Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias_BIO

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Docente: Prof.ª Sheila de F. Perecin Menegati
Biomédica: Especialista em Hematologia e Imunohematologia
Mestranda em Biologia Molecular de grupos sanguíneos – Unicamp
HEMATOLOGIA - Biomedicina
Série 
Granulocítica
Neutrófilos → Escalonamento maturativo
Granulócitos → escalonamento maturativo
Granulócitos → escalonamento maturativo
Linhagem Granulocítica
Série linfocitária
Série monocitária
Série plasmocitária
Escalonamento maturativo dos linfócitos, 
monócitos e plasmócitos
Células plasmocitárias
ALTERAÇÕES HEMATOLÓGICAS
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
As alterações observadas variam com:
Localização / extensão do processo
Nivel das manifestações sistêmicas
Agente etiológico
Grupo etário
Condições imunológicas
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
RESPOSTA INFLAMATÓRIA:
Alterações hemodinâmicas e microvasculares.
Aumento do fluxo sanguíneo e extravasamento do fluido no local da infecção
ação de citocinas e mediadores inflamatórios nos vasos sanguíneos.
Sinais da inflamação: calor, rubor, tumor e dor.
 Nesse momento, neutrófilos e macrófagos fagocíticos iniciam a resposta 
inflamatória
• Liberação de quimiocinas pelos macrófagos-atração de neutrófilos e 
monócitos para o tecido infectado ou inflamado;
• Ingestão de patógeno bacteriano ou viral pela célula dendritícas –
Células apresentadoras de antígenos (APC);
• As APCs dirigem –se aos linfonodos e ativam linfócitos específicos 
para os antígenos-resposta imune adaptativa.
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS - Resposta Inflamatória Aguda
Resposta hematológica nas Infecções
• Cinética e função das células envolvidas nos processos de defesa
Resposta hematológica à infecções - estágios
Resposta hematológica - Bactérias Intracelulares
 M. tuberculosis, M. leprae
• Bactérias penetram nos macrófagos e estimulam tanto células TCD4 comoTCD8.
• Secreção de IFN-γ que ativa os MACRÓFAGOS A PRODUZIREM ÓXIDO NÍTRICO -destruição das bactérias
• Neutrofilia não é esperada
• Tuberculose e hanseníase
Monocitose – manifestação frequente 
Neutrofilia - ocorre na tuberculose miliar (Reação Leucemóide)-f ase disseminada da doença
Pancitopenia- se ocorrer esplenomegalia
• Produção de Citocinas:
TNF-α, IL-1, IL-6
Febre
• Mobilização intensa de neutrófilos
• Neutrofilia ( principalmente por Gram + )
• Neutropenia (principalmente por Gram -)
• Desvio à esquerda
Resposta hematológica - Bactérias extracelulares
Resposta hematológica - Infecção Viral
• Patógenos intracelulares
• Utilizam maquinaria da célula infectada para se reproduzirem.
• Interação dos Linfócitos T com células portadoras dos antígenos – ativação de citocinas que agem nas
células-alvo.
• Nos tecidos afetados as células dendríticas englobam os patógenos e migram para os linfonodos
estimulando LinfócitosT a liberarem mais citocinas e Linfócitos B produtores de anticorpos que reagirão com
as células infectadas ou interagirão com macrófagos para atuarem sobre as células infectadas.
Resposta hematológica - Síndrome da Imunodeficiência Adquirida
• Depressão profunda da resposta imune mediada pelos linfócitos T.
• Agente etiológico-retrovírus HIV (1983)
• Capacidade de infectar várias células de preferência CD4 e macrófagos.
• Disfunção imunológica grave.
