EXPRESSÃO DE PROTEÍNA ANTIVIRAL DE LONOMIA OBLIQUA EM

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EXPRESSÃO DE PROTEÍNA ANTIVIRAL DE LONOMIA OBLIQUA EM SISTEMA BACULOVÍRUS/CÉLULA DE INSETO
ANA CAROLINA VIEGAS CARMO
Acadêmica: laina pires rosa
Profª. Dr. Karen hoffmann
Fevereiro 2016
Tecnologia de Cultivo de Célula Animal
Ultima década do século 19.
Meios de cultivo definido
Engenharia genética
A manutenção de células animais em laboratório iniciou-se...
Desde então inúmeros avanços nas pesquisas foram alcançados, principalmente relacionada a produção....
O desenvolvimento desta tecnologia permite a produção de: vacinas antivirais, anticorpo monoclonal, glicoproteínas complexas e proteínas recombinantes para diagnostico e terapia
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Ferramentas biotecnológicas;
Desenvolvimento de linhagens celulares;
Aumento de produtividade
Genômica e a proteômica;
Otimização do metabolismo celular;
Controle de apoptose;
Redução da instabilidade;
Genômica: estudo do genoma completo de um organismo.
Proteômica: estudo em larga escala das proteínas expressas em uma célula, tecido ou organismo.
*A produção de bioprodutos a partir de cultivo de células animais conta com importantes .....
Tais como:
Os processos de engenharia voltados.....
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Proteínas
Catalisadores de reações metabólicas;
Interações inter e intracelular;
Sinalização;
Problemas na expressão de proteínas por um organismo pode causar sérias doenças.
A administração de proteínas produzidas em laboratório.
*As proteínas são consideradas de fundamental importância para o metabolismo normal de um organismo.
Elas atuam como:
Componentes estruturais responsáveis por......
Para o tratamento destas doenças vem se utilizando...
Além de ser um modo satisfatório, fazendo o que torna a produção de proteínas recombinantes uma das áreas mais importantes e promissoras para a indústria farmacêutica.
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Movimentou em 2007 cerca de 86 bilhões de dólares, com previsão de duplicar este valor em 2013..
Com isso houve uma crescente demanda por biofármacos, e as industrias começaram a fazer a utilização da engenharia genética.
Tecnologia Engª. genética
Clonagem
Expressão da proteína no sistema escolhido
Bactérias, leveduras, fungos, plantas e animais transgênicos, linhagens celulares de plantas, mamíferos ou insetos estão atualmente disponível.
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Biopharma
Esta tecnologia permitiu a produção de inúmeros produtos, sendo que, somente em 2010, 9 dos 10 produtos da empresa Biopharma com maior faturamento a partir dessa tecnologia.
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Utilização 
Avastin = Em combinação com quimioterapia a base de fluoropirimidina é indicado para tratamento de primeira linha de pacientes com carcinoma metastático de colón ou de útero.
Remicade = utilizado no tratamento de lesão articular estrutural, doença de Crohn.
Herceptin = tratamento para câncer de mama.
Humira = tratamento de artrite reumatoide grave.
Lantus = tratamento de diabetes tipo 2 em adulto, tipo 1 em crianças com 6 anos de idade ou mais.
Neulasta = reduzir a duração da neutropenia (baixo numero de glóbulos brancos).
Lucentis = tratamento de degeneração macular neovascular, tratamento de deficiência visual devido ao edema macular diabético, tratamento de deficiência visual divido ao edema macular secundário a oclusão de veia da retina.
Aranesp = antianemico.
Sistema bacteriano
É o mais utilizado para a expressão de proteínas
 heterólogas.
Protocolo mais simples
Disponibilidade de varias cepas e vetores de expressão
Custos menores e altos rendimentos
Significa que uma proteína é experimentalmente colocada em uma célula que normalmente não fazem (ou seja, expressa) a proteína.
