MYCOBACTERIUM

Prévia do material em texto

Mycobacterium
MICROBIOLOGIA VETERINÁRIA
1
Universidade Estadual do Ceará – UECE
Faculdade de Veterinária – FAVET
Ana Isabel Resende Matos 
• Domínio: Bactéria. .
• Ordem: Actinomycetales. 
• Família: Mycobacteriaceae.
• Gênero: Mycobacterium. 
• Espécies: Mais de 178 espécies e 13 
sub-espécies. 
2
Taxonomia 
3
Taxonomia 
Micobactérias Não Tuberculosas, 
atipícas, raramente ou potencialmente 
patogênicas, ambientais.
Micobactérias típicas, 
estritamente patogênicas.
Potencialmente patogênicas.
•Bacilos retos ou encurvados, 
cocobacilos, filamentosos ou 
formas ramificadas;
• Grande maioria - Saprófitas;
• Aeróbios obrigatórios; 
• Gram positivos; 
• Desprovidos de flagelo; 
• Não formadores de esporos; 
• Parece celular: 
• Camada de peptideoglicano (ácido 
N-glicolilmurâmico). 
• Arabinogalactano.
• Ácidos micólicos.
(COMPLEXO ARABINOGALACTANO – 
PEPTIDEOGLICANO)
• Proteínas e lipídeos livres.
4
Morfologia 
Conferindo caráter 
hidrofóbico. 
5
Comportamento Tintorial 
• Coloração tintorial por Gram. 
• Devido ao alto teor lipídico – resistem à descoloração por 
ácido ou álcool – “Alcool – acido resistentes”
• Coloração de Ziehl – Neelsen:
• Uso de fucsina fenicada aquecida.
• Microscópia de fluorescência: 
• Coloração por auramina
• Coloração por Kinyoun.
• Uso de fucsina. 
 
