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2 0 2 0 . 2 J Ú L I A M O R A I S 1 4 3 ( 2 0 1 9 . 2 ) | 1 MICROBIOLOGIA AULA 2 Fisiologia Bacteriana NUTRIÇÃO E CRESCIMENTO SUBSTÂNCIAS As bactérias necessitam de substâncias para seu crescimento e fornecimento de energia, a quantidade e tipo difere entre elas. As substâncias são: • Fonte de Carbono: CO2 e compostos orgânicos. → Ex: Bactérias fotossintéticas (CO2). • Fonte de Nitrogênio: N2 , NH3 e proteínas. → Ex: Rhyzobium (N2) e Nitrosomonas (NH3). • Fonte de Enxofre: S, H2S e aminoácidos sulfatados. • Íons: PO4 , SO4 , K, Mg, Na e Cl. • Oligo-elementos: Fe, Zn, Mn, Cu. • Fonte de Energia: Luz, compostos inorgânicos e glicose. • Água. CLASSIFICAÇÃO QUANTO À NUTRIÇÃO F. DE ENERGIA F. DE CARBONO AUTROTRÓFICOS Fotolitotróficos Luz CO2 Quimiolitotróficos C. Inorgânicos CO2 HETEROTRÓFICOS Foto- organotróficos Luz C. Orgânicos Quimio- organotróficos C. Orgânicos FATORES Além das substâncias, temos alguns fatores que influenciam no crescimento bacteriano, são eles: • Temperatura; • pH; • Pressão osmótica; • Concentração de oxigênio – Ar atmosférico e Eh (Potencial de oxirredução). CLASSIFICAÇÃO QUANTO À TEMPERATURA • Psicrófilo: Crescem em temperaturas baixas. → Ex: Polaromonas vacuolata. • Psicrotófilos: → Ex: • Mesófilos: Seres que crescem em temperaturas médias. → Ex: Escherichia coli. • Termófilos: Seres que crescem em temperatura elevadas. → Ex: Bacilus streatothermophilus. • Hipertermófilos: → Ex: Thermococcus celor. CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO PH • Acidófilas: pH ácido (1,8 a 5). → Ex: Bactérias fermentadoras (Lactobacillus acidophilus). • Neutrófilas: pH neutro (5 a 9). → Ex: Escherichia coli; Staphylococcus aureus; Clostridium botulinum; Salmonella sp. • Alcalino: pH alcalino (9 a 11) → Ex: Vibrio cholerae. CLASSIFICAÇÃO QUANTO A OSMOLARIDADE Os microrganismos que necessitam de NaCl para seu crescimento podem ser: • Não-halófilos: Não necessitam de sal e não toleram a presença do meio. → Ex: Escherichia coli. COMPOSIÇÃO DO AR ATMOSFÉRICO Nitrogênio (78,08%); Oxigênio (20,94%); Argônio (0,93%); Dióxido de Carbono (0,035%) etc. 2 0 2 0 . 2 J Ú L I A M O R A I S 1 4 3 ( 2 0 1 9 . 2 ) | 2 • Halófilos moderados: Necessitam de sal em uma concentração moderada. → Ex: Vibrio fischeri. • Halófilos extremos: Necessitam de sal em altas concentrações. → Ex: Halobacterium salinarum. CLASSIFICAÇÃO QUANTO AO O2 • Aeróbios estritos: Necessitam de O2 para viver. → Ex: Mycobacterium tuberculosis. • Facultativos: Crescem com ou sem O2, mudando seu metabolismo de oxidativo para fermentativo. → Ex: Escheria coli. • Anaeróbios estritos: Morrem na presença de O2. → Ex: Clostridium tetani. • Microaerófilos: Crescem melhor em baixa concentração de O2. → Ex: H.pylori. • Aerotolerantes: Anaeróbios que toleram breves exposições ao O2. → Ex: Lactobacillus acidophilus. • Carnofílicos: Exigem alto teor de Ox2. → Ex: Neisseria. As bactérias aeróbias ou as facultativas, apresentam um mecanismo de depuração dos radicais livres¸ que se formam a partir do mecanismo oxidativo. Esse processo de detoxificação é feito por 3 enzimas: super-óxido dismutase, catalase e peroxidase. Elas transformam esses resíduos em produtos não tóxicos, como água e oxigênio. Já as bactérias anaeróbias, não possuem essas enzimas, ocorrendo o acúmulo desses resíduos tóxicos e a morte por oxidação. REPRODUÇÃO DIVISÃO BINÁRIA O processo se dá através de uma célula mãe, a qual duplica seu material genético gerando duas células- filhas idênticas a célula mãe (clones). O tempo de geração, em geral, de cerca de 15 a 30 minutos. Com exceção de algumas bactérias: M. tuberculosis (15h); T. pallidum (30h) e M. leprae (21d). 