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Metabolismo bacteriana Enzimas bacterianas Ø São proteínas que aumentam a velocidade de reações – diminuem a energia de ativação sem aumentar a temperatura ou a pressão no interior da célula Ø Catalisadores sem alteração permanente Ø São específicas, atuam em um substrato específico Componentes das enzimas o Algumas são constituídas inteiramente de proteínas o Maioria possui uma fração protéica: apoenzima e um componente não protéico: cofator – íon metálico ou uma molécula orgânica complexa (coenzima) Apoenzima + cofator = holoenzima (enzima completa) Coenzimas Ø Auxiliar as enzimas pela admissão ou doação de átomos Ø Muitas coenzimas são derivadas de vit Ø Mais importantes no metabolismo (carreadores de elétrons): NAD+ - molécula, quando recebe elétrons fica NADH NADP+ Metabolismo microbiano Ø Toda atividade que tem -Liberação de energia -Utilização de energia Energia para: • Biossíntese das partes estruturais das células • Síntese de enzimas, ácidos nucléicos, polissacarídeos, fosfolipídios... • Reparo de danos e manutenção da célula em boas condições • Desenvolvimento e multiplicação • Armazenamento de nutrientes e excreção de produtos indesejáveis • Mobilidade • Várias reações catabólicas (catabolismo = degradação): concentram a energia nas ligações do ATP • O catabolismo fornece unidades básicas para síntese = anabolismo (gasto de energia) Produção de ATP pelos micro-organismos ATP DIRETO= Fosforilação em nível de substrato Fosfato de um composto fosforilado (substrato) é removido e adicionado diretamente ao ADP - glicose se liga ao PO4 (fosfato) Geralmente o fosfato adquiriu energia durante uma reação inicial na qual o próprio substrato foi oxidado Transporte de e= Fosforilação oxidativa Carreador de elétrons (NAD+) doa elétrons para uma série de carreadores que faz reação de oxidação e red., vão perdendo energia no caminho até a molécula de O2 ou outras moléculas inorgânicas, a energia perdida forma o ATP o Ocorre na membrana citoplasmática dos procariotos (membrana mitocondrial eucariotos) Fotofosforilação Energia da luz é utilizada para síntese de ATP o Exclusivo de células fotossintéticas Vias metabólicas de produção de energia Metabolismo dos nutrientes (degradação) – quimiotróficos Catabolismo o Libera energia e precursores à síntese o Processo metabólico inicia no meio externo: hidrólise de macromoléculas, transportadas através da membrana celular (ativo ou passivo) Gram positivas Produzir exoenzimas clivando os nutrientes (meio extracelular), que são captados por proteínas transportadoras 1º quebra: meio extra Gram negativas Grande número de porinas associadas à membrana externa que permitem a passagem de moléculas hidrofílicas, de baixa massa molecular para o espaço periplasmático 1º quebra: espaço periplasmático Metabolismo Bacteriano Metabolismo dos carboidratos Ø Fonte primária de energia da maioria das bactérias Ø Produção de energia a partir da glicose (mais comum): • Respiração celular aeróbia ou anaeróbia • Fermentação o Ambas começam com a glicólise, mas seguem vias subsequentes vias diferentes Glicólise: oxidação da glicose a ácido pirúvico com produção de ATP e energia contida em NADH Ciclo de Krebs: oxidação de um derivado do ácido pirúvico (acetil coenzima-A) a CO2, com produção de ATP, energia contida em NADH e FADH2 Glicólise Ø Primeira etapa no catabolismo de carboidratos Ø Ocorre na fermentação e respiração Ø Série de 10 reações químicas o NAD+ é reduzido a NADH o Produção de 2 ATP (fosforilação em nível de substrato) recebe fosfato que é utilizado na produção de ATP o Pode ocorrer em condições aeróbias ou anaeróbias Aeróbia: aceptor final de elétrons é o O2 Anaeróbia: aceptor final de elétrons é uma molécula inorgânica Respiração celular aeróbia- – Ciclo de Krebs ou ciclo do ác. tricarboxílico (TCA) Ácido pirúvico não entra diretamente no ciclo de Krebs, antes sofre descarboxilação que resulta em acetil Acetil + coenzima A = acetil-CoA (ligação de alta energia) Para