1 Preparo de Meio e Reagentes

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MICROBIOLOGIA
MEIOS DE CULTURA
TÉCNICO DE LABORATÓRIO
BIOMÉDICO e FARMACÊUTICO
PROFA ANA CAROLINA ROCHA
PREPARO DE MEIOS DE CULTURA
PESAGEM E DISSOLUÇÃO
1. Os meios devem ser pesados separadamente e adicionados em um 
frasco.
2. Os meios devem ser hidratados em pequena quantidade de água até que 
todo o meio fique úmido e só depois deve-se acrescentar o restante da 
água. 
PESAGEM E DISSOLUÇÃO
3. Sempre que for necessário levar o meio para fundir, usar vidro Pyrex, 
aquecer sobre a tela de amianto ou similar e tripé, no bico de Bunsen.
4. Usar sempre luvas térmicas apropriadas para laboratório para manipular 
vidrarias quentes; 
ESTERILIZAÇÃO E DISTRIBUIÇÃO
5. Esterilizar em autoclave. O tempo de esterilização é 
de 15 minutos e a temperatura de 121ºC. Os meios 
devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, 
para que a esterilização seja por igual em todo o 
conteúdo dos tubos - tampas fechadas não permitem a 
entrada do vapor. 
6. Quando distribuir o meio após a autoclavação, os 
tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou materiais 
auxiliares obrigatoriamente devem ser estéreis.
Para todos os meios confeccionados, colocar no mínimo 
10% do lote preparado na estufa 35 ± 1°C por 24 horas 
para o controle de esterilidade. Não deve haver mudança 
de cor nem crescimento de qualquer colônia. 
Para o controle de crescimento, sempre que possível usar 
cepas ATCC, que são cepas de referências de origem e 
padrão definido de provas para a sua caracterização. Se 
não for possível o uso de cepas ATCC, usar cepas 100% 
positivas para os controles de qualidade de crescimento 
realizados. 
CONTROLE DE QUALIDADE
Formulado à partir do meio de Stuart, uma vez que 
microrganismos patogênicos e outros coliformes fecais 
sobrevivem bem neste meio. 
A carência de uma fonte de nitrogênio impede 
consideravelmente a multiplicação de microrganismos 
e a composição nutritiva garante a sobrevivência 
deles. 
O que difere este meio do meio de Stuart, é a adição 
de uma solução salina balanceada de tampão fosfato 
inorgânico e omitindo da fórmula o azul de metileno. 
CARY BLAIR
UTILIDADE: Transporte de material fecal e 
consequente conservação dos microrganismos. 
CARY BLAIR
A carência de uma fonte de nitrogênio impede 
consideravelmente a multiplicação de 
microorganismos e a composição nutritiva garante a 
sobrevivência deles. 
STUART
UTILIDADE: Transporte de diversos materiais e 
conseqüente conservação dos microorganismos. 
Conservação de microorganismos patogênicos como: 
Haemophilus spp., Pneumococcus, Salmonella spp., 
Shigella spp. entre outros. 
O Nutriente Ágar é um meio relativamente simples, 
de fácil preparação e barato, muito usado nos 
procedimentos do laboratório de Microbiologia.
ÁGAR NUTRIENTE
UTILIDADE: nutriente ágar tem várias aplicações no laboratório de Microbiologia, e pode ser 
utilizado para análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das 
amostras submetidas à exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas 
puras. Uso mais freqüente é para a conservação e manutenção de culturas em temperatura 
ambiente neste ágar, como método opcional para os laboratórios que não dispõem do 
método da crioconservação (congelamento das cepas em freezer à - 70ºC). Usado para 
observar esporulação de espécies de bacilos Gram positivos. 
Ano: 2014 Banca: INSTITUTO AOCP Órgão: UFGD Prova: INSTITUTO AOCP -
2014 - UFGD - Biomédico
Referente à análise microbiológica da água, assinale, dentre os meios de 
culturas descritos a seguir, a alternativa que aponta o mais indicado para a 
análise da água.
•AÁgar Nutriente (NA)
•BÁgar Löwenstein-Jensen (LJ).
•CÁgar Saboraud (AS)
•DÁgar Regan-Lowe (RL).
