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ROTEIRO DE ESTUDO DIRIGIDO 8: - Efeitos biológicos das radiações não ionizantes 1. Caracterize o espectro de emissão de radiações eletromagnéticas emitidas pelo Sol que atinge a superfície da Terra. As radiações eletromagnéticas emitidas pelo Sol apresentam um amplo espectro caracterizado por radiações na ordem crescente de energia: micro-ondas, infravermelho, radiação visível e ultravioleta A, B e C, sendo que a última não chega a superfície devido à camada de ozônio.. 2. O que são cromóforos? Cite exemplos de cromóforos para radiação ultravioleta. É a molécula ou parte dela capaz de absorver energia de uma radiação não ionizante de comprimento de onda específico. Exemplos: DNA, RNA, proteínas, citocromo C. 3. Explique os efeitos diretos e os efeitos indiretos das radiações não ionizantes. Dentre as radiações não-ionizantes, a ultravioleta se destaca. Os raios UV interagem diretamente com o DNA, podendo provocar alterações nos seres vivos (eritemas, pigmentação, diminuição da resposta imunológica, indução ao câncer de pele, etc.) Nos efeitos diretos a energia de radiação é absorvida por importantes biomoléculas como DNA, RNA e proteínas. Nos efeitos indiretos da radiação é absorvida pela água e há formação de radicais livres. 4. Relacione os efeitos biológicos da radiação ultravioleta com a absorção das radiações não ionizantes pela matéria viva. DNA: A mudança nas bases nitrogenadas, pode afetar as estruturas secundárias e terciárias e vice-versa. As distorções da dupla hélice são causadas por quebras de pontes de hidrogênio e das fitas, podem também sofrer roturas de cadeias polinucleotídicas, mas é menos comum. Quanto às bases nitrogenadas, dímeros de pirimidina são formados (principalmente timina, mas também uracila, citosina e uracila-citosina) e podem levar a inativação celular, mutagênese e transformação neoplásica. Outras lesões em bases nitrogenadas: fotoprodutos de hidratação de pirimidinas, que induzem mutagênese; Ligações entre aminoácidos e bases nitrogenada, em doses baixas são ligações fotoinduzidas; Fotoadição de bases nitrogenadas - adutos, que acontece entre bases adjacentes. RNA: São efeitos semelhantes às induzidas no DNA, hidratos de uracil, ligação covalente entre citosina e tiouracil. PROTEÍNAS: Atuam principalmente em seus cromóforos, que são aminoácidos aromáticos, ligações peptídicas e pontes dissulfeto. Entre os alvos mais frequentes estão a cistina, triptofano, fenilalanina e tirosina. Seus fotoprodutos são as seguintes transformações: cistina → alanina ou cisteína; triptofano → ácido aspártico; histidina→histamina (que atua no eritema induzido pelo UV). Outros efeitos das radiações não ionizantes em proteínas são: alteração da massa molecular, alteração da solubilidade, aumento da sensibilidade à desnaturação térmica, alterações nas propriedades ópticas, alteração da viscosidade, alteração de propriedades antígenas e inativação enzimática 5. Quais são as principais alterações induzidas pela radiação ultravioleta no DNA? Quais as possíveis consequências? Pode causar a formação de dímeros de pirimidina, fotoprodutos de hidratação de pirimidina, ligações entre aminoácidos e bases nitrogenadas, adutos e ruptura de fitas. Pode causar mutações que não conseguem ser revertidas pelos mecanismos de reparo e levar à transformação celular, carcinogênese e morte celular. 6. Justifique a importância da camada de ozônio para a vida na Terra, enfocando nos efeitos da radiação ultravioleta nos seres vivos. A camada de ozônio absorve a radiação ultravioleta C, que tem comprimento de onda entre 200 e 290 nm, podendo ser facilmente absorvida pelo DNA e proteínas, com grande potencial citotóxico e carcinogênico. Além disso, diminui muito a incidência de raios UV B sobre a superfície terrestre. Logo, a camada de ozônio nos protege, em parte, de sofrer os efeitos danosos da radiação ultravioleta. 7. Explique o processo de indução de eritema pela radiação ultravioleta. Ocorre a partir da liberação de substâncias como histamina, serotonina, prostaglandinas e bradicinina, devido à inativação celular. Ocorre peroxidação dos lipídeos e liberação do conteúdo lisossômico. 