LISTA 5 - MICRO

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Débora Marroni
Eduardo Germano
Professora: LUCIENNE FRANÇA REIS PAIVA
Turno: MANHÃ
Curso: FARMÁCIA
DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA CLÍNICA 2021.1 
ATIVIDADE 5
ORIENTAÇÕES
Este exercício pode ser realizado em grupo (preferencialmente) ou
individualmente.
Para ser enviado até 01/06/2021pelo e-mail: luciennefranca@gmail.com
Para realizá-lo além de aulas teóricas (slides), livros, dentre outros,
consultarem as apostilas de aula prática 7 e apostila 8.
REFERENTE ÀS AULAS ONLINE E VÍDEOS-AULAS DE “INFECÇÕES DO TRATO
URINÁRIO - UROCULTURA”, “INFECÇÕES DO TRATO RESPIRATÓRIO SUPERIOR E
INFERIOR, DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DE HAEMOPHILUS” E “DIAGNÓSTICO
LABORATORIAL DOS BASTONETES GRAM-NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES”.
PARA FIXAÇÃO DO APRENDIZADO E PONTUAÇÃO DE A2.
mailto:luciennefranca@gmail.com
1. Foram visualizados vários bastonetes Gram negativos em um Gram de urina de uma paciente JAA, 22 anos: 
a. Quais as considerações a cerca da maneira correta de confeccionar o esfregaço?
Resposta: Exame de um esfregaço corado (Gram de gota de urina não centrifugada) = quando possível avaliar urina
rotina.
b. Qual a correlação do achado acima (vários bastonetes Gram negativos) com o resultado da urocultura?
Resposta: Coloração de Gram: realizado a partir da colônia ou do caldo de enriquecimento – sempre comparar com o
Gram da amostra biológica. Definição de morfologia: coco, bacilo ou cocobacilo é uma importante prova na chave de
identificação. Todo crescimento em placa de Ágar Sangue e Ágar Cled ou Brolacin deverá ser quantificado (o número
exato de colônias) e multiplicado pelo fator de diluição ⇒ 1000 (alça 1/1000) ou 100 (alça 1/100). O resultado deverá ser
reportado em UFC/ml. Todo crescimento puro de microrganismos ou de no máximo dois microrganismos, deverá ser
considerado (identificados os microrganismos e realizados os testes de sensibilidade).
c. Discutir os possíveis meios de culturas a serem utilizados e qual a técnica de plantio primário.
Resposta: Meios de cultura: CLED (BBL) ou Brolacin (Merck) ou Ágar Sangue / Ágar MacConkey / Teague. Para o
isolamento desses gêneros, utilizamos no plantio primário os meios de Ágar Sangue, um ágar seletivo e indicador (Ágar
MacConckey ou Teague) e um caldo de enriquecimento (Tioglicolato de sódio).
d. Na suspeita clínica de infecção do trato urinário por anaeróbios estritos é necessário a coleta de urina para
cultura por punção supra púbica. Descreva a metodologia desta coleta.
Resposta: Deverá ser realizada por médico e imediatamente enviada ao laboratório, devendo ser acondicionado em
geladeira até o momento do plantio.
2. As técnicas quantitativas de plantio utilizam alça de platina calibrada. Sobre essa questão é CORRETO
afirmar:
a) a semeadura do material biológico deve ser feito com a própria alça calibrada.
b) outros metais que não platina são resistentes e não perdem a calibração.
c) o inóculo deve ser feito com alça calibrada e a semeadura com alça comum.
d) não é necessário flambar a alça de platina antes do plantio.
e) em alguns casos pode-se substituir a alça calibrada pela alça comum sem alterar a cultura quantitativa.
3. Para coleta de urina para realização de urocultura devemos observar todas as normas abaixo, EXCETO:
a) Deverá ser colhida preferencialmente a primeira urina da manhã.
b) Caso não seja possível colher a primeira urina da manhã, devemos se possível esperar de 02 horas de estase vesical.
c) Deverá ser feita rigorosa assepsia antes da coleta, tanto em homens como em mulheres.
d) Em crianças deverá ser colocado saco coletor, precedido de rigorosa assepsia e trocado a cada 30 minutos.
e) Para diagnóstico de ITU, devemos colher o jato urinário inicial.
