Aula prática Dosagem de glicose

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Aula prática 03
Avaliação Pancreática 03
Dosagem de Glicose
AGENDA
Dosagem de glicose 
Liberação de laudos 
Discussão de casos clínicos
Apresentar o desempenho de compreensão (A3) 
Busca ativa: Leitura prévia dos principais marcadores. Principais enzimas transaminases, gama GT, Fosfatase alcalina (FAL), albumina.
 
DOSAGEM DE GLICOSE
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Dosagem de Glicose – Método: Enzimático 
PRINCÍPIO
Glicose + O2 + H2O Ácido Glucônico + H2O2 
2 H2O2 + 4-aminoantipirina + fenol Antipirilquinonimina + 4 H2O
GOD 
POD
Reagentes:
Reagente 1: Tampão fosfato, fenol, GOD, POD, 4- aminoantipirina, azida sódica e surfactantes.
Reagente 2: Padrão calibrador: Glicose 100mg/dL
Dosagem de Glicose – Método: Enzimático 
Amostra: Jejum de 8 a 12 horas.
Soro (separação logo após a coleta)
Plasma (tubo contendo fluoreto – inibidor da glicólise)
Dosagem de Glicose – Método: Enzimático 
Procedimento – Método de ponto final
Tomar três tubos de ensaio e proceder como a seguir:
	 	BRANCO	TESTE	PADRÃO
	AMOSTRA	---------	0,01mL	------------
	PADRAO	---------	---------	0,01mL
	REAGENTE 1	1,0 mL	1,0 mL	1,0mL
Misturar vigorosamente e incubar em banho-maria a 37oC durante 10 minutos.
Determinar as absorbâncias do teste e do padrão em 505nm (490 a 520nm), acertando o zero com o branco. A cor é estável por 30 minutos. 
https://www.youtube.com/watch?v=ALz7luVgX8g
Dosagem de Glicose – Método: Enzimático 
LEITURA EM 505 nm (490 a 520nm)
Dosagem de Glicose – Método: Enzimático 
Glicose (mg/dL) =
Absorbância do Teste
Absorbância do padrão 
x 100
Cálculos:
Dosagem de Glicose – Método: Enzimático 
Linearidade:
O resultado da medição é linear até a concentração de 500mg/dL. Quando for obtido resultado igual ou maior que 500mg/dL, diluir a amostra com NaCl realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo valor da diluição. 
	Idade	mg/dL
	Prematuro	20 a 60
	0 a 1 dia	40 a 60
	˃ 1 dia	50 a 80
	Crianças e adultos	65 a 99
Valor de Referência:
Cálculo e liberação de laudos
Na rotina do seu plantão, realizou-se a dosagem de 5 amostras de glicemia de jejum, seguindo o protocolo estabelecido e discutido nos slides anteriores. 
Após a leitura no espectrofotômetro foram encontrados os seguintes resultados:
Padrão
Conc: 100mg/dL
Abs: 0,364 
A1
Abs: 0,395  
A2
Abs: 0,290      
A3
Abs: 0,859    
A4
Abs: 0, 355    
A5
Abs: 0, 370   
Calcule a concentração da glicose em cada amostra e libere o resultado. 
CASO 01
Uma menina de 15 anos de idade, que não sabia ter diabetes, foi admitida no departamento de emergência do hospital. Ela estava confusa e seu hálito tinha um odor de maçã podre. Ela apresentava sinais de desidratação com redução do turgor tecidual e boca seca. Ela também apresentou respiração rápida e sem pausas. Sua glicemia era 324mg/dL e foi detectada a presença de corpos cetonicos na urina. A concentração sérica do potássio era de 5,0 mMol/L(VR 3,5 a 5,0 mmol/L). O pH do sangue era 7,2 ( VR 7,37 a 7,44)
Explicar por que ela estava confusa e o hálito de maçã podre
Explicar por que ela apresentava os sinais de desidratação.
Explicar por que ela tinha uma respiração rápida e sem pausas.
Esta menina apresentava glicosúria? Explicar.
Complicações agudas da DM
Cetoacidose diabética (CAD)
Estado hiperglicemico hiperosmolar
Hipoglicemia
Acidose láctica
Hiperlipidemia
Laboratório na CAD
Glicemia, em geral >300mg/dL
Corpos cetônicos: presentes no sangue e na urina;
Gasometria arterial: bicarbonato <15 mmol/L (22 – 26 mmol/L) e pH < 7,3;
Sódio sérico: reduzido devido a transferência osmótica de líquidos do espaço intra para o extracelular, aos vômitos e à perda renal associada aos corpos cetônicos;
Potássio sérico: normal ou baixo; sempre haverá depleção do potássio total porque a acidose causa saída de potássio do meio intra para o extracelular, levando a perdas por diurese osmótica;
Laboratório na CAD
Contagem de leucócitos: a maioria dos pacientes com crises hiperglicemicas agudas apresenta leucocitose (>20000 células/mm3) devido à intensa atividade cortical.
Exame de urina: presença de glicosúria e cetonúria. Pode ocorrer piúria e proteinúria, que não devem ser valorizados como sinal de infecção.
CASO 02
O que você deduz do controle da glicemia do paciente diabético descrito abaixo?
Paciente: Glicemia de jejum 90 mg /dl , Corpos cetonicos na urina negativo, Hbglicada 18,2 % e macroalbuminúria 340 ( mg/24 horas).
Valores de referência: glicose em jejum: 70 a 99 mg/dl, Corpos cetonicos na urina – negativo, Hbglicada4,1 a 6,5 % e microalbuminúria menor do que 150 mg/ 24 horas. 
Complicações Crônicas da diabetes
Macroangiopatia: acometimento das grandes artérias, que pode afetar a circulação no coração e no cérebro , além da circulação periférica, principalmente dos membros inferiores (DAC doença arterial coronariana, AVC e gangrena, respectivamente )
Microangiopatia: espessamento da membrana basal dos capilares de diversos orgãos, representada principalmente pela retinopatia e nefropatia diabética.
Complicações crônicas do DM: Microvasculares e macrovasculares. 
Complicações crônicas do DM
Pode ocorrer também acometimento neurológico periférico (neuropatias) devido a alterações na microcirculação dos nervos em conseqüência de alterações no metabolismo das células nervosas.
Complicações crônicas do DM
Complicações características do diabetes como catarata, retinopatia, nefropatia periférica, problemas circulatórios e de cicatrização surgem em decorrência do não tratamento, que causam hiperglicemia crônica ou constante. 
Neuropatia diabética
Pé Diabético
A lesão consiste em degeneração da mielina, com desmielinização das fibras (neurite diabética).
Quase todas as anormalidades são teoricamente possíveis no sistema nervoso autônomo e periférico dos pacientes com DM.
Neuropatia periférica
É a mais característica, e cerca de 2/3 dos pacientes com DM 2 tem sinais da doença. 
Afeta as pernas, mãos e pés.
No inicio, há intensa hipersensibilidade dos pés e dedos; depois há perda da sensibilidade dolorosa e postural levando ao aparecimento de lesões destrutivas na pele, ligamentos e ossos, mas preservando a atividade motora
Neuropatia periférica
Há entorpecimento, dor aguda, dormência e perda de sensibilidade que associada a má circulação leva a ulcerações, que se infectadas podem levar a gangrena.