Imuno-histoquímica e Imunofluorescência

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Clara Gomes – s3 
Imuno-histoquímica 
Definição: 
É um método que utiliza como reagentes 
específicos para a detecção de antígenos 
presentes em células ou tecidos, seria o 
método que tenta através da identificação de 
antígenos (fragmento de um microrganismo) 
presentes em uma célula ajudando para 
diagnostico. 
Pode ser utilizado para identificar estruturas, e 
nisso precisamos um anticorpo que se ligue a 
essa estrutura e com outros componentes que 
geram uma cor, e se ela é visualizada dizemos 
que o anticorpo reagiu. 
Pode ser utilizado por cima de outros métodos 
através: 
• Biopsia 
• Citologia 
Objetivo diagnostico de: 
• Lesões indiferenciada (células que 
perde as características do tecido de 
origem) 
• Microrganismos estruturas celulares 
ou materiais secretados por células 
• Identificação topográfica do antígeno 
no tecido 
• Avaliação de proliferação celular (onde 
colocam marcadores no tecido que vão 
da uma cor diferenciada e se essa cor 
fica mais forte quer dizer que ela esta 
se dividindo mais rápido) 
 
O linfócito b é uma célula que se diferencia no 
plasmócito e após começa a produzir 
anticorpos que tem a função de identificar os 
antígenos estranhos e ai a imunidade é 
ativada, é nesse princípio da ligação especifica 
de anticorpo e antígeno que utiliza como 
método de diagnostico 
Vantagem 
Reação especifica (se a lâmina corar o 
diagnóstico é muito preciso) 
Desvantagem 
Técnica de alto custo 
Funcionamento 
O antígeno que queremos identificar com isso 
devemos ter o anticorpo primário que seria o 
anticorpo produzido diretamente para que 
haja a ligação com o antígeno, para o exame 
precisamos diferentes anticorpos primários 
para identificar vários diagnostico. Além disso 
utilizamos o anticorpo secundário que carrega 
um complexo avidina-biotina que é um 
corante a qual vamos observar na lamina e se 
há a evidenciação de uma coloração aquele 
componente que queríamos identificar esta 
presente no tecido 
 
 
 
 
Caso clinico 
 
• Tumor na região de mandíbula 
• Apagamento de fundo de suco 
Possíveis diagnósticos: 
• Osteossarcoma (mais comum que 
afeta os tecidos ósseos 
• Osteomielite 
Passos para o diagnóstico: 
Realiza uma biopsia incisional e confecciona a 
lâmina e após a observação do corte da lâmina 
ainda há duvidas e precisa de técnicas 
auxiliares e ai que surge os painéis de imuno-
histoquímicas, onde o patologista indica 
reações com marcadores específicos que tem 
afinidades especifica e esse marcado só vai se 
ligar ao seu anticorpo especifico e após a 
colocação percebeu que se tratava de um 
carcinoma prostático, uma metástase de um 
carcinoma prostático, ou seja é um diagnostico 
fundamental na conclusão de diagnostico 
especifico. 
 
 
Imunofluorescência 
Técnica que possibilita a visualização de 
antígenos nos tecidos ou em suspensões 
celulares por meio da utilização de antígenos 
específicos marcados com fluoro cromo que é 
uma substancia, capazes de absorver a luz UV 
e emitir. A diferença é que vamos ver luz em 
vez de cor 
Realizado para identificar: 
• Doenças autoimunes (lupos, pênfigo...) 
• Microrganismos nos fluidos 
 
Vantagem 
Reação especifica 
Desvantagem 
Custo alto 
Técnicas 
Direta: utilizada quando é retirado o tecido do 
próprio paciente a qual há suspeita. 
 
Indireta: nesta técnica nós não utilizamos 
biopsia e sim coletamos o sangue do paciente 
na qual tem anticorpos circulantes.