4. Considerando os conceitos de fisiopatologia das infecções do trato urinário (ITU), assinale A OPÇÃO
CORRETA:
a) Na maioria dos casos de ITU, a via de infecção é hematogênica.
b) O trato urinário acima da uretra não é estéril em pessoas saudáveis, e a uretra é normalmente colonizada com muitos
tipos diferentes de bactérias. 
c) A prevalência das infecções das vias urinárias varia com o sexo e a idade do paciente, mas a localização anatômica
da uretra feminina torna a mulher mais vulnerável a ITU do que o homem, independente da idade.
d) A síndrome uretral aguda apresenta queixas urinárias iguais aos sintomas clínicos de cistite, urocultura positiva, porém
com contagens (UFC/ml) baixas com isolamento de mesmos micro-organismos causadores de cistite em 50% dos casos e
acomete mais mulheres na pós-menopausa. 
e) Na maioria dos casos de ITU, a via de infecção é ascendente, ou seja, ocorre colonização do meato uretral, a
seguir uretra e bexiga, causando cistite. Nos casos de pielonefrite o agente etiológico ascende pelos ureteres,
alcançando o sistema pielocalicial.
5. Com relação à coleta de urina para realização de urocultura assinale a CORRETA:
a) a coleta do jato médio é a mais indicada, sendo sempre necessária a primeira urina da manhã.
b) para diagnóstico de ITU, a coleta de urina deverá ser feita sempre pela manhã em um recipiente de 10 mL de urina
contendo conservante.
c) nas crianças a coleta deverá ser realizada com saco coletor, aguardando-se um prazo mínimo de uma hora para a
criança poder urinar.
d) a quantidade mínima de urina para realização completa de uma urocultura é de 2 mL.
e) o prazo máximo de armazenamento à temperatura ambiente é de 1 hora e a urina refrigerada a 2-8 graus tem
uma estabilidade de até 12 horas após a coleta.
Tioglicolato
6. Sobre a interpretação do exame de cultura de urina, é CORRETO afirmar que:
a) O crescimento de mais de três bactérias em uma mesma semeadura, indica infecção grave e a identificação e
antibiograma de todas as bactérias devem ser realizadas o quanto antes. 
b) Para a realização da cultura de urina, é recomendado não realizar higiene íntima, pois isso pode interferir no resultado
do exame. 
c) Considera-se positiva a cultura com crescimento bacteriano de 105 unidades formadoras de colônia por ml de
urina (100.000 UFC/ml) colhida em jato médio de maneira asséptica. 
d) Qualquer crescimento de micro-organismos em cultura de urina deve ser considerada urocultura positiva, pois a urina
é estéril. 
e) Só é considerada positiva e identificado o micro-organismo, quando há sintomas de cistite.
7. JSC, 68 anos, sintomático respiratório, procurou Posto de Saúde após iniciar febre, prostração e sudorese
noturna. O médico suspeitou de uma grave pneumonia. 
a) Qual material biológico deve ser coletado para diagnóstico?
Resposta: Escarro: coletado por expectoração espontânea ou induzida.
Secreção traqueal, aspirado traqueal, secreção brônquica ou mini – BAL e BAL (lavado bronqueo-alveolar): Coleta e
procedimento determinados pela equipe Fisioterapia.
b) Após coleta correta do espécime clínico quais os exames devem ser realizados na amostra para um
diagnóstico correto de pneumonia?
Resposta: Cultura, antibiograma e Gram
Pesquisa e Cultura BAAR 
Pesquisa e Cultura Fungos
Avaliação da amostra: Critério de Murray & Washington -CULTURA AERÓBIA
Células epiteliais - inferior a 10 / campoLeucócitos (LPMN) - superior a 25 / campo
c) Explique como devem ser realizados, quais os possíveis meios de culturas a serem utilizados e qual a técnica
de plantio primário.
Resposta: Procedimento: Ao manusear o material escolher as partes purulentas e/ou sanguinolentas, evitar o máximo o
plantio das partes com muita saliva. Ao preparar o esfregaço para Gram fazer este homogêneo e fino e de preferência
usar lâminas novas.
Meios de Cultura - semear em:
1.