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Sistema bacteriano
Devido o hospedeiro ser um organismo procarionte, algumas modificações pós - traducionais não são realizadas de forma eficiente, bem como a utilização de códons divergentes pelos utilizados por células humanas.
Sistema de expressão baseado em baculovírus (BEVS)
Foi desenvolvido para a produção de proteínas recombinantes mas complexas em células de inseto
O vírus recombinante é utilizado para infectar as células de insetos. Durante a infecção, o baculovírus recombinante é replicado e as proteínas exógenas são produzidas.
Porém tem a seguinte problemática:
Para a solução desta problemática:
Que necessitam de modificações pós traducionais
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Baculovírus
São capazes de infectar apenas células de inseto.
Controle Biologico
Terapia Gênica
Procedimentos de transplante
Eles são utilizados de forma segura em outros processos biotecnológicos.
Controle biológico por este vírus é realizado de forma seletiva contra pragas principalmente Lepidoptera.
Em procedimentos de terapia genica, incluindo a entrega de genes de proteção em órgãos sólidos durante os procedimentos de transplante.
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Lanomia obliqua
Antivirais
Antimicrobiana
Fatores de crescimento
Antiapoptóticas
Potencializadores da produção de proteínas recombinante.
Por apresentarem um grande interesse comercial em sua produção, muitas proteínas são alvo da insdustria biotecnológica. Neste contexto a lagarta ganha grande destaque no cenário da biotecnologia brasileira devido ao grupo de pesquisa encontrou em sua hemolinfa proteínas com atividades de grande interesse aplicado, como:
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O alvo deste estudo foi a expressão recombinante e caracterização de uma proteína antiviral isolada da hemolinfa da lagarta Lanomia obliqua.
*Varios trabalho realizado pelo grupo demonstram não só a presença dessas proteínas a hemolinfa da lagarta como também a comprovação e caracterização do efeito biológico em aplicações praticas inovadoras. 
*Este trabalh possui grande relevância dvido ao baixo numero de antivirais presentes no mercado, fazendo-se de extrema importância a descoberta e a caracterização de novas drogas.
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Proteína antiviral
O controle de viroses é de alto interesse na área de saúde pública e animal, porém poucos agentes estão disponíveis para o combate destas enfermidades.
Frequente surgimento de microrganismo resistente a drogas.
O desenvolvimento de terapias eficazes para doenças virais humanas é estritamente dependente da identificação de novos agentes terapêuticos, mostrando-se fundamental a busca de compostos que possam atuar como novas drogas a serem utilizadas no combate de doenças infecciosas.
* A identificação de agentes com ação antiviral é de suma importância devido ao freq.....
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Proteína antiviral da lagarta Lanomia Obliqua (AVLO).
Redução no título viral de 157 vezes
Na produção do vírus do sarampo, redução de 61 vezes
Redução de 64 vezes na replicação do vírus da influenza (H1N1)
Foi identificado uma potente proteína antiviral presente na hemolinfa da lagarta, experimentos com proteína purificada levou a redução.....
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Não possui nenhuma ação neutralizante direta sobre o vírus e nem interfere na penetração viral.
Ação antiviral ocorre de forma intracelular ativando 
algum mecanismo interno de proteção inata.
A hemolinfa afeta a produção de alguns imunomoduladores 
como interferon, TNF (fator de necrose tumoral) e óxido nítrico que
são agentes inespecíficos da produção dos organismos.
substâncias que atuam no sistema imunológico conferindo aumento da resposta orgânica contra determinados microrganismos, incluindo vírus, bactérias e protozoários, mediante à produção de interferon e seus indutores.
Acredita-se que a proteína antiviral extraída da hemolinfa de Lanomia obliqua, esteja ativando algum mecanismo da célula que iniba a replicação. 
A obtenção em maior escala desta proteína irá permitir estudos mais precisos dos mecanismos de ação, bem como estudos de estrutura/função.
Perguntas
O que são proteínas antivirais e qual a sua função?
Existe uma problemática no sistema bacteriano, qual é essa problemática e a solução da mesma?