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Manual Coloração de Gram técnica 1) Desinfectar a bancada de trabalho com álcool 70. 2) Pingar uma gota de água destilada estéril em uma lâmina de vidro. 3) Com o auxílio de uma alça bacteriológica estéril coletar bactérias previamente inoculadas em placas de ágar. 4) Esfregar a alça na água destilada que está na lâmina. 5) Secar a lâmina próximo a chama de bico de Bunsen. 6) Adicionar o cristal violeta em toda região da lâmina que contém o esfregaço. 7) Esperar 1 minuto. 8) Remover o excesso de cristal violeta. 9) Adicionar o lugol e esperar 1 minuto, também remover o excesso. 10) “Lavar” a lâmina com álcool-cetona: despejar a solução descorante até parar de escorrer a solução arroxeada. 11) “Lavar” rapidamente a lâmina em água corrente (5 seg). 12) Adicionar a fucsina e aguardar 45 segundos. 13) “Lavar” a lâmina em água corrente e esperar secar ( não utilizar papel para secagem). 14) Após secagem, colocar uma gota de óleo de imersão na lâmina e levar ao microscópio para visualização.
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