2. Ágar Chocolate
3. Ágar MacConkey
4. Ágar Sangue
Bacterioscopia: Gram - Exame a fresco
8. Conforme descrito no "Trato Respiratório: Critérios Nacionais de Infecções relacionadas à Assistência à
Saúde", a cultura positiva de micro-organismos do sítio de infecção corresponde a um dos critérios que define
faringite, laringite e epiglotite em pacientes sem ventilação mecânica invasiva (ANVISA, 2009). Segundo
Oplustil et al. (2010), as culturas de orofaringe, tonsila e faringe são os exames do Trato Respiratório Superiorfrequentemente solicitados ao laboratório de Microbiologia Clínica. Sabendo-se da importância desse
procedimento, do conhecimento da microbiota residente e das ferramentas do controle de qualidade, qual dos
micro-organismos abaixo representa uma provável contaminação em uma cultura de secreção de orofaringe?
a) Streptococcus pyogenes 
b) Staphylococcus aureus 
c) Haemophilus influenzae 
d) Streptococcus não hemolíticos 
e) Pseudomonas spp
9. Nas infecções do trato respiratório superior, o exame direto pelo Gram é útil no diagnóstico de:
a) coqueluche
b) sinusite
c) faringite estreptocócica
d) amigdalite por Neisseria gonorrhoeae
e) angina de Vincent
10. O escarro é aceitável para cultura quando contém:
a) muito muco e poucas bactérias
b) grande nº de células epiteliais e poucos leucócitos
c) muitas bactérias e muitas células epiteliais
d) muitos leucócitos e poucas células epiteliais
e) muitas células epiteliais e muitos histiócitos
11. Membros do gênero Haemophilus são bacilos Gram-Negativos, geralmente pleomórficos, anaeróbios
facultativos, imóveis e constituem parte integrante da microbiota normal do trato respiratório superior.
Apresentam colônias acinzentadas, translúcidas e mucóides. Quanto ao seu isolamento, é CORRETO afirmar:
a) Haemophilus influenzae produz turvação visível no caldo de cultura inoculado com sangue.
b) São isolados de secreção conjuntival, secreção auditiva, punção pulmonar, líquido pleural e escarro se cultivados em
ágar sangue.
c) Devem ser utilizadas amostras de líquor ou sangue para cultura após iniciada antibioticoterapia.
d) Em complementação às exigências nutritivas, uma atmosfera de CO2 de 5 - 10 % e umidade são necessárias
para o desenvolvimento de Haemophilus
e) Em complementação às exigências nutritivas uma atmosfera de O2 de 2 - 5 % e umidade são necessárias para o
desenvolvimento de Haemophilus.
12. Algumas culturas podem apresentar crescimento de micro-organismos oriundos da microbiota anfibiôntica
normal de sítios anatômicos próximos do verdadeiro local de infecção e, por esse motivo, é importante
quantificá-los para se valorizar ou não o resultado. Nesse contexto, a cultura quantitativa é útil para qual das
amostras clínicas abaixo relacionadas?
a) sangue
b) lavado broncoalveolar
c) líquido cefalorraquidiano 
d) fezes 
e) líquido sinovial
13. Uma criança de 3 meses, apresentando quadro de choro intenso, com febre há 2 dias, prostrada e negando
alimentação chega ao serviço de urgência médica, onde foram constatados abaulamento discreto da fontanela,
febre de 38,9°C, rigidez de nuca e prostração acentuada. Foram realizados alguns exames, como hemograma,
punção lombar, glicemia e cultura para micro-organismos comuns. A bacterioscopia do líquor pela coloração
de Gram revelou a presença de bacilos Gam-negativos finos. O material da punção foi semeado em ágar-
sangue de carneiro, no qual não houve crescimento após 72 horas de incubação a 35°C, em atmosfera de CO2
variando de 5% a 7%. Considerando a existência de micro-organismos na amostra e as condições de cultivo
utilizadas, o provável agente etiológico envolvido no quadro infeccioso é:
a) Legionella pneumophila 
b) Neisseria meningitidis 
c) Pseudomonas aeruginosa 
d) Haemophilus influenzae 
e) Streptococcus pneumoniae
14. Além da prova de oxidase, cite quais os testes complementares devem ser realizados na triagem de bactéria
Gram negativa não fermentadora?
Resposta: Prova de fermentação/oxidação, citrocromo oxidase, gelatinase, lisina descarboxilase, DNAse.
15. Sobre as técnicas de identificação do gênero Pseudomonas, é INCORRETO afirmar:
a) Possuem resultado positivo no teste de oxidase e crescimento em Ágar Sangue a 42°C.
b) Em ágar Cetrimide há crescimento e produz comumente uma coloração esverdeada ou azulada, devido à produção
de pigmentos hidrossolúveis como pioverdina e piocinina.
c) Ao microscópio, com a coloração de Gram, possuem cor rosada devido a fucsina, por isso são classificados
cocobacilos Gram negativos.
d) São classificados como bacilos não fermentadores.
e) Em ágar Cetrimide há crescimento e produz comumente uma coloração vermelha/amarronzada, devido à
produção de pigmentos hidrossolúveis como a piorrubrina.