8. Como a radiação ultravioleta induz a pigmentação da pele? A radiação UV atua em precursores da melanina, induzindo sua produção e pode acelerar sua transferência dos melanócitos, presentes na camada basal da pele até os queratinócitos. 9. Explique o mecanismo de ação dos protetores solares. Os filtros solares absorvem radiação UV, transformando os raios de alta energia em baixa energia, ou possuem agentes que sequestram os radicais livres. Os bloqueadores solares são substâncias opacas para UV, que absorvem ou refletem os raios UV, causando dispersão. O fator de proteção é em relação às doses limiares eritematógenas. 10. Justifique o “banho de sol” para o metabolismo do cálcio e do fosfato? O metabolismo do cálcio e do fosfato é regulado pela vitamina D. Para essa vitamina ser produzida, é necessário que seu precursor 7-dehidrocolesterol, presente na pele, seja ativado pelos raios UVB, obtidos pela exposição ao sol. 11. Explique o processo de fotocarcinogênese pela radiação ultravioleta. A radiação ultravioleta pode causar lesões no DNA levando a alterações no código genético ou lesões em enzimas de reparo do DNA, as quais levam a um funcionamento não ideal da célula ou até morte celular, causando a fotocarcinogênese. 12. O que é o índice UV? Justifique sua importância. É a medida científica internacional do nível de radiação emitida pelo sol, que pode ser alterada de acordo com a época do ano, horário do dia e posição do planeta. É muito importante para adequada proteção contra os raios solares e prevenção do câncer de pele. 13. O que é fotobiomodulação? Cite exemplos de efeitos sistêmicos da fototerapia. Fotobiomodulação é a exposição à luz de baixa potência para gerar efeito regenerativo. Uma radiação não ionizante ativa um cromóforo que transfere sua energia para uma biomolécula, que tem sua função celular alterada. Pode provocar alívio da dor, tem efeito anti inflamatório e pode ser usado no tratamento de feridas. 14. Explique o mecanismo de ação dos fotossensibilizadores na terapia fotodinâmica. O agente químico exógeno é captado pela células alvo, que absorve energia do agente físico (luz LED) e produz radicais livres em grande quantidade, causando um grande estresse oxidativo. Dessa forma, causa instabilidade em lipídeos da membrana celular, causando desestabilização e desestruturação, levando à inativação celular. Descreva, sucintamente, uma estratégia de avaliação de efeitos biológicos de radiações não ionizantes, utilizando um modelo experimental em nível molecular, celular ou sistêmico. Uma estratégia para avaliação dos efeitos biológicos à nível molecular seria analisar a presença de alterações no DNA causadas pela radiação não ionizante, e que ao não se repararem da forma correta podem levar a mutações e até mesmo morte celular. Também pode ser feita a análise da presença de dímeros, principalmente de timina, da formação de ligação entre bases nitrogenadas e aminoácidos, e da presença de bases modificadas e, em menor grau, se há quebras na cadeia de DNA. As mesmas modificações podem ocorrer no RNA. Para avaliar mutações no DNA é possível utilizar o teste de Ames e de micronúcleo. Pode-se avaliar também o efeito das radiações não ionizantes a nível celular a partir do estudo das proteínas, que podem sofrer alterações na massa, solubilidade e até mesmo sofrer inativação. Dessa forma, pode ocorrer alteração nos processos celulares. A avaliação dessas mudanças pode ser feita a partir de culturas celulares e avaliação de proliferação e morte, bem como por metodologias proteômicas, como cromatografia e espectrometriade massas. Para avaliar os efeitos sistêmicos, é possível utilizar o modelo animal para verificar se ocorrem mudanças cutâneas que ocorrem quando há contato com radiações não ionizantes, como por exemplo eritema, pigmentação, espessamento e fotocarcinogênese. Essa avaliação pode ser feita por meio da análise de queratinócitos, melanócitos e alterações fenotípicas. No modelo animal também é possível observar os efeitos sobre o globo ocular, como fotofobia, hemorragia e catarata.
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