cada 2 moléculas de acetil-CoA que entram no ciclo • 4 moléculas de CO2 são liberadas • 6 moléculas de NADH • 2 moléculas de FADH2 • 2 moléculas de ATP o O ciclo Krebs pode funcionar através de carbonos derivados dos lipídeos (na forma de Acetil CoA) e aminoácidos, essas etapas servem para degradar todos os outros nutrientes Respiração celular aeróbia – Cadeia de transporte de elétrons: Ø NADH e FADH2 são oxidados e regenerados Ø Cascata de reações de oxirredução envolvendo uma série de transportadores de elétrons. Ø Energia das reações é utilizada para gerar grande quantidade de ATP Ø Compostos org. completamente degrados Ø O2 é o aceptor final de elétrons Ø Ocorre na membrana citoplasmática Ø Transportadores de elétrons e a ordem como atuam pode diferir entre as bactérias (diferente de eucariotos) Ø Todas as cadeias tem o mesmo objetivo básico: energia liberada quando elétrons são transferidos de compostos de alta energia a compostos de baixa energia Cadeia de transporte de elétrons 3 classes de moléculas carreadoras de elétrons Ø Flavoproteínas contêm flavina, uma coenzima derivada da (vitamina B2), são capazes de realizar oxidações e reduções s alternadas Ø Citocromos são proteínas que contêm um grupo ferro (heme)- vários tipos Coenzimas reduzidas – cadeia de transporte de elétrons Ø Ubiquinonas, ou coenzima Q, são pequenos carreadores não proteicos Respiração celular anaeróbia Ø Compostos orgânicos são degradados e uma molécula diferente do O2 é o aceptor final de elétrons (carbonato, sulfato, nitrato, fumarato) Ø Quantidade de ATP formada varia com microrganismo e via Respiração celular anaeróbia e aeróbia: RENDIMENTO Respiração anaeróbia < respiração aeróbia (ATP) • Somente uma parte do ciclo de Krebs funciona sob anaerobiose • Nem todos os transportadores participam da cadeia de transporte de elétrons na respiração anaeróbia Portanto, anaeróbios tendem a se desenvolver mais lentamente Fermentação Ø Degradação parcial Ø Presenca ou auxencia de oxigênio Ø Produz pequenas quantidades de ATP Ø Ácido pirúvico (quebra da glicose) é convertido em vários produtos finais, dependendo da espécie bacteriana Ø Segunda etapa da fermentação garante constante suplemento de NAD+ e NADP+ (reciclagem) para sempre se ter glicólise Ø ATP é gerado somente durante a glicólise Ø O produto final depende do microrganismo, do substrato e das enzimas presentes e ativas (etsnol ác.latico) Ø Mesmo sendo a fermentação ineficiente (energeticamente), na presença de nutrientes fermentáveis ilimitados é possível produzir grande quantidade de ATP Metabolismo da glicose – rendimento: Respiração aeróbia > respiração anaeróbia > fermentação Catabolismo dos lipídeos Ø São necessárias lipases: ácidos graxos e glicerol Ø Ciclo de Krebs oxidação de glicerol e ácidos graxos Catabolismo das proteínas Ø Proteases e peptidases Ø Aminoácidos sofrem desaminação, descarboxilação e/ou desidrogenação Anabolismo Pegar as unidades e polimerizar p/ compor a estrutura • Proteínas • Ácidos nucléicos • Polissacarídeos • Lipídeos Biossíntese de aminoácidos e proteínas • Alguns microrganismos possuem as enzimas necessárias para, a partir de materiais iniciais (como a glicose e sais inorgânicos), sintetizar todos os aminoácidos que necessitam. Metabolitos focais Produtos intermediarios para o processo de catabolismo utilizados para biossintese/ anabolismo • Glicose 6-fosfato • Fosfoenolpiruvato • Oxaloacetato • α-cetoglutarato Integração do metabolismoReações anabólicas e catabólicas estão unidas através de um grupo de intermediários comuns A sequência das subunidades em uma macromolécula é determinada por uma das duas formas • Ácidos nucléicos e proteínas: sequência dirigida por um molde: DNA • Carboidratos e lipídeos: especificidade enzimática • Depois das macromoléculas sintetizadas elas se reúnem para formar as estruturas supramoleculares: ribossomos, membranas, parede celular, flagelos... = maioria dos produtos finais de biossíntese
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