Alterações hematológicas (resposta) - AIDS
• Alterações hematológicas numerosas e variáveis
• Ação do vírus sobre células precursoras
• Associação com infecções, inflamações ou
neoplasias
• Associação com uso de Medicamentos
• Característico: citopenias (anemia, leucopenia e
trombocitopenia):
• Capacidade do vírus infectar e destruir as
células
• Anemia
•  produção de hemácias
•  destruição
• Leucócitos
• Linfopenia
• Neutropenia
• Monocitopenia
• Alterações funcionais
• Vacuolização citoplasmática,
anormalidades granulares,
defeitos de segmentação,
núcleos bizarros
• Plaquetas
• Trombocitopenia
Resposta hematológica - Mononucleose Infecciosa
• Causa-vírus Epstein-Baar
• Pertence a família herpesviridae
• Infecta principalmente linfócitos B
• Incidência -jovens 15 a 19 anos
• Evidências que EBV- associação a neoplasias
• Ocorre:
• Leucocitose 10.000-20.000/mm3 (2/3 dos casos)
• Linfocitose (>50% dos leucócitos)
• Expansão clonal de L T-CD8+
• Vírus infecta Linfócitos B
• Linfócitos T reativos às células infectadas tornam-se atípicos
• Podem permanecem na circulação por 1-2 meses (até 6m)
• Em geral > 10% do total de leucócitos
• Trombocitopenia e anemia
Respostas hematológicas - Dengue
• Causada por um dos quatro sorotipos de vírus da família Flaviviridae.
• Transmissão pelo mosquito Aedes Egypti.
• Manifestações clínicas - desde a febre indiferenciada até a síndrome do
choque da dengue.
• Alterações laboratoriais variadas
• Leucopenia
• Anormalidade mais comum
• Máxima entre 5º- 6º dia
• Linfócitos atípicos e plasmócitos presentes.
• Plaquetopenia
• < 50.000 em 50- 60% dos casos
• Máxima entre 5º- 7º dia
• Prova do laço positiva
• Monocitose
• 100% (Taiwan)
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
 ALTERAÇÕES QUALITATIVAS:
 Granulações tóxicas: Grânulos primários ricos em mieloperoxidase
 Vacuolização citoplasmática: Exocitose de material fagocitado
 Corpos de Döhle: Liquefação do retículo endoplasmático
 Comum em Pneumonia pneumocócica, erisipelas (estafilococos), queimaduras
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
DE COM GRANULAÇÕES TÓXICAS
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
VACÚOLOS CITOPLASMÁTICO
CORPOS DE DOHLE
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
 Vacúolos Tóxicos: 
aparecem nos neutrófilos, 
junto com os grânulos tóxicos 
e representam grave lesão 
citoplasmática decorrente de 
processo bacteriano intenso 
(septicemia) ou quando há 
formação de pus (abcesso)
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
 Corpúsculo de Döhle: 
 aparecem na periferia dos
neutrófilos. São áreas ricas em
RNA e representam liquefação
do retículo endoplasmático
decorrente de lesão
citoplasmática. São um sinal
fidedgno de infecções
bacterianas graves ou
sistêmicas
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
NEUTROFILIA COM DE
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
RESPOSTA INFLAMATÓRIA BACTERIANA:
Mobilização intensa de neutrófilos
Neutrofilia ( principalmente por Gram + )
Desvio à esquerda
Neutropenia: principalmente por Gram -
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
RESPOSTA INFLAMATÓRIA: INFECÇÕES VIRAIS:
Patógenos intracelulares
Utilizam da célula infectada para se reproduzirem.
 Interação dos Linfócitos T com células portadoras dos 
antígenos
Provocam ativação de citocinas que agem nas células-
alvo.
 Nos tecidos afetados as células dendríticas englobam os patógenos
e migram para os linfonodos estimulando LinfócitosT a liberarem
mais citocinas e Linfócitos B produtores de anticorpos que reagirão
com as células infectadas ou interagirão com macrófagos para
atuarem sobre as células infectadas.