16. Acinetobacter baumannii é atualmente importante patógeno de infecções nosocomiais (adquiridas em
hospital). Ao Gram apresentam-se como:
a) Bacilos longos Gram-negativos
b) Bastonetes Gram-positivos
c) Cocobacilos Gram-negativos 
d) Diplococos Gram-positivos
e) Cocobacilos Gram-positivos
17. Assinale o teste/prova de identificação que NÃO auxilia na definição do gênero/espécie de bastonetes
Gram negativos não fermentadores:
a) prova da Dnase
b) oxidação da glicose em meio de OF
c) fermentação de lactose 
d) reação de citocromo oxidase
e) crescimento em Ágar Sangue a 42oC
18. Assinale a alternativa CORRETA:
a) Acinetobacter spp é um bacilo não fermentador, oxidase positiva, motilidade positiva e produtor de pigmento verde.
b) Burkholderia cepacia é um complexo bacteriano que é composto por cocos Gram-positivos, oxidase positiva
e motilidade negativa.
c) Pseudomonas aeruginosa é um bacilo não fermentador que produz os pigmentos pioverdina, piocianina e piorrubrina.
d) Pseudomonas aeruginosa é uma enterobactéria, catalase positiva, oxidade positiva e produtora do pigmento
pioverdina.
e) Stenotrophomonas maltophilia é um bacilo não fermentador, oxidase positiva, Dnase negativa e produtora do
pigmento piorrubrina.
19. A identificação dos bacilos Gram negativos não fermentadores é um grande desafio para o laboratório de
microbiologia, pois acrescido à dificuldade na identificação, há um aumento na prevalência destes agentes em
infecções nosocomiais (hospitalares) e resistência aos antimicrobianos. Em relação à Pseudomonas aeruginosa
é CORRETO afirmar:
a) Pacientes internados em UTI e submetidos à ventilação mecânica são de alto risco para aquisição de
pneumonias pela P. aeruginosa.
b) A recuperação de P. aeruginosa do trato respiratório de um paciente com ventilação mecânica é indicativo de uma
infecção verdadeira por este agente.
c) A cultura de fezes em pacientes com câncer e neutropênicos com objetivo de isolamento de P. aeruginosa tem valor
relevante.
d) P. aeruginosa é sempre oxidase positiva, mas pode apresentar oxidase fraca, e cresce a 42ºC.
e) O meio ágar MacConkey é um meio seletivo utilizado na rotina do laboratório de microbiologia e também um meio
diferencial que ajuda na identificação de diferentes cepas de Pseudomonas.
20. O teste de Dnase é muito utilizado no laboratório de microbiologia clínica na diferenciação bacteriana entre
gêneros e até entre espécies. A identificação de bacilos Gram negativos não fermentadores é altamente
complexa, mas importante, pois neste grupo bacteriano encontram-se espécies patogênicas, multirresistentes,
de grande importância em infecções relacionadas à assistência à saúde. O teste de Dnase é utilizado em
algumas chaves de identificação para bacilos Gram negativos não fermentadores, e é muito utilizado nos
laboratórios de rotina para diferenciar:
a) Acinetobacter baumanii e Pseudomonas aeruginosa;
b) Pseudomonas aeruginosa e Stenotrophomonas maltophilia;
c) Pseudomonas aeruginosa e Burkholderia cepacia;
d) Burkholderia cepacia e Stenotrophomonas maltophilia;
e) Escherichia coli e Acinetobacter baumanii.
21. Paciente internado na UTI de um hospital fez urocultura e o resultado foi o crescimento de cocobacilos Gram
negativos, não fermentadores, com oxidase e motilidade negativa. Este mesmo paciente apresentava uma
úlcera da perna que eliminava uma secreção amarelo/esverdeada com cheiro de fruta e houve crescimento na
cultura de bacilo Gram negativo não fermentador, oxidase e motilidade positiva com brilho metálico no Ágar
Sangue e cor verde no meio Ágar MacConkey. O resultado mais provável dessas duas culturas,
respectivamente é:
a) Acinetobacter baumanii e Pseudomonas aeruginosa;
b) Pseudomonas aeruginosa e Stenotrophomonas maltophilia;
c) Escherichia coli e Acinetobacter baumanii;
d) Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcusaureus;
e) Burholderia cepacia e Escherichia coli.