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Microbiologia – Controle do crescimento microbiano • Motivo: - Prevenir a transmissão de doenças; - Evitar a decomposição de alimentos; - Evitar a contaminação da água e do ambiente. • Modos: → Esterilização - Remoção ou destruição de todas as formas de vida microbiana, incluindo os endósporos; - O aquecimento é o modo mais comum; - Esterilização comercial: ⋙ Os alimentos enlatados são submetidos somente ao calor suficiente para destruir os endósporos de Clostridium botulinum, que pode produzir uma toxina mortal. OBS.: príons são altamente resistentes a todas as formas de esterilização. → Desinfecção - Controle voltado para a destruição de microrganismos nocivos - Refere-se à destruição de patógenos na forma vegetativa - Processos: ⋙ Substâncias químicas, radiação ultravioleta, água fervente ou vapor. - Uso de produto químico para tratar de uma superfície ou substância inerte (desinfetante); - Tratamento dirigido a tecidos vivos (antissepsia) e o produto químico (antisséptico); - Variações da desinfecção: ⋙ Degerminação: remoção mecânica, em vez da morte, em uma área limitada; ⋙ Sanitização: reduzir as contagens microbianas a níveis seguros de saúde pública e minimizar as chances de transmissão de doença de um usuário para o outro; - Nome dos tratamentos ⋙ Causam a morte direta do microrganismo: possuem o sufixo -cida. Ex.: biocida, germicida, fungicida, viricida. ⋙ Inibem o crescimento e a multiplicação: sufixo -stático ou -stase. Ex.: bacteriostase. ⋙ Contaminação bacteriana: sepse. Ex.: asséptico Taxa de morte microbiana Quando as populações microbianas são aquecidas ou tratadas com substâncias químicas antimicrobianas, elas normalmente morrem em uma taxa constante. TAXA DE MORTE MICROBIANA Tempo (min.) Mortes por min. Nº de cél. Vivas 0 0 1.000.000 1 900.000 100.000 2 90.000 10.000 3 9.000 1.000 4 900 100 5 90 10 6 9 1 Fatores que influenciam o tratamento microbiano: - Tamanho da população: » Quanto maior a população microbiana maior o tempo de tratamento; - Características microbiana: » Presença de endósporos, variação de sensibilidade dos micróbios vegetativos; - Concentração do agente: » Quanto mais concentrado o agente, maior a eficiência; - Tempo de exposição: » Os antimicrobianos químicos frequentemente requerem exposição prolongada para que os microrganismos ou endósporos mais resistentes sejam afetados; - Temperatura: » Temperaturas mais altas indicam maior eficiência no tratamento; - Condições ambientais: » A presença de matéria orgânica frequentemente inibe a ação dos antimicrobianos químicos. A natureza do meio de suspensão também é um fator importante no tratamento com calor. Ações dos agentes de controle microbiano - Alteração da permeabilidade da membrana: » Danos aos lipídios ou proteínas da membrana plasmática por agentes antimicrobianas causam o extravasamento do conteúdo celular no meio circundante e interferem no crescimento da célula. - Danos às proteínas e aos ácidos nucléicos: » Ligações de hidrogênio (ligações que mantêm a forma da proteína) são suscetíveis ao rompimento pelo calor ou por certos produtos químicos, o rompimento resulta em desnaturação da proteína. Danos aos ácidos nucleicos por calor, radiação ou substância química frequentes, são letais para a célula, que não poderá se replicar, nem realizar funções metabólicas normais. Métodos físicos de controle microbiano - Calor: » Mata os microrganismos pela desnaturação de suas enzimas. • Calor seco: mata por efeito de oxidação. Pode ser por chama direta (flambagem), esterilização em ar quente, estufa ou incineração. • Calor úmido: mata os microrganismos pela desnaturação, causada pela ruptura de ligações de hidrogênio. Pode ser por fervura (mata as formas vegetativas dos patógenos bacterianos), vapor (equivalente a água fervente) e autoclave. OBS.: Autoclave (121°C, 15 min, 1 atm) - Vapor sob pressão; - Quanto maior a pressão na autoclave, maior a temperatura; - Material cirúrgico, meios de cultura, material odontológico; Pasteurização: elimina bactérias patogênicas e quase todos os vírus patogênicos, principalmente utilizado na indústria de laticínios. - Lenta (63°C, 30 min): elimina 95% das bactérias e altera pouco o leite. - Pasteurização de alta temperatura e curto