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
Linfócitos T reativos às células infectadas tornam-se atípicos
http://ashimagebank.hematologylibrary.org/content/vol2008/issue1015/images/large/08-00031-Fig1.jpeg
NORMAL
ALTERAÇÕES QUANTITATIVAS ASSOCIADAS
DESVIO À ESQUERDA LEVE
ALTERAÇÕES QUANTITATIVAS ASSOCIADAS
DESVIO À ESQUERDA SEVERO
ALTERAÇÕES QUANTITATIVAS ASSOCIADAS
ALTERAÇÕES CELULARES – LEUCÓCITOS
REAÇÃO LEUCEMÓIDE:
Leucocitose reacional e excessiva,caracterizada pela presença de células
imaturas no sangue periférico
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
• LEUCOGRAMA
 Contagem global dos leucócitos
Contagem diferencial dos leucócitos
Avaliação morfológica de maneira geral
Células imaturas
 Precursores ou blastos
 Pró-mielócito
 Mielócito
 Metamielócito
Células em transição e/ou maduras
 Bastão
 Neutrófilo
 Eusinófilo
 Basófilo
 Linfócito
 Monócito
CONTAGEM GLOBAL – Objetivos
• Determinar infecção ou inflamação.
• Determinar a necessidade de testes adicionais, como, por exemplo, o 
diferencial de leucócitos ou a biópsia de medula óssea.
• Monitorar a resposta à quimioterapia, radioterapiaou outros tipos de 
terapia.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
CONTAGEM GLOBAL
• A contagem normal de leucócitos varia de 5.000 a 10.000/ml.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
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ACHADOS ANORMAIS
LEUCOCITOSE LEUCOPENIA
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
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LEUCOCITOSE
Contagem elevada de leucócitos geralmente relacionada à:
Infecção
Abscesso
Meningite
Apendicite
Amigdalite
Leucemia
necrose tecidual
infarto do miocárdio
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
LEUCOPENIA
Contagem diminuída de leucócitos indica depressão da 
medula óssea, que pode resultar de:
Infecções virais
Influenza
Febre tifoide
Sarampo
Hepatite infecciosa
Mononucleose e rubéola.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
LEUCOPENIA – Também relacionado à:
Reações tóxicas que acompanham o tratamento com antineoplásicos, 
ingestão de mercúrio ou outros metais pesados, ou exposição ao benzeno ou 
arsênicos. 
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA CONTAGEM GLOBAL
• MÉTODO:
Utiliza-se uma diluição de 1:20 em líquido diluente que geralmente é o liquido 
de Turk (ocasionalmente pode-se utilizar agua com objetivos de lisar as 
hemácias e contar os leucócitos)
 Conta-se em câmara de Neubauer, nos 4 quadrantes laterais
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA CONTAGEM GLOBAL
Leucócitos Leucócitos
LeucócitosLeucócitos
CONTAGEM DIFERENCIAL
• A diferenciação de leucócitos é importante para avaliar a distribuição e
morfologia dos glóbulos brancos, fornecendo informação mais específica
sobre o sistema imune do paciente do que a contagem de leucócitos
isoladamente.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
CONTAGEM DIFERENCIAL – Objetivo
•Avaliar a capacidade para resistir e superar infecções.
•Detectar e identificar diversos tipos de leucemia.
•Determinar o estágio e gravidade de uma infecção.
•Detectar reações alérgicas.
•Avaliar a gravidade de reações alérgicas (contagem de eosinófilos).
•Detectar infecções parasitarias.
•Servir de suporte para o diagnóstico de outras doenças.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
VALORES DE REFERENCIA – Adulto
• Bastão: 1 à 5%
• Basófilos: 0 a 2%
• Eosinófilos: 1 a 5%
• Linfócitos: 22 a 40%
• Monócitos: 2 a 12%
• Neutrófilos: 45 a 65%.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
VALORES DE REFERENCIA – Criança
• Bastão: 1 à 5%
• Basófilos: 0 a 2%
• Eosinófilos: 1 a 5%
• Linfócitos: 45 a 65%
• Monócitos: 2 a 10%
• Neutrófilos: 22 a 40%.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
Leucocitose com neutrofilia e acompanhada de desvio nuclear à esquerda 
significa :
que a medula óssea está liberando células de seu "pool“ de reserva porque
algum tecido está necessitando de neutrófilos.
O desvio à esquerda caracteriza a liberação de células mais jovens pela
medula óssea, porque a maioria das células do "pool“ de reserva da medula
óssea são bastonetes.
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA 
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA CONTAGEM DIFERENCIAL
• MÉTODO:
 Devido ao tamanho variado dos
leucócitos, sua distribuição no
esfregaço nem sempre é uniforme.