•EÁgar Cystine Lactose Electrolyte Defcient (CLED)
QUESTÃO 1
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/instituto-aocp
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufgd
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/instituto-aocp-2014-ufgd-biomedico
Meio de Ágar Chocolate é amplamente utilizado para o cultivo de 
microrganismos exigentes, embora cresçam neste meio quase todos os 
tipos de microrganismos. 
À base do meio, é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em 
temperatura alta, o que faz com que as hemácias lisem, liberando 
hemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos 
microrganismos exigentes. 
ÁGAR CHOCOLATE
UTILIDADE: Crescimento de microrganismos exigentes Haemophilus spp., Neisseria spp., 
Branhamella catarrhalis e Moraxella spp.
ÁGAR CHOCOLATE
PREPARO:
1. Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante;
2. Esterilizar em autoclave;
3. Esfriar a base à temperatura de aproximadamente 80ºC;
4. Adicionar 5 ml de sangue desfibrinado de cavalo para cada 
100 ml de base;
5. Homogeneizar bem até lisar totalmente as hemácias e o meio 
apresentar uma cor castanho escuro
6. (chocolate);
7. Distribuir em placas de Petri de 90 mm de diâmetro.
ÁGAR CHOCOLATE
INTERPRETAÇÃO
• Cor original do meio: castanho escuro (chocolate).
• Colônias de tamanho pequeno a médio, com pigmento amarelo: sugestivo 
de Neisseria spp,
• Branhamella catarrhalis ou Moraxella spp.
• Colônias pequenas e delicadas, com pigmento creme claro: sugestivo de 
Haemophilus spp.
É um meio rico e superior a outros meios de cultivo destinados para o 
isolamento de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis , pois 
contém em sua fórmula antibióticos que inibem o crescimento de 
Neisserias saprófitas e outras bactérias, quando em amostras colhidas de 
sítios contaminados.
ÁGAR TAYER-MARTIN CHOCOLATE
ÁGAR TAYER-MARTIN MODIFICADO
UTILIDADE: Usado para o isolamento seletivo de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria
meningitidis, a partir do material de investigação (antibióticos no meio).
Ano: 2016 Banca: Prefeitura de Fortaleza - CE Órgão: Prefeitura de 
Fortaleza - CE Prova: Prefeitura de Fortaleza - CE - 2016 - Prefeitura de 
Fortaleza - CE - Farmacêutico Bioquímico (Edital nº 97)
Os meios de cultura Ágar chocolate e o Thayer Martin modificado são 
usados para recuperação de:
•ANeisseria spp e Haemophilus spp respectivamente.
•BHaemophilus spp e Neisseria gonorrhoeae respectivamente. 
•CNeisseria spp e Sreptococcus spp respectivamente.
•DSreptococcus spp e Stafilococcus spp respectivamente.
QUESTÃO 2
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/prefeitura-de-fortaleza-ce
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/prefeitura-de-fortaleza-ce
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/prefeitura-de-fortaleza-ce-2016-prefeitura-de-fortaleza-ce-farmaceutico-bioquimico-edital-n-97
Ano: 2018 Banca: CESPE Órgão: EBSERH Prova: CESPE - 2018 - EBSERH -
Biomédico
Julgue o item que se segue, acerca do preparo de meios de cultura.
O meio de cultura ágar chocolate é obtido pela adição de sangue de cavalo,
carneiro ou de coelho em alta temperatura, fazendo que as hemácias lisem,
liberando hemina e hematina, o que dá origem à cor castanho-escura.
•Certo 
•Errado
QUESTÃO 3
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/cespe
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ebserh
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/cespe-2018-ebserh-biomedico
Ano: 2014 Banca: INSTITUTO AOCP Órgão: UFGD Prova: Instituto AOCP - 2014 - UFGD - Farmacêutico
Um homem de 23 anos foi levado ao pronto atendimento com fortes dores de cabeça, rigidez de nuca,
vômitos frequentes e confusão mental. Foram solicitados vários exames, entre eles, cultura de líquor, que
apresentou crescimento de colônias de Neisseria meningitidis. Qual dos meios de cultura a seguir propicia
especificamente o crescimento de Neisseria gonorroeae e Neisseria meningitidis?
•AStuart.
•BÁgar nutriente.
