CANNABIS E ALZHEIMER

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"Efficacy of Cannabinoids in a Pre-Clinical Drug-
Screening Platform for Alzheimer’s Disease"
pesquisa temáticapesquisa temática
 
PANORAMA GERAL
mais de 50 milhões de pessoas no
mundo acima de 65 anos
perspectiva para 50 anos: > 130
milhões de pessoas
um dos maiores problemas de saúde
pública atualmente
DOENÇA DE ALZHEIMER:
HISTÓRICO 
Alois Alzheimer
1901
mulher, meia idade, com deficiência de
memória e perda progressiva da
capacidade cognitiva
post-mortem: necrópsia revela
alterações específicas no córtex
cerebral
m
em
ór
ia 
e
ca
pa
cid
ad
e
co
gn
iti
va
co
m
pr
om
et
id
as
SINTOMATOLOGIA 
alterações
comportamentais,
alguns com
sintomas
psicóticos
memória e
capacidade
cognitiva perdidas
funções mentais e
atividades
cotidianas
prejudicadas
linguagem, força,
reflexos,
capacidade
sensorial e
habilidades
motoras quase
normais
Área entorrinal e Hipocampo: Perda
progressiva da memória declarativa
Neocórtex: Morte neuronal ampla
Núcleo Basal: Anormalidades nos sistemas
colinérgicos -> dificuldades cognitivas e
déficits de atenção. 
ÁREA AFETADA X FUNÇÃO PREJUDICADA:
 
RELAÇÃO
ANATOMOFISIOLÓGICA
NORMAL
DOENÇA DE ALZHEIME
R
encéfalo atrofiado, giros estritos, sulcosencéfalo atrofiado, giros estritos, sulcos
alargados, peso encefálico reduzido ealargados, peso encefálico reduzido e
ventrículos aumentadosventrículos aumentados
presença de placas amiloides (grandespresença de placas amiloides (grandes
agregados de peptídeos fibrilaresagregados de peptídeos fibrilares
arranjados em lâminas)arranjados em lâminas)
anormalidades no citoesqueleto deanormalidades no citoesqueleto de
neurônios, principalmente o acúmulo deneurônios, principalmente o acúmulo de
emaranhados neurofibrilaresemaranhados neurofibrilares
 Tratamento 
dos sintomas
diminuir a ansiedade, dormir ou
ajudar a controlar a
instabilidade emocional
antipsicóticos, ansiolíticos e
antidepressivos
Inibidores da
acetilcolinesterase
impedem a degradação da
acetilcolina
Donepezila, Galantamina,
 Rivastigmina
Moduladores
 do glutamato
impede que altos níveis de
glutamato possam levar à
disfunção neuronal
Memantina
Fisioterapia e
Estimulação
cerebral profunda
reduzir as limitações físicas
 
