnósticos sejam combinado, obtendo assim um diagnóstico seguro e preciso dos tipos e subtipos de leucemias.
Além disso as vantagens da citometria de fluxo são: Método semi -automatiza do que permite avaliar milhares de células por a mostra, apresenta maior variabilidade dependente de operador quando comparada a análise morfológica. 
3.O que podemos analisar através da citometria de fluxo?
A citometria de fluxo serve para indicar Bicitopenia e pancitopenia; Linfocitose;
Monócitos; Eosinofilia; Blastos no sangue periférico, medula óssea ou líquidos corporais Plasmócitos e ou gamopatiamonocional.
3. Qual a relação entre citometria de fluxo e imunofenotipagem?
A citometria de fluxo é o método pelo qual é realizada a imunofenotipagem. Trata-se do uso de tecnologia laser, pelo qual podem ser determinadas múltiplas características físicas e biológicas de uma célula ou de uma população celular. 
4. O que significa a sigla “CD” muito utilizada em imunofenotipagem?
Significa Antígeno de diferenciação celular.
5. Qual a importância da citometria de fluxo no diagnóstico das doenças hematopatológicas?
citometria de fluxo é uma técnica que permite uma análise multiparamétrica das células sanguíneas, isso se fez possível devido ao desenvolvimento dos anticorpos monoclonais e conjugação dos mesmos a fluorocromos, os quais contribuíram no entendimento das alterações fisiológicas que ocorrem durante a diferenciação e maturação de todos os componentes normais do sistema hematopoético, assim como daquelas que ocorrem durante o desenvolvimento de processos patológicos.