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REFRIGERAÇÃO DE SÊMEN EQUINO VANTAGENS Facilidade de comercialização Agilidade no transporte/ baixo custo Previne acidentes Ganho genético para a raça Maior controle na transmissão de doenças DESVANTAGENS Custo da biotecnologia (manipulação e envio) O sêmen de alguns garanhões não refrigera bem Maior monitoramento do ciclo das éguas (custo) PORQUE REFRIGERAR O SÊMEN Para cada 10°C de redução na temperatura, o metabolismo celular é reduzido em 50% CÁLCULO DAS DOSES INSEMINANTES Dose inseminante: 1000 x 10^6 espermatozoides moveis Exemplo: Volume 50mL Concentração 100 x 10^6 espermatozoides/mL Motilidade 80% Espermatozoides móveis totais: 50 x 100 x 0,80 = 4000 x 10^6 Número de doses: 4000 x 10^6/ 1000 x 10^6 = 4 doses (12,5mL cada) Volume/ dose: 12,5mL de sêmen + 25mL de diluente (1:2) Volume inseminante: 37,5mL (sêmen + diluente) Sêmen Temperatura ambiente Metabolismo máximo Acidificação do pH Peroxidação dos lipídios Danos celulares permanentes Sêmen 5°C Redução do metabolismo Mais lentos Acidificação do pH Peroxidação dos lipídios Aumenta a longevidade do sêmen DILUIÇÃO Proteger os espermatozoides das condições desfavoráveis Prolongar a viabilidade do sêmen Fornecer energia aos espermatozoides Tratamento antibiótico Componentes dos diluidores: Leite em pó desnatado: proteção de membrana Açúcares: fonte de energia e crioproteção (glicose/ lactose/ sacarose) Bicarbonato: ajuste de pH Antibiótico: inibe o crescimento bacteriano (penicilina/ gentamicina/ amicacina) DILUIDORES COMERCIAIS Botu-sêmen (Botupharma®) Botu-special (Botupharma®) Botu-gold (Botupharma®) Botu-turbo (Botupharma®) Max-sêmen plus (HEG Agrofarma®) Inra (IMV®), Biodux (Biodux®) Diluição: de 25 a 50 x 10^6/ mL TRANSPORTE Até 12 horas De 12 a 24 horas De 24 a 48 horas MANIPULAÇÃO DO SÊMEN CENTRIFUGAÇÃO X NÃO CENTRIFUGAÇÃO ACONDICIONAMENTO O sêmen deve ser acondicionado em sacos plásticos ou tubos O material deve estar sempre identificado com: nome do garanhão, data e hora da colheita, concentração por mL, volume total, motilidade e vigor COMO MINIMIZAR DANOS AOS ESPERMATOZOIDES Manipulação correta do sêmen Diluição o mais rápido possível – para minimizar efeitos deletérios do plasma seminal Diluir o sêmen corretamente – o diluidor protege o sêmen durante a queda da temperatura Taxa de refrigeração adequada – evitar curvas de refrigeração rápidas e oscilações de temperatura TIPOS DE DISPOSITIVOS DE TRANSPORTE Refrigeração ativa (548 MOD-X sêmen cooler, ARS) Refrigeração passiva (mais utilizados): Botutainer® (5°C/ 48 horas) Botu-Box® (15°C/ 24 horas) Equitainer® (5°C/ 48 horas) Botu-Flex® (15°C/ 24 horas ou 5°C/ 48 horas) (caixa projetada especialmente para o transporte de sêmen) ESTUDOS EM EVOLUÇÃO RELACIONADOS A REFRIGERAÇÃO DE SÊMEN Adequar protocolo para a raça manga-larga e garanhões de outras raças que refrigeram mal Retirada de plasma seminal Diluentes com estimulantes de motilidade Curvas de refrigeração Efeito da suplementação com ômega 3 e L-carnitina ANÁLISE DO SÊMEN REFRIGERADO Ao receber o sêmen há que homogeneizá-lo Uma pequena fração deve ser colocada em banho maria por 5 minutos a 37°C Avaliar a motilidade e o vigor sob microscópio Contar a concentração espermática CONSCIENTIZAR OS VETERINÁRIOS DOS RISCOS DO MAU USO DA TÉCNICA Queda de fertilidade não aparente, mas significativa Obedecer a regras básicas Bom diluente Bom sistema de transporte Respeitar os limites de fertilidade X tempo (24 x 48 horas) Dose inseminante adequada GARANHÕES BAD COOLER (garanhões que refrigeram mal) Centrifugação ou Sperm Filter Botu-Special Botu-Turbo Botu-Crio (meio superior aos demais, possui crioprotetores – estimula os espermatozoides) Cushion Fluid (segura os espermatozoides) Equipure (gradiente de densidade diferente que realiza a seleção espermática onde só passam os melhores espermatozoides – com poucos defeitos e apenas os vivos) INSEMINAÇÃO COM SEMEN REFRIGERADO NA EXTREMIDADE DO CORNO UTERINO Dose inseminante: 100 – 400 milhões de espermatozoides moveis Inseminar a cada 24 horas (ideal) Induzir a ovulação – hCG + Deslorelina Ressuspender (Botu-Crio) Inseminar próximo à junção útero-tubárica
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