Diagnóstico genético

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Marianna Lopes – Genética, 4° semestre FTC 
D I A G N Ó S T I C O citogenetico 
DEFINIÇÃO 
A citogenética foi definida a partir dos estudos de Tijo 
e Levan (1956), que desenvolveram técnicas efetivas 
para análise cromossômica e estabeleceram o número 
cromossômico humano normal (23 pares = 46) 
• Citogenética: Estudo, em microscópio óptico, 
dos cromossomos e suas variações, tanto de 
número quanto de estrutura 
o É atualmente considerada uma pesquisa 
biológica importante em todas as áreas 
da genética clínica e molecular 
Cariótipo humano 
O cariótipo é o complemento cromossômico típico de 
cada espécie, isto é, a organização ou montagem dos 
cromossomos de uma certa espécie considerando 
seus tamanhos e suas morfologias (ordem 
decrescente de tamanho) 
Condensação do DNA 
Sabendo que os cromossomos são formados de DNA 
compactado, tem-se diferentes níveis de condensação 
até a estrutura cromossômica propriamente dita 
• Cadeia simples de DNA 
• Filamento de cromatina (DNA com histonas) 
• Cromatina condensada em intérfase com 
centrômeros 
• Cromatina condensada em prófase (duas 
cópias da molécula de DNA) 
• Cromossomo em metáfase (densos) 
PADRÕES DE BANDEAMENTO 
Bandeamento é o tratamento dos cromossomos, que 
envolve desidratação, envelhecimento, desnaturação 
ou digestão enzimática, seguida da incorporação do 
corante DNA-específico, objetivando a separação de 
regiões cromossômicas em bandas claras e escuras ou 
coloridas (facilita a detecção de uma possível deleção, 
inserção, etc) 
• Idiograma: Esquema de referência para o 
bandeamento, que é um padrão internacional 
criado pelo International System for Human 
Cytogenetic Nomenclature (ISCN, 1995) 
Realização do cariótipo 
• Retirada de 5mL de sangue venoso (amostra 
padrão-ouro) 
• Adicionar fitoemaglutinina ao meio da cultura 
para estimular a mitose (fator de crescimento) 
• Cultivar a 37°C por 3 dias (72h) 
• Adicionar à cultura colchicina (antimitogênico 
específico para metáfase) e solução salina 
hipotônica (apenas para lavagem) 
o A metáfase é a fase de maior densidade 
dos cromossomos (mais visíveis ao MO) 
• Fazer a fixação das células com álcool 100% 
• Espalhar as células na lâmina com um pingo de 
água 
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/d5/Chromatin_chromosom.png
Marianna Lopes – Genética, 4° semestre FTC 
• Digerir com tripsina (faz quebra de proteínas 
contaminantes) e corar com Giemsa 
(específico para essas estruturas – azul/roxo) 
• Análise de “dispersão metafásica” 
• Montagem do cariótipo (atualmente usa-se 
sistemas automatizados com softwares que 
prescindem a análise 100% microscópica) 
o Captura da imagem em computador para 
montagem de cariótipo automático via 
padrões internacionais (idiograma) 
Bandeamento G (Giemsa) 
Técnica de bandeamento a partir do corante Giemsa, 
que dá a característica de alternância entre bandas 
claras e escuras (bem usada em alterações estruturais) 
Bandeamento C (centrômero) 
Técnica de bandeamento que marca os centrômeros 
para visualizar alterações, geralmente estruturais, 
próximas e se relacionam com regiões centroméricas 
TÓPICO 
 
Subtópico 
 
Instabilidade cromossômica e câncer 
Há uma relação íntima entre a instabilidade 
cromossômica () e os processos carcinogênticos