•CÁgar Thayer-Martin chocolate.
•DCaldo selenito.
•EÁgar sangue.
QUESTÃO 4
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/instituto-aocp
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufgd
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/instituto-aocp-2014-ufgd-farmaceuticoAno: 2017 Banca: IBFC Órgão: EBSERH Prova: IBFC - 2017 - EBSERH - Biomédico -
(HUGG-UNIRIO)
Assinale a alternativa correta. O meio de cultura utilizado em laboratórios de
microbiologia que é rico e superior a outros meios de cultivo destinados para o
isolamento de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis, pois contém em sua
fórmula antibióticos que inibem o crescimento de Neisserias saprófitas e outras
bactérias, quando em amostras colhidas de sítios contaminados, denomina-se:
•AÁgar MacConkey
•BÁgar Cled
•CÁgar Thayer-Martin Chocolate
•DLöwenstein Jensen
•EMiddlebrook Enrichment
QUESTÃO 5
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/ibfc
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ebserh
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/ibfc-2017-ebserh-biomedico-hugg-unirio
Ano: 2013 Banca: IBFC Órgão: EBSERH Prova: IBFC - 2013 - EBSERH – Biomédico
Faça a associação correta entre os meios de cultura e suas características:
A) Agar Mac Conkey.
B) Agar Cled.
C) Agar Chocolate.
1 - Usado para isolamento e quantificação de microrganismos presentes em amostras de urina.
2 - À base do meio é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em temperatura alta, o que faz com
que as hemácias lisem, liberando hemina e hematina, compostos fundamentais para o crescimento dos
microrganismos exigentes.
3 - O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram positivos especialmente enterococos e
estafilococos.
•AA1, B2, C3
•BA2; B3; C1
•CA3; B1; C2
•DA3; B2; C1
QUESTÃO 6
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/ibfc
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ebserh
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/ibfc-2013-ebserh-biomedico
Ano: 2014 Banca: IADES Órgão: UFBA Prova: IADES - 2014 - UFBA – Biomédico
Em relação aos meios de cultura para uso em microbiologia, assinale a alternativa correta.
•ADiferentes microrganismos necessitam de diferentes suplementos. Um exemplo é o ágar chocolate,
utilizado no crescimento de microrganismos exigentes como Haemophilus spp.
•BEm vários preparos, há a necessidade de se adicionar antibióticos aos meios. Essa adição deve ser feita
antes da autoclavação.
•CO ágar é muito utilizado para cultura de bactérias, fungos e vírus.
•DOs meios mais usados são o ágar simples e o ágar Sabouraud. O primeiro, por ter pH mais ácido,
favorece o crescimento de bactérias. O segundo, por ter pH neutro, favorece o crescimento de fungos
filamentosos.
•EQuando o meio for distribuído após a autoclavação, os tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou
materiais auxiliares, obrigatoriamente, devem ser estéreis, e os meios devem ser autoclavados com as
tampas fechadas.
QUESTÃO 7
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/iades
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufba
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/iades-2014-ufba-biomedico
Ano: 2014 Banca: IADES Órgão: EBSERH Prova: IADES - 2014 - EBSERH - Nível Superior - Biomédico
Em relação aos meios de cultura para uso em microbiologia, assinale a alternativa correta.
•ADiferentes microrganismos necessitam de diferentes suplementos. Um exemplo é o ágar chocolate, utilizado no
crescimento de microrganismos exigentes como Haemophilus spp.
•BEm vários preparos, há a necessidade de se adicionar antibióticos aos meios. Essa adição deve ser feita antes da
autoclavação.
•CO ágar é muito utilizado para cultura de bactérias, fungos e vírus.
•DOs meios mais usados são o ágar simples e o ágar Sabouraud. O primeiro, por ter pH mais ácido, favorece o
crescimento de bactérias. O segundo, por ter pH neutro, favorece o crescimento de fungos filamentosos.
•EQuando o meio for distribuído após a autoclavação, os tubos, frascos, placas, pipetas e vidrarias ou materiais
auxiliares, obrigatoriamente, devem ser estéreis, e os meios devem ser autoclavados com as tampas fechadas.
MESMA QUESTÃO!!!
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/iades
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ebserh
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/iades-2014-ebserh-nivel-superior-biomedico