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AGLUTINAÇÃO EM LATEX: (PCR, FR e ASLO). Látex-FR: reação de aglutinação indireta tendo como suporte, partículas de látex e como antígeno reagente a gamaglobulina humana agregada pelo calor e adsorvida as partículas. Técnica de alta sensibilidade porém pouca especificidade para casos de artrite reumatoide. Técnica: diluir o soro teste em tampão e distribuir de cada soro diluído em uma área distinta na placa de fundo escuro, adicionar o látex e misturar, observar a aglutinação até 2 min, comparando com o soro teste e com soros positivos e negativos. PCR: proteína sintetizada pelos hepatócitos , serve como teste de diagnostico inespecífico. Técnica: reativo látex anti PCR + amostra + aglutinação - aspecto leitoso Não considerar aglutinações após 5 min. REAÇÕES PARA SIFILIS: Os testes não treponemicos são aqueles que usam como antígenos um fosfolipídio o fosfatidilglicerol extraído do coração bovino e denominado cardiolipina. FTA- ABS Princípio do teste: os anticorpos anti treponema pallidum presentes no soro se ligam ao AG fixado na lâmina e são revelados por uma antigamaglobulina humana marcada com isotiocianato de fluoresceína. Utilizada lâmina quadriculadas contendo o antígeno T PALLIDUM fixado. A reação deve ser realizada conforme os controles: Soro controle positivo; soro controle negativo; Soro controle absorvedor ( ANTIGENOS DE TREPONEMA DE BOCA PARA NEUTRALIZAR O MESMO, e serve para controlar a qualidade do extrato absorvedor). Leitura: Positiva: treponemas aparecem fluorescentes Negativo: ausência da fluorescência Reação duvidosa ( boder line): repetir a ação com nova amostra de soro. Se persistir o resultado o diagnostico deve ser firmado com base nos dados clínicos. VDRL: Teste de micro floculação em lâmina. Presença ou não de anticorpos que reconhecem o antígeno cardiolipina. + floculação - não flocula. N- DNA: utilizado para detecção semiquantitativa do anticorpo anti-DNA em soro humano, auxilia no diagnóstico de lúpus. Técnica: anticorpos fluorescentes, as amostras do paciente são incubadas com substrato antigênico para permitir a ligação específica com autoanticorpos ao nDNA do cinetoplasto, se o nDNA estiver presente forma-se complexo antígeno anticorpo estável que após as lavagens é conjugado a fluoresceína Leitura: amostras + : cinetoplasto fluorescente - : não apresenta fluorescência. FATOR ANTI NUCLEAR: FAN: os anticorpos anti- nucleares também chamados de fatores antinucleares são usados para o diagnostico de doenças auto imunes. Técnica: lâmina contendo as células HEp-2 ( células de carcinoma de laringe, pois tem todas as etapas do carcinoma) + conjugado+ PBS e soros controles Leitura: controle negativo: núcleos corados em vermelho Controle positivo: fluorescência. HEp-2000: amostras dos pacientes são incubadas com substrato de antígeno que permite uma ligação especifica com os autoanticorpos com o núcleo da célula. Materiais: Controle positivo SSA/Ro : anticorpos IgG específicos para o antígeno SSA/Ro. Apresenta uma coloração pontilhado fino específica de anti SSA/Ro. Controle positivo homogêneo: anticorpos igG específico para DNA e ou antígenos nucleares. Demonstra uma reação de coloração homogênea no substrato celular. Controle positivo pontilhado: anticorpos IgG para Sm e ou AG nucleares. Coloração pontilhada. Controle positivo nuclear: coloração nucleolar. Controle positivo centromérico: coloração pontilhada
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