Edição de genomas - ZFNs, TALENs, CRISPR/Cas9

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Edição
de 
genomas
ZFN , TALEN e CRISPR
- Par de domínios da endonuclease FokI flanqueado por dois domínios de
ligação a DNA sítio-específicos. Após a ligação desses domínios, FokI
dimerizam e acabam quebrando a dupla fita de DNA
ZFN 
(Zinc-Finger nucleases)
- Cada dedo de zinco
reconhece três nucleotídeos.
Uma série de ZFN pode
reconhecer uma sequência
mais longa, mas acaba
afetando especificidade.
TALEN (transcription activator-like effector
nucleases)
- TALE é um domínio de ligação ao DNA.
Semelhante a ZFN, a especificidade vem
da interação proteína-DNA. Cada TALE 
 reconhece um nucleotídeo e um arranjo
de vários TALEs possibilita reconhecer
uma sequência maior. A atividade de cada
domínio TALE é específica e podem ser
usados combinadamente sem problemas
de interações entre as ligações.
- Os motivos TALE também estão ligados a
endonuclease FokI.
CRISPR-Cas9 (clustered regularly interspaced short
plaindromic repeats)
- é uma forma de proteção de bactérias e arqueas contra
invasores.
- proteínas "guardam" um pedaço do DNA do invasor,
integrando-o no lócus crispr
- o lócus crispr é transcrito dando origem a forma madura
do crRNA associado a Cas9
- o crRNA associado a Cas9 reconhece e cliva o DNA
estranho quando invadir a bactéria novamente.
Sistema mediado por interações RNA-DNA -> vantagens em
relação a ZFN e TALEN: mais fácil de ser delinado o alvo.