tempo (HTST – high-temperature short- time) (72°C, 15-20 s): eficiência de 99,5% na redução bacteriana, tem alteração pouco maior no leite. - Ultra high temperature (UHT) – processo longa vida (130°-150°C, 3-5 s): alta eficiência (99,99%), elimina todas as formas vegetativas das bactérias, alteração no sabor do leite, perdas de nutrientes e alteração da fração proteica. - Esterilização (120°C, 10 min) – altas temperaturas: elimina todas as formas de microrganismos, inclusive esporos, carameliza o leite, tornando-o escuro. - Filtração: » Passagem de um líquido ou gás por uma membrana ou tela, com poros pequenos o suficiente para reter os microrganismos. » Filtro de partículas de ar de alta eficiência (HEPA – high efficiency particule air) - (0,3 μm): reduz o número de microrganismos transmitidos pelo ar. » Filtro de membrana (0,2 μm): composto por ésteres de celulose ou polímeros plásticos. - Baixas temperaturas: » Depende do tipo de microrganismo e da intensidade de aplicação, causa a diminuição ou interrupção do metabolismo celular. - Ressecamento: » Os microrganismos não crescem ou se reproduzem, mas podem permanecer viáveis por anos. - Radiação: » Radiação ionizante: radiações de pequeno comprimento de onda (alta energia e penetrabilidade). Composta de raios gama, raios x ou feixe de elétrons de alta energia. Causa a lesão do DNA, com a formação de radicais livres muito reativos. Pode ser usada em fármacos, soro, vacinas, material médico, etc. » Radiação não-ionizante: possuem ondas com maior comprimento. A forma mais utilizada é a luz ultravioleta (UV) e serve para esterilizar o ar em ambientes fechados. A desvantagem é que apresenta baixa penetrabilidade (não atravessa vidros, filmes escuros e outros materiais). Métodos químicos de controle microbiano - Usados para controlarem o crescimento de microrganismo em ambos os tecidos vivos e os objetos inanimados. Dificilmente se obtém a esterilidade, mas a maioria reduz a população microbiana em níveis seguros ou removem as formas vegetativas do patógenos. - Características dos agentes químicos: alta toxicidade, solúvel em água, estabilidade elevada, inócuo para homens e animais, ausência de afinidade por matérias orgânicas estranhas, toxicidade para os microrganismos em temperatura ambiente, capacidade de penetração, não ser corrosivo e nem manchar, desodorante e detergente. - Tipos de desinfetantes: - Fenol e compostos fenólicos: » Lesam a membrana plasmática, inativam as enzimas e desnaturam as proteínas, nos dias atuais ele raramente é usado, pois irrita a pele e tem um odor desagradável. Os derivados de fenol, contêm uma molécula de fenol que foi quimicamente alterada pra reduzir suas propriedades irritantes ou aumentar sua atividade antibacteriana, em combinação com um sabão ou detergente. - Biguanidas: » Destruição da membrana celular e precipitação dos componentes internos da célula microbiana. É frequentemente utilizada no controle microbiano da pele e mucosas, sendo efetiva para a maioria das bactérias vegetativas e fungos e sua atividade não é afetada por matérias orgânicas. - Halogênios: » Iodo: possui ação bactericida, fungicida, virucida e ação residual. » Iodóforo: desinfecção da pele e tratamento de feridas. » Cloro: atua como gás ou em combinação com outras substâncias químicas. Ação germicida é causada peloácido hipocloroso quando adicionado à água. - Álcoois: » São mais ativos na presença de água, desnaturam as proteínas e dissolvem os lipídios e atuam rapidamente contra os microrganismos. - Metais pesados e seus compostos: » Bastante utilizados como germicidas ou antissépticos, podendo ser utilizado a prata, mercúrio, cobre e zinco. - Agentes de superfície: » Podem reduzir a tensão superficial entre as moléculas de um líquido. • Sabão: pouco valor antisséptico, maior importância na remoção mecânica. • Detergente: a porção carregada da molécula reage com a membrana plasmática. - Compostos de amônio quaternário: » Ativos contra bactérias gram positivas e vírus com invólucro, mas perdem a eficiência na presença de matéria orgânica. - Antibióticos: » Controle microbiano através da ingestão ou aplicação superficial. - Aldeídos; - Quimioesterilizantes gasosos; - Peroxigênios (agentes oxidantes).
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