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Quest.: 1 A carioteca é a membrana celular presente, nos eucariotos, capaz de separar o núcleo do citoplasma, os procariotos não possuem carioteca. Marque a alternativa correta. Quest.: 2 O operon Lac tem como função principal: Quest.: 3 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: . Aluno: Matr.: Disciplina: Período: - ) / 1. O núcleo celular em bactérias é importante para proteger dos bacteriófagos. A ausência da carioteca torna os procariotos mais complexos, uma vez que não precisam gastar energia sintetizando uma membrana a extra. O núcleo celular serve para que o RNAm sintetizado no citoplasma pelos ribossomos não seja degradado. A carioteca é responsável por separar o material genético dos organismos eucariontes, do restante do citoplasma. Desta forma todo o processo de transcrição e tradução é feito no núcleo e depois as proteínas são exportadas para o citoplasma. O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. 2. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da galactose e lactose Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e glicose. Transcrever um RNAm monocistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela inibição do metabolismo da glicose. Transcrever um RNAm policistrônico que irá ser traduzido em proteínas responsáveis pela metabolização da galactose e lactose. 3. O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. Quest.: 4 4. Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as k primeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem: Aleatória simples Probabilística Não-probabilística Sistemática Por etapas Quest.: 5 5. Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA: O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina. A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias. Tubos de vidro devem ser evitados. O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma. A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA. Quest.: 6 6. O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Quest.: 7 7. Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas. Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta. O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA. A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa. A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA. A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase. Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G. Quest.: 8 8. Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição - restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados. Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta. Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências simultaneamente. A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas fitas de polímero sintetizadas. O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas. Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter o cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações. Quest.: 9 9. O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades. Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por completo. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Quest.: 10 10. As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-seem uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento). A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger.
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