Tecnologia da Biologia Celular e Molecular - Alguns Exemplos - Slides

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cursomeds.com.br
Citologia
Vivian Assis
Tecnologia da Biologia Celular e 
M olecular : alguns exemplos
- T écnica de pr epar ação de lâminas
- T ipos de micr oscópios
- V isual ização de estr utur as celular es 
- C omo identificamos células vivas
Perguntas a serem respondidas:
Quais são as principais etapas de preparação de
lâminas?
O que conseguimos ver em um microscópio óptico?
E qual a diferença dele para os microscópios
eletrônicos?
Como podemos visualizar proteínas em soluções?
O que são culturas de células?
http://gph.is/2jOA0FS
Técnica de preparação de lâminas 
2)FIXAÇÃO
3) 
DESIDRATAÇÃO 
- manter estruturas 
celulares e impedir 
destruição 
- uso de formol e aldeído 
glutárico- estabilizam 
proteínas
Retirada de água do material-
uso de álcool para isso. 
1) COLETA DO 
MATERIAL 
- Biópsias 
4)DIAFANIZAÇÃO 
5)INCLUSÃO 
6)MICROTOMIA
- Preparar o material para 
etapa de inclusão. Usa 
geralmente xilol para 
retirar líquidos e tornar 
material translúcido. 
- Banho de parafina, para 
formar blocos - Corte de estruturas por 
aparelho: MICRÓTOMO 
4)DIAFANIZAÇÃO 
5)INCLUSÃO 
6)MICROTOMIA
- Retirada de todo líquido, 
incluindo o álcool 
utilizado, usando xilol, ou 
outro composto. - Banho de parafina, para 
formar blocos - Corte de estruturas por aparelho: 
MICRÓTOMO 
JUNQUEIRA, Luiz Carlos Uchoa; CARNEIRO, José. 
Biologia celular e molecular. 9. ed. Rio de Janeiro: 
Guanabara Koogan, 2012. 364 p. ISBN 978-85-277-
2078-6.
7) COLOCAÇÃO DO 
CORTE NA LÂMINA
- montagem de lâmina
8) COLORAÇÃO 
- normal da célula- ser INCOLOR
- precisa ser visualizada:
corantes BÁSICOS- afinidade por o que é ÁCIDO-
basofílico 
Corantes ÁCIDOS- afinidade por o que é BÁSICO-
acidófilo 
Tipos de microscópios
MICROSCÓPIO DE LUZ/ ÓPTICO 
MICROSCÓPIO DE POLARIZAÇÃO 
MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASE 
MICROSCÓPIO CONFOCAL 
MICROSCÓPIO 
ELETRÔNICO 
TRANSMISSÃO E VARREDURA
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 9788582714232.
OLHO NU OLHO NU MÓPTICO
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 9788582714232.
MÓPTICO MELETRÔNICO MELETRÔNICO
MELETRÔNICO ? ?
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 9788582714232.
MICROSCÓPIO DE LUZ/ ÓPTICO 
- sistema de lentes: ampliação pelas lentes objetivas e pelas lentes ópticas 
- poder de resolução: mede a capacidade de identificar pontos individualizados. 
- Lente objetiva que regula resolução 
https://www.youtube.com/watch?v=GF3oiS4M5QQ
https://www.youtube.com/watch?v=GF3oiS4M5QQ
https://www.youtube.com/watch?v=GF3oiS4M5QQ
https://www.youtube.com/watch?v=GF3oiS4M5QQ
http://www.fiocruz.b
r/ioc/media/comcien
cia_02.pdf
http://anatpat.unicamp.br/lamdegn17.html
http://www.fiocruz.br/ioc/media/comciencia_02.pdf
http://anatpat.unicamp.br/lamdegn17.html
https://www.cienlab.com.br/microscopio-polarizacao.html
MICROSCÓPIO DE POLARIZAÇÃO 
- feixe de luz polarizada dividido pelas 
estruturas
- o que desvia luz: ANISOTRÓPICAS 
- o que NÃO desvia luz: ISOTRÓPICAS. 
https://www.cienlab.com.br/microscopio-polarizacao.html
MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASE 
- Analisa contraste entre estruturas celulares: 
aparecem em fase positivas-claras ou em fase 
negativas-escura. 
- mais denso o material: menor velocidade que luz 
passa. 
- menos denso corpo, > velocidade que luz passa. 
