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resumo MÉTODO DE AGLUTINAÇÃO EM LÁTEX

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· MÉTODO DE AGLUTINAÇÃO EM LÁTEX:
- O que é?
> partícula inerte;
> durabilidade maior;
> látex sensibilizado com IgG humano;
> pesquisa presença de microorganismos no paciente através da reação imunitária de anticorpo/antígeno;
> aglutinação: presença de anticorpo específico para o antígeno absorvido;
> muito popular em laboratório clínico e pode ser executada manualmente com a aglutinação detectada pela observação visual da formação de grumos;
> aplicada em uma grande variedade de diagnóstico de infecções microbianas, marcadores imunológicos, dosagem de hormônios e drogas.
** fundo branco: hemácia;
** fundo preto: soro
- PCR (proteína C reativa):
> proteína de fase aguda produzida pelo fígado;
> presente em pequenas quantidades em pessoas hígidas (saudáveis);
> aumento exponencial na presença de infecções/inflamações (ex.: crise de apendicite);
> exame inespecífico;
> função anti-inflamatória e ajuda o sistema imunológico a combater “invasores”;
> látex revestido com anti-PCR (anticorpo específico) que liga a PCR no soro do paciente;
> valor de referência: 
# em pessoas sadias é inferior a 3 mg/L;
# entre 3 e 10 mg/L: inflamação leve (ex.: gengivite/resfriado), pessoas hipertensas, diabéticas, obesas, portadoras de insuficiência renal, etc.;
# acima de 10 mg/L: processos inflamatórios mais intensos;
# entre 10 e 40 mg/L: infecções virais fortes (gripes, catapora/tumores/doenças reumáticas);
# acima de 40 mg/L: infecção bacteriana.
** sepse: valores ultrapassam 200 mg/L
- ASO (anti-estreptolisina O):
> anticorpo produzido para combater infecções causadas por Streptococcus pyogenes;
> forte indicador dessas infecções;
> valor máximo entre a 3ª e a 5ª semana, retornando ao normal no 2º ao 4º mês;
> usado para detectar febre reumática, glomerulonefrite;
> valores de referência:
#200 UI/ml
** mais comum em látex
- Fator Reumatoide (látex):
> auto anticorpo produzido (IgA/IgM) nas doenças autoimunes que reage com o IgG;
> utilizado na pesquisa de doenças como lúpus, artrite reumatoide, entre outras;
> resultados alterados indicam a presença de doença autoimune, requerendo mais investigação para determinação de qual;
> valores de referência:
# 10 a 40 UI/mL 
** limite mínimo de quantificação: 10 UI/mL.
*** UI/ml = unidades internacionais por mililitros
- Fator reumatoide (Waaler-Rose):
> técnica de hemoaglutinação em placa para determinar o FR;
> antígeno: suspensão de hemácias de ovelha sensibilizadas com IgG de soro de coelho;
> usado para diagnóstico in Vitro;
> mais sensível do que o látex;
> valor de referência:
# até 8 UI/mL
- MÉTODO DILUIÇÃO SERIADA:
> usado para: PCR/FR/ASO/WAALER-ROSE/VDLR;
* PRIMEIRO PASSO (diluição - puro):
> SORO DO PACIENTE + REAGENTE ESPECÍFICO DE CADA EXAME (geralmente se utiliza 25μl de cada, EXCETO WAALER ROSE, QUE UTILIZA 20μl);
> agita por 2 min em movimentos circulares;
> amostra positivou, faz diluição seriada;
** amostra positiva fraca forma uma espécie de anel nas bordas;
** NÃO SE DILUI REAGENTE, APENAS AMOSTRA!
* PASSO DOIS (DILUIÇÃO SERIADA):
> 25μl DE SORO DO PACIENTE + 25μl DE SORO FISIOLÓGICO (em todos os poços) + 25μl DE REAGENTE (menos no poço reserva)
** soro do paciente colocado apenas no primeiro poço!!!
> homogeneíza o primeiro poço;
> 25μl no próximo poço;
> agita em movimentos circulares por 2 min;
> multiplica sempre por 2!
** multiplica até onde aglutinou pela sensibilidade. ex.: ASO = 200 UI/ml x 2 = 400 UI/ml 
> 1:2, 1:4, 1:8, 1:16; 1:32 etc.;
** sempre ter um poço reserva para colocar o restante da diluição
> meio + concentrado para o – concentrado;

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