coloraçao de gram

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 LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
 COLORAÇÃO DE GRAM 
 
COLORAÇÃO DE GRAM 
 
 
 
Uma etapa crucial no processo de identificação do agente etiológico é a 
caracterização morfológica do micro-organismo. Etapa que embasa a escolha de quais 
procedimentos serão adequados para a realização de provas bioquímicas e/ou a 
utilização de meios de cultura. Entretanto, os micro-organismos são incolores por 
natureza, sendo necessários métodos de coloração para auxiliar na visualização da 
morfologia bacteriana. 
Devido à necessidade da visualização e diferenciação das bactérias, o método 
desenvolvido em 1884 pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, permitiu 
essa coloração (método de Gram) que está sendo utilizada até os dias atuais como 
método básico de triagem e confirmação desses micro-organismos. 
A técnica de coloração de Gram é uma técnica de coloração diferencial, pois 
reage de maneira diferente nos distintos tipos de bactérias, com base na estrutura da 
parede celular. 
A parede celular das bactérias Gram positivas é composta por uma espessa 
camada de peptideoglicanos (proteínas + carboidratos). Algumas também possuem uma 
camada de ácido teicóico externa à camada de peptideoglicanos. O Lugol (iodo-iodeto 
de potássio), utilizado no método de coloração de Gram, fixa o cristal violeta a este tipo 
de parede celular, corando as bactérias em roxo. 
As bactérias que possuem uma camada delgada de peptidoglicano (1 a 3 nm), 
seguida por uma segunda camada denominada membrana externa (7 a 8 nm), não 
possuem a capacidade de reter o complexo primário de cristal violeta/lugol após o 
tratamento com o álcool. Contudo, para a visualização da morfologia bacteriana, essas 
bactérias com uma fina parede celular são contrastadas com Safranina ou fucsina e são 
classificadas como bactérias Gram-negativas. 
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 COLORAÇÃO DE GRAM 
As colorações Gram-positiva e Gram-negativa de bactérias permitem a 
visualização da morfologia geral das células bacterianas, promovendo a classificação 
desses micro-organismos em bastonetes e em cocos, por exemplo. Essa classificação é 
importante para a taxonomia dos micro-organismos, além de auxiliar na avaliação da 
pureza da cultura e no diagnóstico preliminar de pacientes. Contudo, é importante 
salientar que alterações no procedimento (técnica e reagentes) de coloração podem 
ocasionar prejuízo no resultado da microscopia. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 
 
 
 
MOYES, RB; REYNOLDS, J; BREAKWELL, DP. Differential staining of bacteria: gram stain. 
Curr Protoc Microbiol. 2009 Nov; Appendix 3:Appendix 3C. 
 
OPLUSTIL, C. P., Microbiologia Clínica. SARVIER): São Paulo. 339p. 2004. 
 
ANVISA, AGÊNCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA. Segurança e Controle de 
Qualidade no Laboratório de Microbiologia Clínica, 2005, 37p. 
 
KONNEMAN, E.W.; et al. Diagnóstico Microbiológico, Texto e Atlas Colorido. Ed. 
Médica e Científica: RJ. 1465p. 2001. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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