Disponível: 
https://www.luciacangussu.bio.br/atlas/
mycobacterium-spp/
• Resistentes a influências do meio:
• Variação de temperatura, pH e depleção 
de nutrientes (Nyka 1974, Hall-Stoodley & 
Lappin-Scott 1998, Primm et al. 2004).
• Solo, vegetações e água (tratada ou 
não)
• Sobrevivem por longos períodos.
• Material cirúrgico.
•*Micobactérias Não Patogênicas: 
• Isoladas em diversas partes do 
corpo;
5
Habitat Usual 
Devido a sua adaptação ao ambiente intracelular, 
podemos encontrar nos animais.
7
VIRULÊNCIA
Os fatores de virulência são necessários aos microrganismos 
patogênicos para invadir, colonizar, sobreviver, multiplicar no 
interior das células do hospedeiro e causar doença.
❖ Parede celular rica em ácido micólico 
(ácidos graxos de cadeia longa):
• Não cora pelo gram (Ziehl-Neelsen)
• Exige meios especiais com bastante 
lipídeo
• Demora muito tempo para crescer
• Resistente no meio ambiente
• Parasita intracelular de macrófagos
8
VIRULÊNCIA
9
VIRULÊNCIA
PAMP (Ácido micólico)
PRR (TLR2)
10
VIRULÊNCIA
11
VIRULÊNCIA
Imagem: Microscopia óptica de Mycobacterium avium após coloração de Ziehl-Nielsen
12
FORMAS DE DOENÇAS
Mycobacterium
Mycobacterium 
tuberculosis
Mycobacterium 
bovis
Mycobacterium 
avium
Mycobacterium 
leprae
Outras 
micobactérias 
13
FORMAS DE DOENÇAS
• 1882: Bacilo de Koch
Mycobacterium tuberculosis
14
FORMAS DE DOENÇAS
Mycobacterium tuberculosis
• Primatas, principalmente humanos
Tuberculose pulmonar: 
15
FORMAS DE DOENÇAS
Tosse crônica, escarro, 
febre, suor nourno, perda 
de peso, falta de apetite, 
cansaço fácil e dores 
muculares.
Dificuldade na respiração, 
eliminação de sangue 
(Hemoptise) e acúmulo de 
secreção na pleura 
pulmonar.
Mycobacterium tuberculosis
• Vive apenas nas pessoas (ar)
16
FORMAS DE DOENÇAS
Tuberculose ativa
Outros tipos de tuberculose
Mycobacterium tuberculosis
17
FORMAS DE DOENÇAS
Alvéolos pulmonares
Nódulos linfáticos
CérebroOssos PulmõesRins
Corrente sanguínea
Granuloma
Infecção 
Mamíferos, principalmente bovinos. 
18
FORMAS DE DOENÇAS
Mycobacterium bovis
Mamíferos, principalmente bovinos.
Sintomas semelhantes à tuberculose 
19
FORMAS DE DOENÇAS
Mycobacterium bovis
Queda no ganho de peso
Diminuição na produção de leite
Descarte precoce
Eliminação de animais de alto 
valor zootécnico
Condenação de carcaças
Morte de animais
Perda de credibilidade da unidade 
de criação
Mycobacterium bovis
Transmissão: 90% das infecções ocorrem por 
via respiratória.
Via oral:
• consumo de leite e ou produtos lácteos 
não pasteurizados;
• lesões extra pulmonares.
 Via respiratória:
• técnicos de laboratório;
• trabalhadores da indústria de carne;
• indivíduos que lidam com animais 
doentes.
20
FORMAS DE DOENÇAS
trato respiratório
trato digestório
mucosas
pele com solução de 
continuidade
Mycobacterium bovis
21
FORMAS DE DOENÇAS
Invasão dos alvéolos 
pelos bacilos
Multiplicação M. bovis 
dentro dos macrófagos
Formação de granuloma 
no foco inicial
Desenvolvimento da 
resposta imune e de 
hipersensibilidade 
retardada 
Destruição de tecidos 
pelo próprio hospedeiro
Propagação do bacilo 
para o primeiro 
linfonodo que recebe a 
drenagem linfática 
proveniente da infecção.
Resistência (métodos físicos)
Os métodos físicos que atuam no controle dos microrganismos são classificados de acordo com 
a sua ação. Estes agentes desnaturam proteínas, enzimas, DNA e alteram permeabilidade da 
membrana celular.
❖ Métodos físicos que ultrapassam a resistência das micobactérias.
• Calor: Acima de 75°C; • Radiação ultravioleta:
- Consegue alterar e causar danos no DNA; 
- Autoclavação: 120°C por 20 minutos;
- Pasteurização lenta: 65°C por 30 minutos;
- Pasteurização rápida: 72 a 74°C por 15-20 segundos;
- Fervura;
Mycobacterium bovis
22
Temperatura de inativação 
As micobactérias são mais resistentes a esses tipo de agentes químicos do que aos 
agentes físicos.
Desinfetantes
Antibióticos
Resistência (agentes químicos) 
Antibacteriano comum
23
Crescimento das Micobacterias
Crescimento rápido Crescimento lento
Colônias visíveis em ate 7 dias Colônias visíveis em mais de 7 dias 
M. kansasii 
M. marinum
M. avium 
M. intracellulare
M. Fortuitum
M. peregrinum
35 a 37°C
24
Meios de Cultura para Micobactérias
Para o crescimento, podem ser utilizadas os meios sólidos e os meios líquidos. 
Meios sólidos 
• Morfologia colonial é variável podendo ser 
lisa ou rugosa
• Pigmentada e não pigmentada 
25
Lowenstein-Jensen (LJ);
• Meio de cultura seletivo utilizado no 
isolamento inicial de micobactérias;
• Crescimento lento;
• Contêm sais definidos, glicerol e substâncias 
orgânicas complexas.
• O meio de LowensteinJensen contém 0,75% de glicerina e 
permitem o crescimento tanto do bacilo humano como o do 
bovino
26
Meios Sólidos
• Contêm sais, vitaminas, albumina, 
catalase, glicerol.
• São utilizados para observar a morfologia 
das colônias.
• Facilita o crescimento das micobactérias 
fastidiosas e resistentes à isoniazida.
• Podem ser utilizados para antibiograma.
27
Middlebrook 7h10 e o 7h11 
Middlebrook 7H9
• Crescimento é mais rápido do que 
em meios de cultura complexos
• Crescimento de culturas puras de 
micobactérias.
28
Meio líquido
• Contem: caldo Middlebrook 7H9, sensor 
fluorescente sensível ao oxigênio
• Cultura não seletivo para recuperação de 
micobactérias
29
BACTEC MYCO LYTIC
Meios de Cultura para Micobactérias
Espécies e seus respectivos meios
• Mycobacterium tuberculosis: Lowenstein-Jensen (LJ) 
• Mycobacterium leprae: não cresce
• Mycobacterium bovis: StoneBrick
• Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (Map): Herrold (HEYM) ou Löwenstein 
–Jensen (com adição de micobactina)
• Mycobacterium canettii: Middlebrook 7H10 agar
• Mycobacterium kansasii: agar Mid-dlebrook
30
o Testes bacteriológicos:
- Coloração Ziehl-Neelsen.
Métodos de diagnósticos
Investigação laboratorial de doenças bacterianas é necessária para identificar o agente etiológico e, 
algumas vezes, para determinar a sensibilidade a antimicrobianos dos patógenos.
▪ Métodos Diretos
- Coloração Auramina. - Coloração Kinyoun
Modificação da Ziehl-Neelsen, 
porém não utiliza calor.
31
Meios de cultura:
Meio Lowenstein-Jensen; 
Caldo MGIT;
PADRÃO 
OURO
MÉTODOS DIRETOS
Coletas para o isolamento de Micobacterias 
• Escarro
• Biopsia e materiais ressecados 
de órgãos que se comunicam 
com o exterior
• Secreção de cavidade aberta
Contaminadas naturalmente Materiais colhidos por punção: 
• Exsudatos
• Líquidos articulares e
 
• Cefalorraquidianos
32
- PCR (Proteína C- reativa).
- TMA(Transcription-mediated amplification).
Métodos para amplificação 
do DNA de micobactérias. 
Amplifica o RNA
Amplifica o DNA
“Fazer várias cópias a partir 
de poucas”
33
Testes Moleculares
34
- Teste da urease. 
Utilizado para identificar as micobactérias 
que têm a capacidade de hidrolisar a uréia. 
- Teste da catalase.
- Redução do nitrato. Diferenciar 
as espécies.
35
Testes bioquímicos
o Métodos Diretos: o Métodos Indiretos:
- Meio de Stonebrink;
- PCR;
- Avaliação da resposta 
imunológica;
36
Métodos de diagnóstico da Tuberculose bovina
Teste da PPD: avalia a resposta imune celular.