Assim nas bordas e na cauda há maior
quantidade de neutrófilos, eosinófilos e
monócitos, ficando os linfócitos mais
restritos à região central do esfregaço
HEMOGRAMA / LEUCOGRAMA CONTAGEM DIFERENCIAL
• Para evitar erros deve-se fazer a contagem em zigue-zague.
• Deve-se contar 100 leucócitos para soltar o resultado em %
• Terminado a contagem deve-se percorrer a lamina buscando alterações 
morfológicas
Leucocitose neutrofílica com desvio a esquerda
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
• INFLUÊNCIA DA AUTOMAÇÃO NA ANÁLISE 
QUANTITATIVA E QUALITATIVA DO HEMOGRAMA 
– ESPECÍFICAMENTE NO LEUCOGRAMA
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
• Citometria de fluxo é uma técnica utilizada para contar, examinar e
classificar partículas microscópicas suspensas em meio líquido em fluxo.
• Permite a análise de vários parâmetros simultaneamente, sendo conhecida
também por citometria de fluxo multiparamétrica.
• Através de um aparelho de detecção óptico-eletrônico são possíveis
análises de características físicas e/ou químicas de uma simples célula.
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
Principio da técnica:
• Um feixe de luz (normalmente laser) de um único comprimento de onda (cor) é direcionado a um meio
líquido em fluxo.
• Um número de dectores são apontados ao local onde o fluxo passa através do feixe de luz; um na linha do
feixe de luz (Forward Scatter ou FSC) e vários perpendiculares a este (Side Scatter ou SSC) além de um
ou mais detectores fluorescentes.
• Cada partícula suspensa passando através do feixe dispersa a luz de uma forma, e os corantes químicos
fluorescentes encontrados na partícula ou juntos a partícula podem ser excitados emitindo luz de menor
frequência do que o da fonte de luz.
• Esta combinação de luz dispersa e fluorescente é melhorada pelos dectetores, e analisando as flutuações
de brilho de cada detector (uma para cada pico de emissão fluorescente)
• É possível explorar vários tipos de informação sobre a estrutura física e química de cada individual
partícula.
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
 INTERPRETAÇÃO:
• FSC correlaciona-se com o volume celular e SSC depende da complexidade interna da
partícula (por exemplo: forma do núcleo, quantidade e tipo dos grânulos citoplasmáticos
e rugosidade da membrana).
• Alguns citômetros de fluxo do mercado tem eliminado a necessidade da fluorescência,
usando somente dispersão de luz para sua medição.
• Outros citômetros de fluxo formam imagens de cada fluorescência da célula, dispersão
de luz e transmissão de luz.
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
HEMATOLOGIA E CITOMETRIA DE FLUXO:
• A hematologia foi uma das primeiras disciplinas médicas a se beneficiar das aplicações clínicas da
citometria de fluxo.
• Algumas destas aplicações são atualmente utilizadas regularmente para o diagnóstico ou a seguinte
terapêutica das diferentes afecções.
• A imunologia utiliza a citometria de fluxo para a detecção ou identificação de sub-tipos de células
implicadas na imunidade.
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias
• 4- Gráfico tamanho/complexidade que indica as populações leucocitárias presentes na amostra assinaladas com
uma cor para cada uma.
• 5- Gráfico granulosidade/lobularidade que permite evidenciar as diferenças apresentadas entre os granulócitos
por análise da luz despolarizada.
• 6- Histograma das plaquetas e dos eritrócitos permitem mostrar as diferenças entre a população de plaquetas e
de eritrócitos e se estas populações apresentam uniformidade de tamanho.
• 1 – dados quantitativos do leucograma: leucócitos totais; contagem absoluta e calculo das porcentagens.
• 2 – dados quantitativos do eritrograma: numero total de eritrócitos, dosagem de Hb e hematócrito, além de
cálculos do VCM, HCM, CHCM e RDW.
• 3 – dados quantitativos do plaquetograma: quantificação das plaquetas
Interpretação do leucograma e alterações leucocitárias