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Mecanismos de reparo do DNA Responsáveis por manter as taxas de mutações baixas Redundância de vias de reparo: mais uma via pode reparar o mesmo dano → maior eficiência Reversão direta do DNA danificado Reparo por fotorreativação enzimática • Corrige os danos causadas pela ação da luz UV (formação de dímeros de piramidina) DNA fotoliase: reconhece e rompe os dímeros utilizando energia da luz visível Reparo de bases alquiladas • Enzima capaz de remover a remoção do grupamento metil (alquil em bactérias) • O grupamento metil é transferido para a cisteína da enzima e ela fica desativada Reparo de bases mal pareadas MMR: Correção de erros replicativos remanescentes na fita recém sintetizada • Reconhece pares únicos mal pareados, adições e deleções Etapas 1. Reconhecimento do mal pareamento: sequência GATC 2. Determinar a base 3. Excisão da base Reparo por excisão Etapas 1. Endonuclease de reparo reconhece o erro e faz a excisão 2. Polimerases fazem a síntese preenchendo o espaço utilizando a fita de DNA complementar como molde 3. DNA ligase solda a quebra deixada pela DNA polimerase Fator TFIH De bases anormais: BER • Enzimas glicosilases • Sítio apurínico após a remoção da base também vai ser corrigido De nucleotídeos: NER • Bem conservada • Complexo multiproteíco no sítio • Corte downstream e upstream • Utilização do filamento não danificado como molde • Replicação e transcrição • Em procariotos: também remove erros causados pela luz UV Reparo por recombinação Quebra da dupla fita (DSB) Homóloga: Homologia entre as cromátides irmãs SDSA: mecanismo sem erros de pareamento que depende da síntese • Usa a cromátide irmã como molde para o anelamento DSBR: reparo de fita dupla • Junções de holidays com crossover sem crossover União de extremidades não homólogas (NHEJ) • Proteínas KU • Ligação de extremidades não coesivas Reparo propenso a erro Sistema SOS e síntese translesão • Mantem o dano do DNA acumulando mutações para prevenir a morte celular • PCNA: grampo deslizante • Polimerase by-pass • A adição de ubiquitina ao PCNA permite a troca da Pol III pela by-pass e permite a continuação da replicação
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