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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO – UFRJ Prática 5 – Microscopia de fungos filamentosos Rio de Janeiro 2020 1 INTRODUÇÃO Os fungos filamentosos (bolores ou mofos) e leveduras são organismos eucariontes, pluricelulares e unicelulares respectivamente, são heterotróficos, e geralmente são encontrados em habitat úmido e rico em matéria orgânica. O método da fita adesiva é amplamente utilizado para a coleta de fungos filamentosos para análise em microscópio. Essa técnica consiste na captura de microrganismos com uma fita adesiva por meio de uma leve pressiona da fita sobre a cultura, que acabam por aderir à superfície da mesma. Contudo, a técnica é amplamente empregada por ser uma técnica simples e rápida, além de permitir a visualização das estruturas anamórficas dos fungos e assim ser possível fazer a análise até o nível de gênero. Figura 1: Técnica da fita adesiva 2 OBJETIVO O objetivo dessa prática experimental foi realizar a microscopia óptica de dois fungos filamentosos o Penicillium spp. e o Aspergillus spp. isolados através da técnica de fita adesiva. 3 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Para o procedimento experimental foram utilizados fungos do gênero Penicillium spp., o comum bolor do pão, o qual se desenvolve em matéria orgânica como no solo e em outros ambientes úmidos e escuro, apresentando crescimento com aspecto esverdeado e bordas brancas. E também foram utilizados fungos do gênero Aspergillus spp. que atuam como agentes decompositores de alimentos, apresentando crescimento com aspecto preto no micélio aéreo e crescimento na cor branca na área do micélio vegetativo. Primeiramente foi ligado o bico de Bunsen para que o trabalho fosse realizado na segurança e assim evitando o crescimento de microrganismos indesejáveis. Em seguida foi adicionada uma gota de azul lactofenol (responsável pela coloração de fungos) sobre uma lâmina. Posteriormente foi feito o procedimento da técnica de fita adesiva, em que foi pressionada a fita adesiva sobre o crescimento fúngico de forma suave e a mesma foi colada na superfície da lâmina. No entanto, repete-se o processo para aumentar a confiabilidade, pois podem ocorrer danos na estrutura ao realizar o processo. Seguidamente foi feita a observação em microscópio, para fungos filamentosos a lente objetiva com aproximação de 40x é possível observar a estrutura de forma nítida. Entretanto, uma desvantagem dessa técnica é em alguns casos o conidióforo pode ser agredido, não sendo possível observar sua estrutura completa. Figura 2: Micrografia Penicillium spp. O procedimento anterior foi repetido para o fungo Aspergillus spp., por serem fungos grandes foi possível observar as estruturas com a lente objetiva na aproximação de 10x. Pelo fato de produzirem melanina os Aspergillus apresentam uma coloração mais escura, não sendo necessária a adição de corante para a sua observação. Figura 3: Micrografia Aspergillus spp. 4 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS VERMELHO, A. B.; PEREIRA, A. F.; COELHO, R. R. R.; SOUTO-PADRÓN, T. C. B. Práticas de Microbiologia. Editora Guanabara Koogan. Disponível em: <https://farmatecaunicatolica.files.wordpress.com/2017/12/prc3a1ticas- de-microbiologia-vermelho.pdf>. Acesso dia 10/10/2020. Disponível em: <https://br.depositphotos.com/403907020/stock-photo- penicillium-fungis-microscopy-microbiology-classroom.html>. Acesso dia 10/10/2020. Disponível em: <https://atlasmicologia.blogspot.com/2012/02/aspergillus- microscopia.html>. Acesso dia 10/10/2020. https://farmatecaunicatolica.files.wordpress.com/2017/12/prc3a1ticas-de-microbiologia-vermelho.pdf https://farmatecaunicatolica.files.wordpress.com/2017/12/prc3a1ticas-de-microbiologia-vermelho.pdf https://br.depositphotos.com/403907020/stock-photo-penicillium-fungis-microscopy-microbiology-classroom.html https://br.depositphotos.com/403907020/stock-photo-penicillium-fungis-microscopy-microbiology-classroom.html https://atlasmicologia.blogspot.com/2012/02/aspergillus-microscopia.html https://atlasmicologia.blogspot.com/2012/02/aspergillus-microscopia.html
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