1. Duplicação do material genético; 2. A parede e a membrana celular começam a forma o septo transversal; 3. O septo transversal torna-se completo e as células-filhas se separam. O aumento da população bacteriana se dá em progressão geométrica. Sendo assim, temos a formação de grandes populações em um curto espaço de tempo. METABOLISMO MECANISMOS DE PRODUÇÃO DE ATP • Fotofosforilação • Fosforilação oxidativa: Respiração (completa) ou fermentação (incompleta). RESPIRAÇÃO AERÓBICA O receptor final de elétrons é o oxigênio, tendo como produto o CO2+H2O. No final do processo, temos um rendimento energético de 38 ATPs. • Glicólise: Uma molécula de glicose é oxidada com o uso de 2 ATPs, produzindo duas moléculas de piruvato e 4 ATPs, e liberando 2 NADH2+. • Ciclo de Krebs: O piruvato passa para dentro das mitocôndrias, onde é oxidado pela piruvato desidrogense, formando Acetil CoA e liberando 2 CO2 e 2 NADH. O Acetil CoA adentra o Ciclo de Krebs sendo transformado em ácido cítrico. No final do ciclo, temos a formação de ácido oxalacético, o qual será reincorporado no ciclo, e a liberação de 2 GTP, 6 NADH, 2 FADH2 e 4 CO2. BACTÉRIAS ANAERÓBIAS As bactérias anaeróbias podem ser cultivadas em jarra de anaerobiose (consumo de oxigênio) ou em câmara de anaerobiose (troca de atmosfera). Elas fazem parte da microbiota de sítios anatômico com baixo potencial de oxirredução, como cavidade bucal, mucosa intestinal e a mucosa vaginal. Além disso, participam de processos infecciosos associados a tecido necrosado ou isquêmico (baixa perfusão sanguínea). 2 0 2 0 . 2 J Ú L I A M O R A I S 1 4 3 ( 2 0 1 9 . 2 ) | 3 • Cadeia respiratória: Um conjunto de enzimas transportadoras de elétrons oxidam as moléculas de NADH e FADH2. No final desse processo temos 34 ATPs e a liberação de 6 H2O. A respiração aeróbica possui um alto rendimento energético, produzindo muito ATP e provocando o rápido aumento da população. É um processo que exige a presença de O2 livre, ocorrendo apenas em aerobiose. Além disso, os produtos não alteram o meio, fazendo a população cresce rapidamente. RESPIRAÇÃO ANAERÓBICA A respiração anaeróbica possui baixo rendimento energético, produzindo entre 2 a 38 ATPs. É um processo que exige a ausência de O2 livre, ocorrendo apenas em anaerobiose. O aceptor final de elétrons pode ser um nitrato, sulfato ou carbonato. Além disso, o acúmulo final de produtos, como nitrito, H2S e metano, afetam o meio. FERMENTAÇÃO A fermentação possui baixo rendimento energético, produzindo apenas 2 ATPs e tendo um alto consumo de substrato, provocando um aumento lento da população. É um processo que exige a ausência de O2 livre, ocorrendo apenas em anaerobiose. O processo de fermentação se dá início a partir da molécula de ácido pirúvico obtido da glicólise. Os receptores finais de elétrons são compostos orgânicos, tendo como produtos compostos orgânicos ricos em energia, como o ácido lático e o álcool etílico. O acúmulo de produto no meio causa o rápido consumo do substrato e alterações, as quais limitam o crescimento da população bacteriana.