 
Autores: 
David Schubert, Devin Kepchia, Zhibin Liang, Richard Dargusch,
Joshua Goldberg, Pamela Maher
"Efficacy of Cannabinoids in a Pre-Clinical Drug-
Screening Platform for Alzheimer’s Disease"
Revista Publicada: Molecular Neurobiology 
Ano de Publicação: 2019
Número de Citações: 15 artigos
Salk Institute (California)
ARTIGO:ARTIGO:ARTIGO:
ineficácia dos medicamentos atuais em reduzir o ritmo de
progressão da doença
o THC já se mostrou efetivo na remoção de beta amilóide
intraneuronal, mas sua propriedade psicoativa ainda é vista com
grande estigma social
OBJETIVOS E IMPORTÂNCIA DA PESQUISA
determinar eficácia dos canabinóides não psicoativos como
potenciais neuroprotetores diante das toxicidades do cérebro
em envelhecimento
investigar as possibilidades de novas abordagens terapêuticas
no contexto do Alzheimer
idade avançada dos
pacientes como alto
fator de risco
insistência em
desenvolver drogas com
alvos moleculares pré-
selecionados
complexidade da
patologia
análise da citotoxicidade de células
metabolicamente ativas em uma cultura
celular, a fim de avaliar sua atividade
qualitativa e quantitativamente
MÉTODOS
ENSAIO DEENSAIO DEENSAIO DE
CULTURA CELULARCULTURA CELULARCULTURA CELULAR
examinar proteínas em uma amostra de homogenato
de tecidos biológicos, utilizando eletroforese (gel
SDS-PAGE) para separá-las a partir de suas
diferentes propriedades estruturais e, em seguida,
transferí-las para uma membrana em que serão
utilizados anticorpos específicos para a proteína-alvo
IMUNOBLOTTINGIMUNOBLOTTINGIMUNOBLOTTING 
+ SDS PAGE+ SDS PAGE+ SDS PAGE
análise da citotoxicidade de células
metabolicamente ativas em uma cultura
celular, a fim de avaliar sua atividade
qualitativa e quantitativamente
ANÁLISEANÁLISEANÁLISE
 DE RNADE RNADE RNA
análise da citotoxicidade de células
metabolicamente ativas em uma cultura
celular, a fim de avaliar sua atividade
qualitativa e quantitativamente
METILAÇÃO DOMETILAÇÃO DOMETILAÇÃO DO
CANNABIDIOLCANNABIDIOLCANNABIDIOL
OXITOSE
via de morte celular
programada na qual o
glutamato inibe
mecanismos que
reduzem o estresse
oxidativo nos neurônios
CBDV, CBG, CBC, CBN,CBDV, CBG, CBC, CBN,CBDV, CBG, CBC, CBN,
THCATHCATHCA
PERDA DE ENERGIA
RETIRADA DE
FATOR TRÓFICO INFLAMAÇÃO
TOXICIDADE AMILÓIDE
INTRANEURAL
neurônios corticais
embrionários são
removidos de seu
ambiente cerebral e
colocados em uma cultura
de tecidos em baixa
densidade, desprovidos
de suporte trófico
avaliação da
proteotoxicidade a partir
da produção de um
fragmento da proteína
percursora amilóide por
neurônios após a remoção
de tetraciclina do meio
medição da resposta
inflamatória de células
microgliais ao
lipopolissacarídeo
bacteriano, a partir da
produção de óxido
nítrico (NO)
simulação da perda
aguda de ATP que ocorre
com o envelhecimento, a
partir da inibição da
gliceraldeido 3-fosfato
desidrogenase
TODOS EXCETO CBGA ETODOS EXCETO CBGA ETODOS EXCETO CBGA E
DMCBDDMCBDDMCBD
TODOS EXCETO THCA,TODOS EXCETO THCA,TODOS EXCETO THCA,
DMCBD, CBGADMCBD, CBGADMCBD, CBGA
APENAS CBD, DMCBD EAPENAS CBD, DMCBD EAPENAS CBD, DMCBD E
THCATHCATHCA
CBDV, CBC, CBN, CBDA,CBDV, CBC, CBN, CBDA,CBDV, CBC, CBN, CBDA,
CBDCBDCBD
ensaio de cultura celularensaio de cultura celular
immunoblottingimmunoblotting
análise da capacidade
dos canabinóides de
evitar o acúmulo de Aβ:
células neuronais
induzidas a produzir Aβ
na presença ou ausência
de canabinóides
análise das amostras na
presença de um
anticorpo Aβ
immunoblottingimmunoblotting
células neuronais induzidas a
produzir Aβ na presença ou
ausência de canabinóides
THC, CBDV, CBG, CBC,
CBN e CBD
adição de tetracicllina e de um
inibidor da secretase à
apenas uma parte da amostra
inicial
exposição de metade das
culturas aos diferentes
canabinóides e outra apenas
ao veículo
CBDV, CBG, CBC, CBN
e CBD
análise da capacidade
dos canabinóides de
evitar o acúmulo de
Aβ
análise das amostras na
presença de um
anticorpo Aβ
1
determinar se os
canabinóides podem
acelerar a degradação
da amilóide
preexistente
2
análise de RNAanálise de RNA
metilação de canabinolmetilação de canabinol
determinar se as células das culturas utilizadas
(HT22 e MC65) expressam receptores CB1 ou
CB2
nenhuma das duas células
expressa 
analisar a relação estrutura-atividade dos
canabinóides na neuroproteção
rastrear diversos agonistas e antagonistas
de CB1 e CB2 nas células de ambas culturas
MC65 não responde aos canabinoides
sintéticos da maneira prevista para o
envolvimento de CB1 ou CB2
 os mecanismos responsáveis pela iniciação da
resposta protetora são diferentes entre as
células MC65 e HT22
dúvidas?dúvidas?