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 9788582714232.
https://www.news-medical.net/life-sciences/Applications-of-Confocal-Imaging-(Portuguese).aspx
MICROSCÓPIO CONFOCAL 
- Proporciona nitidez em todas as estruturas 
ao mesmo tempo. 
- Ilumina por meio de um laser, que 
percorre pela região toda. 
- Uso de corante fluorescente
- Leitura em computadores. 
https://www.news-medical.net/life-sciences/Applications-of-Confocal-Imaging-(Portuguese).aspx
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
- Usa comprimentos de luz muito 
pequenos- vê estruturas muito 
microscópicas. 
- feixe é de elétrons, e não de luz. 
- O que aparece escuro: elétron-
denso- estruturas celulares não 
desviam. 
- O que aparece claro: tons de cinza-
estruturas celulares desviam. 
- Corte de lâmina deve ser fino: 
inclusão em resina e navalha de 
vidro/diamante. 
DE TRANSMISSÃO
http://anatpat.unicamp.br/nptpnet3e.html
http://anatpat.unicamp.br/nptpnet3e.html
DE VARREDURA
- emissão de feixe de elétrons para 
tecido
- elétron contorna estruturas- visão 3D 
das estruturas. 
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 9788582714232.
Visualização de estruturas celulares 
Como vemos proteínas?
https://giphy.com/gifs/wtf-obama-wth-pPhyAv5t9V8djyRFJH
https://giphy.com/gifs/wtf-obama-wth-pPhyAv5t9V8djyRFJH
IMUNOCITOQUÍMICA DIRETA 
Procura reação antígeno-anticorpo
JUNQUEIRA, Luiz Carlos Uchoa; CARNEIRO, José. Biologia celular e molecular. 9. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2012. 364 p. ISBN 978-85-277-2078-6.
IMUNOCITOQUÍMICA INDIRETA 
Procura antianticorpo
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 9788582714232.
Como identificamos células vivas
https://www.youtube.com/watch?v=GF3oiS4M5QQ
Culturas de células
Soluções nutritivas: nutridas com
aminoácidos, glicídios e sais
minerais,
Observa-se o metabolismo e o
comportamento celular de seres
vivos.
https://www.youtube.com/watch?v=GF3oiS4M5QQ
http://www.splabor.com.br/blog/frascos-para-cultura-celular/aprendendo-mais-cultivo-celular-historico-informacoes-tecnicas-e-curiosidades/
http://www.splabor.com.br/blog/frascos-para-cultura-celular/aprendendo-mais-cultivo-celular-historico-informacoes-tecnicas-e-curiosidades/
Perguntas a serem respondidas:
Quais são as principais etapas de preparação de
lâminas?
O que conseguimos ver em um microscópio óptico?
E qual a diferença dele para os microscópios
eletrônicos?
Como podemos visualizar proteínas em soluções?
O que são culturas de células?
http://gph.is/2jOA0FS
Perguntas a serem respondidas:
Quais são as etapas de preparação de lâminas?
O que conseguimos ver em um microscópio óptico?
E qual a diferença dele para os microscópios
eletrônicos?
Como podemos visualizar proteínas em soluções?
O que são culturas de células?
http://gph.is/2jOA0FS
❖ Momento Beca Milano 
VERDADEIRO OU FALSO 
( ) Micrótomo é o nome dado para o aparelho que consegue preparar exemplares de tecidos 
em parafinas, a fim de colocá-los em lâminas. 
( ) Corantes básicos coram estruturas básicas. 
( ) Corantes ácidos coram estruturas básicas. 
( ) Os principais tipos de microscópios são: de luz e eletrônico. 
❖ Momento Leonardo Paixão 
VERDADEIRO OU FALSO 
( ) Imunocitoquímica direta é a busca pelo antianticorpo em uma solução com antígenos e 
anticorpos. 
( ) Imunocitoquímica indireta é a busca pela reação antígeno-anticorpo em uma solução com 
antígenos e anticorpos. 
( ) Cultura de células é o nome dado para meios nutritivos que mantém células vivas, para 
serem estudadas mais minuciosamente. 
Referências:
ALBERTS, Bruce. Biologia molecular da célula. 6. Porto Alegre ArtMed 2017 1 recurso online ISBN 
9788582714232.
JUNQUEIRA, Luiz Carlos Uchoa; CARNEIRO, José. Biologia celular e molecular. 9. ed. Rio de Janeiro: Guanabara 
Koogan, 2012. 364 p. ISBN 978-85-277-2078-6.
Muito obrigada, 
tur ma!
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