PATOLOGIA - PREPARAÇÃO DE LAMINAS HISTOLOGICAS

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Preparação de lâminas histológicas 
Objetivo: 
Etapas da coleta, de fixação e preparo de lâminas 
1.Etapa da coleta do material para ser avaliado microscopicamente. 
Material utilizado para secção da área de interesse: navalha ou lâmina de bisturi. 
Obs.: Fragmento é cortado em um tamanho que seja possui colocar dentro dos 
cassetes. 
2.Etapa de fixação 
- Etapa em que é colocado o material observado em uma solução fixadora, na qual tem 
como objetivo evitar ou retardar ao máximo o processo de autólise e evitar a proliferação 
bacteriana que podem levar a degradação do material e torná-lo inadequado para 
utilização. 
- Solução utilizada é o formou/formaldeído a 10% tamponado. 
3.Processamento histológico 
É uma etapa na qual o material previamente coletado vai ser desidratado, passando em 
seguida por uma etapa de clareamento (Xilol). 
- Material é passado por uma série de soluções, com uma sequência específica: 
Inicialmente álcoois mais hidratados e posteriormente de hora em hora até chegar nos 
álcoois absolutos. Em seguida, vai passar por uma etapa de clareamento, tomando um 
“banho” de Xilol, solução importante para tirar o excesso de álcool utilizado na 
desidratação. 
- Esse processo pode ser feito tanto de forma manual como de forma automatizada no 
histotecnico. 
Funcionamento do histotecnico: 
- Várias cubas, com diversos reagentes. Nesse processo, vai passar hora em hora em 
cada uma das cubas, até passar por todas as etapas de álcoois e xilol. Terminando, no 
banho de parafina. 
- É possui colocar mais de um cassete na máquina. 
- Tampa levanta e desce bem devagar, fazendo com que ocorra uma melhor penetração 
dos vários reagentes que serão utilizados no processamento. 
4.Etapa de inclusão em parafina 
- Máquina de central de inclusão – na qual possui parafina derretida. 
- Confecção do bloco de parafina 
Aula laboratório 
Aluna: Ingrid de Carvalho Maranhão. 
S3 – Benfica – Patologia 
- Nessa etapa, o fragmento é mergulhado nas caixinhas de metais com parafina, depois 
é colocado em uma placa fria para solidificação do material. 
- Solidificação da parafina, na placa refrigerada – processo de duração 25 a 30 minutos. 
5.Confecção dos cortes histológicos 
- Micrótomo: máquina que faz cortes bem finos do material. Um bloco de parafina com 
material biológico incluído pode ser cortado em fatias bem finas, da ordem de 5 a 7 
micrômetros (0,005 a 0,007 min) de espessura. 
- Utilizado uma navalha (mesma da coleta do material). 
- Pega o bloco de parafina, coloca na base do micrótomo, dando início a secção. Em 
seguida é colocado os cortes na água para que o material seja esticado e possa ser 
escolhido o melhor corte – etapa de pescaria. 
6.Etapa de coloração da lâmina 
- A coloração mais utilizada é a de hematoxilina e eosina (rosa e 
roxo) 
- Bateria de coloração – banhos de álcoois, xilol, corantes 
hematoxilina e eosina. 
- Tempo específico 
- Por fim, é colocado uma gota “cola”, com uma lamínula de vidro por cima, permitindo 
que o material tenha uma maior durabilidade, preservando de desidratação etc. 
7.Lâmina pronta para observação histológica. 
 
 
 Resumo do processo